中华实用诊断与治疗杂志２０１ ５年３月第２９卷第３期Ｊ Ｃｈｉｎ Ｐｒａｃｔ Ｄｉａｇｎ Ｔｈｅｒ，Ｍａｒ．２０１５，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．３ ・ ２２３ ・ ・论 著・ 重症肌无力患者胸腺组织抗原处理 与提呈相关基因表达的研究 梁 玉 ，李倩如 ，刘萍萍 ，崔新征 ，高 峰。，张清勇 ，杜 英 （１．郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室，郑州４５０００１；２．郑州大学第二附属医院胸外科，郑州４５００１４； ３．河南省医药科学研究院，郑州４５００５２） 摘要：目的探讨抗原处理和抗原提呈在重症肌无力患者胸腺组织Ｔ细胞异常分化中的作用。方法 收集５例重症肌 无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）患者（ＭＧ组）和５例非自身免疫性先天性心脏病患者（对照组）胸腺组织，提取ＲＮＡ，反转 录为ｅＤＮＡ，采用树突状细胞与抗原提呈相关基因芯片进行实时定量ＰＣＲ，采用ＡＡＣｔ方法对数据进行分析，比较２组 ＡＣｔ值。结果 ２组树突状细胞和抗原提呈细胞芯片中含有８４种共８类基因；ＭＧ患者胸腺组织表达水平明显增高基 因有９种，包括与抗原摄取、提呈相关的ＴＡＰ２、ＣＤ４、ＴＨＢＳ１和与细胞因子及细胞因子受体相关的ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、 ＣＸＣＬ２、干扰素．ｙ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ７，ＩＦＮ ｙ）、白细胞介素一６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一６，ＩＬ一６）、ＥＲＢＢ２；ＭＧ组ＣＣＬ２（一０．３４ ４－０．０６）， ＣＣＩ ３（３．０３±０．４５），ＣＤ４（一２．９５±０．１１），ＣＸＣＬ２（０．６６±０．２１），ＥＲＢＢ２（３．２５土０．３９），ＩＦＮ一 （３７４±０．４４），ＩＬ一６ ．（１．６４±０．２２），ＴＡＰ２（一１．５１±０．１５），ＴＨＢＳ１（０．７６４－０．５５）基因ＡＣｔ值与对照组（３．６４±０．０３、４．１１±０．１２、一０．５６± ０．０５、２．２６±０．８６、４．５３±０．４８、６．３７±０．８７、５．７６±１．０６、０．０５±０．０１、３．８３±０．７６）比较差异均有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）；９种基因ＭＧ组２ ／ｘ￣照组２ 均＞２。结论 ＭＧ患者胸腺组织多种抗原提呈作用相关的基因表达存在异 常，可能与Ｔ细胞在胸腺的异常分化有关。 关键词：重症肌无力；胸腺；抗原提呈；基因表达 Ｇｅｎｅｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｙｍｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ ＬＩＡＮＧ Ｙｕ ，ＬＩ Ｑｉａｎ－ｒｕ，Ｉ．ＩＵ Ｐｉｎｇ—ｐｉｎｇ，ＣＵＩ Ｘｉｎ—ｚｈｅｎｇ， ＧＡ（）Ｆｅｎｇ．ＺＨＡＮＧ Ｑｉｎｇ—ｙｏｎｇ．ＤＵ Ｙｉｎｇ （＊Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｎ ａｂｎｏｒｍａｌ ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｙｍｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｙｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ（ＭＧ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ＲＮＡ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｙｍｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ５ ＭＧ ｐａｔｉｅｎｔｓ（ＭＧ ｇｒｏｕｐ）ａｎｄ ５ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ），ａｎｄ ｆｉｎｉｓｈｅｄ ｆｉｒｓｔ ｓｔｒａｎｄ ｅＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ＰＣＲ ａｒｒａｙ．． Ｔｈｅ ｄａｔａ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＡＡＣｔ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ＡＣｔ ｖａｌｕｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓＲｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ＰＣＲ ａｒｒａｙ ｐｒｏｆｉｌｅｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ８４ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ８ ｃｌａｓｓｅｓ ｉｎ ２ ｇｒｏｕｐｓ，ｉｎ ｗｈｉｃｈ ９ ｇｅｎｅｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｔｈｙｍｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ＭＧ ｐａｔｉｅｎｔｓ，ｓｕｃｈ ａｓ ａｎｔｉｇｅｎ ｕｐｔａｋｅ—ａｎｄ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ－ｒｅｌａｔｅｄ ＴＡＰ２，ＣＤ４ ａｎｄ ＴＨＢＳ１，ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ—ｒｅｌａｔｅｄ ＣＣＬ２，ＣＣＬ３，ＣＸＣＬ２，ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ一７（ＩＦＮ一．ｙ）， ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６（ＩＬ一６）ａｎｄ ＥＲＢＢ２．Ｔｈｅ ＡＣｔ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ＣＣＩ ２（一０．３４±０．０６），ＣＣＬ３（３．０３±０．４５），ＣＤ４（２．９５±０．１１）， ＣＸＣＬ２（０．６６４－０．２１），ＥＲＢＢ２（３．２５±０．３９），ＩＦＮ一７（３．７４±０．４４），ＩＬ一６（１．６４±０．２２），ＴＡＰ２（一１．５１±０．１５）ａｎｄ ＴＨＢＳ１（０．７６±０．５５）ｉｎ ＭＧ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（３．６４±０．０３。４．１ １± ０．１２，一０．５６±０．０５，２．２６±０．８６，４．５３±０．４８，６．３７４－０．８７，５．７６±１．０６，０．０５±０．０１，３．８３４－０．７６）（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ２ 。ｒａｔｉｏ ｏｆ ９ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ＭＧ ｇｒｏｕｐ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｌａｒｇｅｒ ｔｈａｎ ２．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ａｒｅ ａｂｎｏｒｍａｌ ｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｉｎ ｔｈｙｍｉｃ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ＭＧ ｐａｔｉｅｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｂｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｂｎｏｒｍａ１ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌ】． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ；ｔｈｙｍｕｓ；ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ；ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ 重症肌无力（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ，ＭＧ）是Ｔ细胞 ｄｏ￣：１０．１３５０７／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４ ３４７４．２０１ ５．０３．００６ ＊基金项目：国家自然科学基金（８１１７２８７４）。 依赖性自身免疫性疾病，多数存在胸腺结构和功能异 常，切除胸腺是治疗ＭＧ的主要方法之一［ 。胸腺是 Ｔ细胞分化成熟的场所，胸腺上皮细胞和胸腺树突状 通信作者：杜英，Ｅ ｍａｉｌ：ｄｕｙｉｎｇ ＠ＺＺＵ．ｅｄｕ．ｃｎ。 细胞通过膜表面抗原肽一主要组织相容性复合体分子 ・２２４・ 中华实用诊断与治疗杂志２０１５年３月第２９卷第３期Ｊ Ｃｈｉｎ Ｐｒａｃｔ Ｄｉａｇｎ Ｔｈｅｒ，Ｍａｒ．２０１５，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．３ 复合物、协同刺激分子和黏附分子向表达Ｔ细胞受体 的胸腺细胞提呈抗原，是Ｔ细胞在胸腺发育分化成熟 １ Ｌ，加灭菌水至１３ Ｌ，６５℃５ ｍｉｎ冰上１ ｍｉｎ。再 依次加入５×Ｆｉｒｓｔ—Ｓｔｒａｎｄ Ｂｕｆｆｅｒ ４ Ｉ…０ １ ｍｏｌ／Ｌ 的重要环节，也是排除自身反应性Ｔ细胞的关键因素＿２］。本文探讨ＭＧ患者胸腺组织中树突状细胞及 与抗原提呈细胞相关基因的表达情况，报道如下。 １ 资料与方法 １．１ 一般资料 ２０１２年７月一２０１３年５月郑州大 ＤＴＴ １ Ｌ、ＲＮａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ １ Ｌ、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＩＩ ＲＴ １ Ｌ。５０℃温育６Ｏ ｍｉｎ。７０℃１５ ｍｉｎ使酶失活。 １．２．４ 实时定量ＰＣＲ 将上述合成ｃＤＮＡ每 ２０ Ｌ加９１ Ｉ 灭菌水进行稀释。取稀释ｃＤＮＡ １０２ Ｌ加入２×ＳｕｐｅｒＡｒｒａｙ ＰＣＲ ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘ（Ｃａｔ． 学第二附属医院临床确诊的ＭＧ患者５例（ＭＧ组）， 男２例，女３例；年龄１２～１７岁，抗乙酰胆碱受体抗体 Ｎｏ．ＰＡ一１１２）５５０ Ｉ ，ｄｄＨ。Ｏ ４４８ Ｌ。取１０ Ｉ 混合 液加至ＰＣＲ Ａｒｒａｙ孔，置实时定量ＰＣＲ仪进行反应。 （＋），胸腺组织病理分型均为单纯胸腺细胞增生型（非 胸腺瘤型）。对照组为自身抗体阴性的非自身免疫性 ９５℃１０ ｍｉｎ；９５℃１５ Ｓ，６０℃１ ｍｉｎ，４０个循环。读 取荧光曲线。计数Ｃｔ值，采用ＡＡＣｔ法，Ｃｔ值为每个 先天性心脏病患者５例，男３例，女２例；年龄３～１１ 岁。２组年龄、性别比例比较差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）。 １．２ 方法 反应管内的荧光信号到达设定域值所经历的循环数。 ＡＣｔ（试验组）一试验组平均Ｃｔ一试验组看家基因平均 Ｃｔ；ＡＣｔ（对照组）一对照组平均Ｃｔ一对照组看家基因 平均Ｃｔ。ＡＡＣｔ—ＡＣｔ（对照组）一ＡＣｔ（试验组）。 １．２．１ 仪器与试剂ＴＲＩＺＯＩ 试剂（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公 １．３ 统计学处理 ｔ检验，实验组２ 应用ＳＰＳＳ １７．０软件进行统计 ／ｘ，１照组２一 “＞２为明显增 司），ＲＮｅａｓｙ＠ＭｉｎＥｌｕｔｅ丁Ｍ纯化试剂盒（Ｑｉａｇｅｎ公司）， ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ Ｉｌｌ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公分析，计量资料以均数±标准差（ ±ｓ）表示，比较采用 高，ｄ０．５为明显降低，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意 义。 ２ 结 果 司），ＰＣＲ Ａｒｒａｙ（ＳＡｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ公司）。 １．２．２ ＲＮＡ抽提及纯化取２组患者胸腺组织５０ ｍｇ，去筋膜、血污，按ＴＲＩＡＯＬ试剂说明提取总 ＲＮＡ。将ＲＮＡ溶液过柱、洗脱，获得纯化ＲＮＡ。采 用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳检测ＲＮＡ。 ＲＮＡ溶液的Ａ 。。／Ａ。 。比值为１．９８，电泳出现２８Ｓ、 ２．１ ２组胸腺ｍＲＮＡ表达ＰＣＲ芯片所含基因种类 试验中选择ＰＣＲ芯片含有８４种基因，根据基因功 能可分为８类，分别为抗原摄取、抗原提呈、树突状细 １８Ｓ和５Ｓ ３个条带，表明提取的ＲＮＡ未被降解，其纯 度也符合实验要求。 １．２．３ ｃＤＮＡ合成 取１．５／ｚｇ ＲＮＡ，加入 ５００ ｍｇ／Ｌ ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１ ｕＬ，１０ ｎｍｏｌ／Ｌ ｄＮＴＰｓ Ｍｉｘ 胞趋化作用、树突状细胞分化、细胞因子、其他细胞表 面受体、信号转导。２组患者胸腺组织８４种基因均有 不同程度表达。见表ｌ。 表１ ２组胸腺ｍＲＮＡ表达ＰＣＲ芯片所含基因的名称及功能 基因功能 抗原摄取 ＣＤ４４，ＣＤＣ４２，ＩＣＡＭ１，ＩＣＡＭ２，ＲＡＣ１，ＴＡＰ２ 基因名称 ＣＣＬ１ ９，ＣＤ１Ａ，ＣＤ１Ｂ，ＣＤ１Ｃ，ＣＤ１Ｄ，ＣＤ２０９，ＣＤ２８，ＣＤ４ 抗原提呈 ＤＭＡ，ＨＬＡ＿ＤＰＡ１，ＴＡＰＢＰ，ＴＨＢＳ１ 树突状细胞趋化作用 树突状细胞分化 ＣＳＦ２（ＧＭ－ＣＳＦ），ＬＹＮ，ＲＥＬＢ，ＴＧＦＢ１ ＣＣＬ１１（Ｅｏｔａｘｉｎ），ＣＣＬ１３（ＭＣＰ＿４），ＣＣＩ １ ６（ＨＣＣ４），ＣＣＬ１ ９，ＣＣＩ ２（ＭＣｐ－１），ＣＣＬ３（ＭＩＰ＿１Ａ），ＣＣＩ ５（ＲＡＮＴＥＳ），ＣＣＬ７，（ＭＣＰ＿３），ＣＣＩ ８（ＭＣ Ｐ＿ 细胞因子 ２），ＣＳＦ２（６Ｍ－ＣＳＦ），ＣＸＣＬ１，ＣＸＣＩ １０（ＩＮＰ１０），ＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ１），ＣＸＣＬ２，ＦＬＴ３ＬＧ，ＩＦＮＧ，ＩＬ－１０，ＩＩ，１２Ａ，Ｉ １ ２Ｂ，ＩＩ『１ ６，ＩＩ ２，１Ｉ ６，１Ｉ 一８，ＭＩＦ， ＴＮＦ，ＴＮＦＳＦ１１ 细胞因子受体 其他细胞表面受体 ＣＣＲ１，ＣＣＲ２，ＣＣＲ３，ＣＣＲ５，ＣＳＦ１Ｒ，ＣＸＣＲｌ（ＩＬ８ＲＡ），ＣＸＣＲ４，ＦＬＴ３，ＥＲＢＢ２（ＨＥＲ２） ＣＤ２，ＣＤ４Ｏ（ＴＮＦＲＳＦ５），ＦＣＥＲ１Ａ，ＦＣＥＲ２，ＦＣＧＲ１Ａ，Ｉ ＲＰ１，ＴＬＲ１，ＴＬＲ２，ＴＬＲ７，ＴＬＲ９，ＶＣＡＭｌ 信号转导 ＣＤＫＮ１Ａ（ｐ２１ＣＩＰ１／ＷＡＦ１），ＣＥＢＰＡ，ＣＬＥＣ４Ｃ，ＦＡＳ，ＩＲＦ７，ＩＲＦ８，ＩＴＧＡＭ，ＩＴＧＢ２，ＬＹＮ，ＮＦＫＢ１，ＰＴＰＲＣ，ＲＥＬＡ，ＲＥＬＢ，ＳＴＡＴ３，ＴＧＦＢ１ 注：ＩＦＮ（干扰素，ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）；ＩＩ （白细胞介素，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ）。 ２．２ ２组胸腺组织基因表达差异 ８４种基因中９种 中在２个方面，（１）抗原摄取提呈相关基因ＴＡＰ２、 在ＭＧ患者胸腺组织表达明显异常，异常表达基因集 ＣＤ４和ＴＨＢＳ１；（２）细胞因子及其受体相关基因 中华实用诊断与治疗杂志２０１５年３月第２９卷第３期Ｊ Ｃｈｉｎ Ｐｒａｃｔ Ｄｉａｇｎ Ｔｈｅｒ，Ｍａｒ．２０１５，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．３ ・２２５・ ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＸＣＬ２、ＩＦＮ一 、ＩＬ一６和ＥＲＢＢ２。ＭＧ组 上述基因ＡＣｔ值与对照组比较差异均有统计学意义 （Ｐ＜０．０５）。９种基因ＭＧ组２－－Ａ￣Ｃｔ／对照组２ △ｃ 均＞２。见表２。 表２ ＭＧ组胸腺组织基因表达异常基因 ３ 讨 论 ＭＧ是与胸腺结构和功能异常高度相关的自身免 疫性疾病。生理情况下，胸腺是Ｔ细胞分化成熟的重 要场所，胸腺上皮细胞、胸腺树突状细胞是构成Ｔ细 胞发育分化微环境的主要因素，通过其抗原处理和提 呈作用辅助Ｔ细胞在胸腺完成成熟分化过程口］。因 此胸腺上皮细胞、树突状细胞的抗原处理和提呈作用 在Ｔ细胞分化成熟过程中发挥重要作用。本研究结 果显示，ＭＧ组患者胸腺组织中８４种抗原提呈相关基 因中筛查出９种基因表达明显异常，此９种基因根据 功能可分为２类，第１类是与抗原摄取和提呈相关基 因ＣＤ４和ＴＨＢＳ１；第２类是细胞因子及其受体，如 ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＸＣＬ２、ＩＦＮ一 、ＩＬ一６和ＥＲＢＢ２。 ＣＤ４分子可表达于胸腺细胞表面，与胸腺细胞的 分化成熟相关，ＴＡＰ一２与ＴＡＰ一１共同跨膜表达于内 质网膜，通过对内源性抗原肽的转运，促使抗原肽一主 要组织相容性复合体Ｉ类分子复合物在胸腺基质细胞 表面的表达。ＴＡＰ一２表达受多种细胞因子（ＩＮＦ一丫、 ＩＬ－１０等）调节ｌｌ４］，其表达异常与多种疾病相关。 ＴＨＢＳ１是具有免疫调节特性的细胞基质糖蛋白，能抑 制ＡＰＣ功能。Ｇａｎｄｈｉ等 研究结果显示，ＴＨＢＳ１是 转化生长因子Ｊ３的活化因子，进而诱导Ｔｈ１７形成＿６］。 本研究结果显示，ＭＧ组患者胸腺组织ＣＤ４、ＴＡＰ２和 ＴＨＢＳ１表达水平（ＡＣｔ值）均高于对照组，提示ＭＧ 患者胸腺细胞亚群分化异常与这些基因的异常增高有 关。 研究结果 。 显示，ＣＣＬ２在Ｂ细胞依赖的自身免 疫反应中促进Ｔｈ１７反应细胞发生，Ｔｈｌ７可辅助Ｂ细 胞产生致病性ＩｇＧ２ｂ抗体介导ＮＭＪ功能阻滞，形成 实验性自身免疫性ＭＧ。本研究结果显示，ＭＧ患者 胸腺组织ＣＣＬ２表达明显增高，与文献＿７ 报道结果相 一致，提示ＣＣＬ２可能通过多种机制影响Ｔ细胞分化 成熟和Ｔ细胞亚群形成，参与疾病发生、发展。胸腺 上皮细胞和胸腺细胞均可表达ＥＲＢＢ２，但其表达量低 于胸腺肌样细胞。本研究结果显示，ＭＧ患者胸腺组 织ＥＲＢＢ２表达增加，提示患者胸腺肌样细胞增多，与 疾病发生的关系尚需进一步研究。本研究结果显示， ＩＮＦ一 和ＩＬ一６在ＭＧ患者胸腺中表达增高。文献［９］ 报道，阻断ＩＬ一６活性可抑制实验性ＭＧ进展。提示 ＩＬ一６可促进疾病进展，ＩＦＮ－７则通过调节ＴＡＰ表达 及促进胸腺细胞分化而影响疾病进展。 本研究结果提示，上述９种异常增高表达的基因 主要与抗原提呈细胞的抗原摄取、抗原提呈及细胞因 子和细胞因子受体相关，提示ＭＧ胸腺异常的发生机 制与胸腺上皮细胞和胸腺树突状细胞的抗原提呈作用 及其释放细胞因子的作用高度相关，进而影响Ｔ细胞 的分化成熟，与疾病的发生、发展相关。 参考文献 Ｅ１］陈秀，王道喜，李耀奇，等．８２例重症肌无力胸腺切除患者围手术 期管理［Ｊ］．中华实用诊断与治疗杂志，２０１１，２５（９）：９０９—９１１． Ｅ２］Ｌｉ ＸＬ，Ｌｉｕ Ｙ，Ｃａｏ ＬＬ，ｅｔ ａ１．Ａｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ ｂｙ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ Ｔｒｅｇ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｈｉｆｔｅｄ Ｔｈｌ／Ｔｈｌ ７ ｔｏ Ｔｈ２ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２０１３，５６（Ｉ）：８５—９５． ［３］朱惠民，张旭，陈根强，等．重症肌无力患者血清ＭｕＳＫ抗体水平 检测及其临床意义［刀．中华全科医学，２０１１，９（９）：１３３８—１３３９． Ｅ４３ Ｓｐｉｄａｌｅ ＮＡ，Ｗａｎｇ Ｂ，Ｔｉｓｃｈ Ｒ．Ｃｕｔｔｉｎｇ ｅｄｇｅ：ａｎｔｉｇｅｎ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ ｆｅｅｄｂａｃｋ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｈｏｍｅｏｓｔａｔｉｃ ｔｈｙｍｉｃ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１４，１９３（１）：２ｉ－２５． ［５］ Ｇａｎｄｈｉ ＮＢ，Ｓｕ ｚ，Ｚｈａｎｇ ｘ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １ ｉｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｏｃｕｌａｒ ｓｕｒｆａｃｅ Ｔｈｌ７ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｅｓｉｃｃａｔｉｎｇ ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ， ２Ｏ１３，９４（６）：１２９３—１３０１． ［６］张还珠，罗荣城．ＭＣＦ一７荷瘤小鼠血清及树突状细胞上清液中炎 性细胞因子水平变化及意义［Ｊ］．中华实用诊断与治疗杂志， ２０１２，２６（１２）：１１６５－１１６７． ［７３ Ｂａｉ Ｙ，Ｌｉｕ ＲＬ，Ｈｕａｎｇ Ｄ，ｅｔ ａ１．ＣＣＬ２ ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ＩＬ一６一 ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ＣＤ１ １ ｂ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｄｒａｉｎｉｎｇ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｈｌ ７－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｂ ｃｅｌｌ ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００８，３８（７）：１８７７—１８８８． ［８］Ｗｅｉｓｓ ＪＭ，Ｃｕｆｉ Ｐ，Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｊ．ＳＤＦ一１／ＣＸＣＬ一１２ ｒｅｃｒｕｉｔｓ Ｂ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎ—ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｔｈｅ ｔｈｙｍｕｓ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１３，２１８（３）： ３７３—３８１． Ｅ９］ Ａｒｉｃｈａ Ｒ，Ｍｉｚｒａｃｈｉ Ｋ，Ｆｕｃｈｓ Ｓ．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｏｆ ＩＬ－６ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ￣Ｊ］．Ｊ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ， ２Ｏ１１，３６（２）：１３５－１４１． 收稿日期：２Ｏ１４－１卜１９ 修回日期：２０１５－０卜２２ 本文编辑：王君秋
