影像与检验 ＣＨＩＮＡ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＢｓＡｇ 采用胶体金试纸法检测时的漏检情况探讨 王业坤 郴州市中心血站，湖南郴州４２３０００ 【摘要】目的探讨ＨＢｓＡｇ采用胶体金试法与ＥＬＩＳＡ酶标法检测时漏检情况比较。方法选择该站２０１１年５—１０月无偿献血 者标本中用国产和进口两种ＥＬＩＳＡ酶标试剂筛查ＨＢｓＡｇ均为阳性的标本１８５例。行胶体金试法检测，对造成胶体金法漏 检的资料进行回顾性分析。结果ＥＬＩＳＡ酶标法１８５例血清标本检测中，ＨＢｓＡｇ阳性，男性ｌｌ０例。女性７５例。胶体金试纸法 １８５例血清标本检测中，ｌ１０例男性样品中ＨＢｓＡｇ阳性６５例，阳性率为５９％，漏检率为４１％。７５例女性样品中ＨＢｓＡｇ阳性 ４Ｏ例，阳性率为５３％，漏检率为４７％。男女两组比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论针对胶体金试纸法检测ＨＢｓＡｇ的漏 检情况，对于ＨＢｓＡｇ浓度较低的标本，胶体金法检测时易出现假阴性造成漏检，需进一步提高胶体金试纸法的灵敏度，降低 无偿献血ＨＢｓＡｇ阳性的报废率；采用ＥＬＩＳＡ酶标法，同时在利用ＥＬＩＳＡ酶标法对ＨＢｓＡｇ进行检测时，需应用相关部门提供 的血清临界值做质控。以防止漏检发生 ［关键词】ＨＢｓＡｇ；ＥＬＩＳＡ酶标法；胶体金试纸法；检测；漏检乙型肝炎（乙肝） 【中图分类号】Ｒ４４６．６ ［文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７４—０７４２（２０１２）Ｏ９（ｂ）一０１７５—０２ 病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）作为输血相关传染病主要筛查项目 ２滴全血，后加１滴推进液，行５ ｍｉｎ静止后对结果进行判断，只 之一，广泛开展应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），在经血传播疾 １条红色对比线在测试区为阴性。２条为阳性。 病筛查中起到重要作用，如乙肝、丙肝、艾滋、梅毒检测等。并取 １．３统计方法 得显著成效，其灵敏度和特异性得到国家认可。同时我国作为乙 采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件，计数资料行ｘ 检验。 肝大国，乙肝是无偿献血不合格比率主要组成部分之一，如能提 ２结果 高在血液采回血站之前的检出率，将进一步降低经血传播的风 ２．１ ＥＬＩＳＡ酶标法 险，节约血液资源，降低采供血的各种成本。随着目前医疗科技 １８５例血清标本检测中，ＨＢｓＡｇ阳性１８５例。 的进一步发达．胶体金试纸法因不需特殊检测设备和仪器，方便 ２．２胶体金试纸法 操作的优势．在ＨＢｓＡｇ筛查中发挥了较为重要的作用。但当标本 １８５例血清标本检测中，ｌｌ０例男性样品中ＨＢｓＡｇ阳性６５ 中ＨＢｓＡｇ在ＥＬＩＳＡ酶标法测定时滴度太高。易有假阴性情况出 例，阳性率为５９％。７５例女性样品中ＨＢｓＡｇ阳性４０例，阳性率 现，而导致漏检发生Ⅲ。对ＨＢｓＡｇ标本为低滴度时，采用胶体金试 为５３％。 纸法进行检测．因检测不出有假阴性情况存在．导致漏诊发生。 ＨＢｓＡｇ阳性标本采用胶体金试纸法未检出的８０例采用 该研究选择２０１１年５—１０月该站无偿献血者标本，采用国产和 ＥＬＩＳＡ酶标法检测，ＯＤ值较低，但全部为阳性，与ｃｕｔ ｏｆｆ值接 进口两种ＥＬＩＳＡ酶标试剂筛查ＨＢｓＡｇ均为阳性的标本１８５例。 近．表明此例标本ＨＢｓＡｇ浓度相对较低。而现有胶体金法对此例 分男女两组分别行胶体金试法检测，对两组漏检资料进行回顾 标本灵敏度不够，而造成漏检。根据资料，标本中ＨＢｓＡｇ滴度太 性对比分析．再与文献提供的ＥＬＩＳＡ酶标法提供的漏检情况进 高，对原血清采用ＥＬＩＳＡ酶标法检测有后滞现象发生，而导致漏 行比较，现报告如下。 诊出现 １资料与方法 ２．３胶体金试纸法与ＥＬＩＳＡ酶标法的漏检情况比较 １．１一般资料 两者比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），两种方法的漏检情况 该站１４ ３０９例无偿献血筛查中用国产和进口两种试剂ＨＢ— 比较．差异有统计学意义。 ｓＡｇ均检测为阳性标本１８５例。为无偿献血者，对其血清标本进 ２．４不同性别组比较 行胶体金试纸法对比检测。男性１１０例，女性７５例。 ＥＬＩＳＡ酶标法１０５例阳性患者中．胶体金试纸法阳性患者 １．２方法 中，性别组差异无统计学意义，两组比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。 １．２．１ ＥＬＩ ＳＡ酶标法国产试剂采用珠海丽珠生物工程有限公 ３讨论 司生产的（ＨＢｓＡｇ）酶标试剂盒，进口试剂采用意大利索林公司生 目前，在临床肝炎病毒中，乙肝发病率占有较高比例，对患 产的（ＨＢｓＡｇ）酶标试剂盒，严格按说明书在有效期内操作，行实 者的生命健康和社会稳定造成严重影响，人群中受感染的患者 验同时均行质控检测。结果评定：阳性为ＯＤ值＞ｃｕｔ ｏｆｆ值。洗板 慢性携带者占１０％，且乙肝携带患者中大部分将发展至慢性肝 机：瑞士ＦＡＭＥ２４／２０型全自动酶免仪。酶标仪：瑞士ＦＡＭＥ２４／２０ 炎，具有较严重的危害型。据国内外医学报道，目前判断乙肝患 型全自动酶免仪。 者病情变化以检测乙肝二对半和ＨＢＶ—ＤＮＡ的定量作为治疗效 １．２．２胶体金试纸法采用胶体金试纸条，在试纸条箭头区内滴 果和预后成效的分析依据。但由于乙肝二对半比较复杂和ＨＢＶ— ＣＨＩＮＡ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ 中夕ｌ医疗 ｌ ７ ５ ２０１２ Ｎ０ ２６ 而 葡 ＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ 影像与检验 目前，在国内采供血机构及各大医院中对血液标本检测 ＨＢｓＡｇ时通常应用ＥＵＳＡ酶标法，但因所用ＥＵＳＡ酶标试剂盒 ＤＮＡ的特异性指标，检测判断相对棘手。以往对乙肝进行诊断过 程中．酶联免疫法为对乙肝两对半进行检测的主要方法，但由于 检测结果是患者在对ＨＢＶ感染后的免疫状态，血清中抗体蛋白 存在变性状况．直接影响检测后的结果。有报道采用荧光定量 内反应孑Ｌ里有一定的抗体量包被，各标本抗原量存在差异，其 ０Ｄ值在含量与试剂盒相近时，与标本含量成正比，而抗原在血 清中呈较高水平时，则有后滞现象出现，可导致假阴性发生，造 成漏检发生。故在采用ＥＬＩＳＡ酶标法对血清标本进行检测时。 需采用卫生部临检中心提供的低值质控血清测定值，宜在ｃｕｔ ＰＣＲ荧光探针法（ＦＱ—ＰＣＲ）进行实时荧光检测，对反应体扩增 后的荧光信号进行捕捉。荧光信号变化到某～值，会呈循环状， 利于循环次数与ＤＮＡ量进行定量，有效对乙肝病毒本身进行检 测。采用此方法可直接可靠的对ＨＢＶ 复制情况进行反应，成为 有效的判断依据。相关研空显示［２１，采用ＥＬＩＳＡ进行乙肝两对半 进行检测的几种常见模式中，大三阳患者有较高的ＰＣＲ检测符 合率．小三阳符合率表现普通。表明ＨＢｅＡｂ有较低的复杂ＨＢＶ 能力。在ＰＣＲ法检测之下，检测出患者有较低的病毒复制，小三 ０ｆｆ值比值２～３间的ＥＬＩＳＡ酶标试剂盒为佳，为ｌ ｎｇ／ｍＬ。再联 合０．５ ｎｇ／ｍＬ低界值血清做质控．保证ＨＢｓＡｇ检出低值弱阳性 标本。 总之，ｌ临床采用ＥＬＩＳＡ法检测无偿献血者标本大概检出比 率在１％一２％，这样给采供血的质量把关形成很大的压力，同时 造成很大的采供血物资、检测成本、不合格血液处理等成本的上 阳对乙肝病毒的复制变化情况表现不明显。通过酶联免疫法检 测乙肝二对半为全阴，在ＰＣＲ法检测的时候，在ＰＣＲ的高灵敏 度检测之下，可以检测变异的ＨＢＶ变异体，弥补酶联免疫法的 不足。 升。如能将金标法作进一步的改进，提高其检测的灵敏度，这样 在采血现场用金标法提高乙肝快检的准确率．一是节约了献血 员的血液，降低了实验室的风险，二是降低了采供血的成本，提 高了采供血的质量和效率。故针对胶体金试纸法和ＥＬＩＳＡ检测 ＨＢｓＡｇ的漏诊情况，用胶体金试纸法检测阳性的标本在成一定 倍数稀释后，采用ＥＬＩＳＡ酶标法进行检测．可使对强阳性标本的 目前．因胶体金试纸条法检测快速，操作方便，在大量样本 现场检测中较为适用，胶体金试纸法有较低敏感性，ＨＢｓＡｇ低浓 度阳性标本敏感度低，有较高漏检率，ＥＬＩＳＡ酶标法相对敏感， ０．１—０．２ ｎｇ／ｍＬ的ＨＢｓＡｇ采用ＥＵＳＡ酶标法即可检测．有较低漏 诊率．但该研究结果中，ＥＬＩＳＡ酶标法１４ ３０９例无偿献血者血清 标本检测中，ＨＢｓＡｇ阳性１８５例，阳性率为１．２９％。胶体金试纸法 １８５例ＥＵＳＡ法阳性血清标本检测中，ＨＢｓＡｇ阳性１０５例，阳性 率为５６．８％，其中假阴性８０例，为４３．２％。两组比较差异有统计 学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。胶体金试法检测的ＨＢｓＡｇ阳性结果中，与 漏检降低，同时在利用ＥＬＩＳＡ酶标法对ＨＢｓＡｇ进行检测时，需 应用相关部门提供的血清临界值做质控，以降低漏检发生率。 【参考文献】 【１］李宏杰．胶体金免疫层析试验检测ＨＢｓＡｇ等项目与医疗安全Ｉｊ１．中国 医学文摘・检验与临床，２００６，２０（６）：３２１． ［２２】李文新．金标法测ＨＢｓＡｇ漏检原因分析［ＪＪ．检验医学，２００４，１９（２）：９２． （收稿日期：２０１２—０７—２６） ＥＬＩＳＡ法检测结果有差异性，故采用金试纸测法检测容易造成 漏诊 （上接第１７４页） 【参考文献】 ［１］王文娟．高频彩色多普勒超声在ｄ＇ＪｌＡ．￥尿系结石诊断中 ）Ｅ￣［Ｊ／ＣＤ］． 中华医学超声杂志，２００９，６（２）：３６０—３６２． ［２】王培颖，申明宇．超声诊断睾丸微小结石症及ｌＪ蠡床价值［Ｊ】．中国超声医 学杂志，２００９，２５（１ １）：１０６３—１０６５． ［３］求钦军，俞子东，俞远成，等．高低频超声结合诊断输尿管疾病的临床价 值［Ｊ】＿中国超声诊断杂志，２００６，７（９）：６６７． 【４】叶青．１２例后尿道结石超声鉴别诊断分析ＩＪＩ．中国误诊学杂志，２００８，８ （１）：２２６． （收稿Ｅｌ期：２０１２—０４—１０） １ ７ ６ 中外医疗ＣＨＩＮＡ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ
