≯ 宵摩 黼学诼 ２Ｏ１７ Ｖｏ１．１８ Ｎ０．３ 临床研究与经验 二代杂交捕获（ＨＣ２）技术对预测宫颈癌及癌前病变的价值 Ｖａｌｕｅ ｏｎ ＨＣ２ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｌｅｓｉｏｎｓ 王昱，王秀梅 （ＬＩＪ西省太原市妇幼保健院，山西太原０３００１２） 摘要 目的：探讨二代杂交捕获技术（ＨＣ ）对于预测宫颈癌及癌前病变的价值。方法：２０１２年１月一２０ｌ３年ｌ１月对 ２ ４８２例来自我院ｆ１诊及住院患者采用ＨＣ 技术进行ＨＰＶ检查，阳性者在阴道镜下行宫颈活检，做组织病理学检查、结 果：２ ４８２例患者中阳性７８９例（３１．８％），阴性１ ６９３例（６８．２％）。阳性患者中２３２例进行宫颈活检。高危型ＨＰｖ在慢性 炎症、ＣＩＮ Ｉ、ＣＩＮⅡ、ＣＩＮⅢ级以及宫颈病变中感染率分别为７５．６％、９２．２％、９５．９％、１００％、ｌ００％。ＨＣ，用于ＨＰＶ检查，其 阳性率结果与组织病理学有较高符合率，其阳性率随着宫颈病变严重程度增加呈上升趋势。结论：ＨＣ 检测具有高度的 敏感性，阳性预测值高，是一种值得信赖的方法。 关键词ＨＣ２；ＨＰＶ；宫颈癌；癌前病变 中图分类号：Ｒ７３７．３３ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ６７１—０２５８（２０１７）０３—００４８—０２ 世界范围研究表明，ＨＰＶ可以在９９．８％的宫颈 加２５０倍。在中国每年约有ｌ３万宫颈癌新发病例， 占世界子宫颈癌发病总数的２８．２％。宫颈癌病因明 趋势，其发病以每年２％～３％的速度不断增长…。所 以对ＨＰＶ检测预测宫颈癌及癌前病变的诊断就 的ＲＮＡ探针是检测试剂中所使用的探针，此种探 １．３统计学方法 癌患者中发现，ＨＰＶ的感染使宫颈癌的相对危险增 针有两个类型，分别能检测低危型和高危型ＨＰＶ。 临床所得数据均使用ＳＰＳＳ１６．０软件进行统 检验，以Ｐ＜０．０５为差异具有统计学意义。 ２结果 确，ＨＰＶ是其致病根源。近年来其发病有年轻化的 计分析，计数资料采用卡方检验，计量资料采用ｔ 十分重要，本院采用美国Ｄｉｇｅｎｅ公司发展的二代 杂交捕获试验法（ＨＣ ），对２ ４８２例宫颈病变患者 进行检测，取得了良好效果，现报道如下。 １资料与方法 ２．１ 判断标；隹 ≥１．０ ｐｇ／ｍＬ（Ｉ＞５ ０００ ｃｏｐｉｅｓ／ｍＬ）为Ｉ５｝Ｉ性，＜１．０ ｐｇ／ｍＬ为阴性。 ２．２ ＨＣ 阳性率与病理学诊断结果对比 ２ ４８２例患者采用Ｈｃ：技术进行ＨＰＶ检查， 结果阳性７８９例（３１．８％），阴性１ ６９３例（６８．２％） ＨＣ：阳性率中２３２例患者进行阴道镜下宫颈活 检，其阳性率随着宫颈病变严重程度增加晕ＬＹｔ １．１ 一般资料 抽取２０１２年１月一２０１３年ｌ１月来我院妇科 门诊就诊的２ ４８２例宫颈病变患者，年龄１９～６５ 岁，平均４０岁，未婚或已婚有性生活史２年以上。 患者均出现以下几类病变症状：乳头样增生、宫颈 糜烂、肥大、接触性出血等。 １．２研究方法 趋势，且在ＣＩＮ以上病变中ＨＣ 阳性率为１００％， 结果见表ｌ。 表ｌ ２３２例患者ＨＣ 阳性率与病理学诊断结果对比（例） 将宫颈用窥器完全暴露，使用Ｄｉｇｅｎｅ公司提 供的专用ＨＰＶ采样刷，伸人宫颈口，同一方向旋 转３圈并在里面停留１０ Ｓ，之后将采样刷多余部 分折断，妥当放置于专用的标本储存瓶内，以保留 足够标本，盖上盖子，做好标记，置于２ ～８℃环 境待检。高危型ＨＰＶ—ＤＮＡ检测试剂盒及基因杂 交捕获仪均购自美国Ｄｉｇｅｎｅ公司，特异性非标记 ［作者简介］王 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉｕｍｅｉ １２２０＠１６３．ｃｏｒｎ ３讨论 临床研究与经验 愈 摩７ｉ｝隧学诼 ２０１７年第１８卷第３期 宫颈癌的发生、发展受多种因素，宫颈局 中，在癌前期组织中，病毒常位于染色体之外，而 部感染ＨＰＶ是高危因素之一。ＨＰＶ即人乳头瘤 在癌症进展期，病毒ＤＮＡ以单拷贝或多拷贝串联 病毒，其与宫颈ＣＩＮ病变及宫颈癌关系密切。 方式整合于宿主细胞ＤＮＡ中。除Ｅ 、Ｅ 整合到宿 ＨＰＶ是一种嗜上皮细胞，在人群中有广泛分布。 主ＤＮＡ外，其他全部脱落，所以高级别上皮内瘤 １９７４年，德国病毒学家Ｚｕｒ Ｈａｕｓｅｎ博士提出 变罕见挖空样改变。ＨＰＶ感染后，ＨＰＶ ＤＮＡ复制 ＨＰＶ与子宫颈癌发病相关的假设。但是，ＨＰＶ的 与正常细胞成熟同步进行，未成熟细胞中呈 研究却被这样一个事实所阻碍，即ＨＰＶ病毒无法 潜伏状态存在，即未成熟细胞中病毒ＤＮＡ不会复 在体外培养，又无合适的实验动物，在体内也不能 制，具体机制有待进一步研究。大部分ＨＰＶ感染 被诱导出易于检测的免疫反应，且在活体内的扩 呈一过性［２－３１，可通过自身免疫力清除，大部分报道 增效率非常低，直到建立了聚合酶链反应（ＰＣＲ） 清除时间８～１４个月不等。当ＨＰＶ感染以整合状态 方法，ＨＰＶ检测的临床意义才被发现。人们对 存在于宿主细胞中，使繁殖停止在复制周期的某一 ＨＰＶ感染与宫颈癌发生的关系认识Ｅｔ渐统一，即 时相时，可导致ＨＰＶ持续感染，这种持续或反复 ＨＰＶ感染是宫颈ＣＩＮ及宫颈癌发生的必要因素。 ＨＰＶ感染可使发生宫颈癌的风险明显增加。多数专 随着分子生物学技术的发展，不仅从宫颈病变组 家认为从发现ＨＰＶ感染开始，之后２４个月内感染 织中分离出了ＨＰＶ ＤＮＡ，并可对ＨＰＶ进行分型。 持续存在，则认定为持续感染。目前我们认为，如感 ＨＰＶ的基因结构主要由两个开放读码框架 染高危ＨＰＶ后，如果不能依靠自体免疫力将病毒 （ＯＲＦｓ）构成，包含了６个早期转录单位（ｅａｒｌｙｇｅｎｅ 清除，感染就会持续存在，从而引起宫颈细胞发生 ｒｅｇｉｏｎ，Ｅ区）：Ｅ１、Ｅ２、Ｅ４、Ｅ５、Ｅ６、Ｅ７；２个晚期转录单 异常改变，就有可能继续向癌变的方向进展ｒ４】。 位（１ａｔｅ ｇｅｎｅ ｒｅｇｉｏｎ，Ｌ区）：Ｌ１、ＩＪ２。Ｅ１、Ｅ２是病毒 目前对宫颈癌及其癌前病变临床推广认可的 ＤＮＡ复制和获得感染的调节蛋白，其中Ｅ：还控 方法主要有ＴＣＴ及ＨＰＶ检查。ＨＰＶ检查已成为 制着病毒基因的原始转录和复制，同时还抑制 筛查宫颈癌的重要方法之一，ＨＣ：ＨＰＶ检测是被 Ｅ 、Ｅ 的转录作用。Ｅ 、Ｅ 是病毒的癌基因，参与调 世界卫生组织认可的可用于临床的ＨＰＶ检测技 控宿主的病毒基因表达与复制，在细胞永生化当 术，并已在世界范围内普遍应用，采用基因杂交信 中起重要作用。根据其与宫颈癌及癌前病变的关 号扩大仪，利用对抗体捕获信号的放大和化学发 系，ＨＰＶ可分为高危型（ｈｉｇｈ ｒｉｓｋ，ＨＲ—ＨＰＶ）和低 光信号的检测，此法使用全长的ＲＮＡ探针可以防 危型（１ｏｗ ｒｉｓｋ，ＬＲ—ＨＰＶ）。ＨＲ—ＨＰＶ感染后无明确 止由于Ｌ１基因段缺失导致的假阳性。ＨＣ：可同时 的组织病理学改变，ＬＲ—ＨＰＶ感染常有特征性的 检测１３种高危型ＨＰＶ，操作简便，具有高灵敏度， 组织病理学改变，即挖空样细胞（ｋｏｉｌｏｃｙｔｏｓｉｓ）形 阴性预测值高，用荧光计直接读检测结果，客观性 成，形态学上表现为核增大、不规则，可有双核，核 及重复性均较好［５］。 周有空泡。其原因可能是Ｅ 编码的蛋白破坏了宿 综上所述，ＨＣ 检测法具有高度的重要性和 主细胞的中间体细丝，即核周围的蛋白质网导致 敏感性，阳性预测值高，是经临床验证的敏感的、 镜下呈挖空样改变。宿主细胞感染ＨＰＶ后，ＨＰＶ 可靠的检测技术，能有效预测宫颈癌发生的风险， ＤＮＡ可呈游离形式存在，也可整合到宿主细胞 最大限度保护妇女健康。 参考文献 ［１］陈铁峰，陈志央，丁福等．５２１例宫颈癌及癌前病变患者ＨＣ２－ＨＰＶ—ＤＮＡ检测结果分析［ｎ中国优生与遗传杂志，２００７，１５（５）：６６，７５． ［２］ｙｏｎ Ｋｎｅｂｅｌ Ｄ Ｍ．Ｎｅｗ ｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｄｙｓｐｌａｓｉａ ｔｏ ｖｉｓｕａｌｉｓｅ ｔｈｅ－ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｏｓ ｃｒｅａｔｅｄ ｂｙ ａｂｅｒｒａｎｔ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］． Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２００２，３８（１７）：２ ２２９—２ ２４２． ［３］ＷａｌｂｏｏｍｅｒｓＪＭ，ＪａｃｏｂｓＭＶ，ＭａｎｏｓＭＭ，ｅｔ ａｋＨｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓｉｓ ａｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｃａｕｓｅ ｏｆｉｎｖａｓｉｖｅ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒｗｏｒｌｄｗｉｄｅ［Ｊ］．ＪＰａｔｈｏｌ，１９９９，１８９ （１）：ｌ２—１９． ［４］付玉梅，张晓坤，梁惠芬，等．ＨＣｚ－ＨＰＶ—ＤＮＡ联合ＴＣＴ筛查宫颈癌早期及癌前病变的临床分析［Ｊ］．实用医学杂志，２０１２，２８（１１）：１ ８２３—１ ８２５． ［５］李大海，玛依努尔．尼亚孜．第二代杂交捕获法检测高危型人乳头瘤病毒的临床应用价值［Ｊ］．中国医药，２０１１，６（增刊）：３３—３６． （编辑：张世霞）
