山东医药２０１３年第５３卷第２８期 ＢＮＩＰ３在细胞凋亡与自噬中的作用 徐冉 ，魏珑珑 ，李志强 ，李晓锋 ，韩丽辉 （１山东大学医学院，济南２５００１２；２安丘市立医院） 关键词：ＢＮＩＰ３；凋亡；自噬；细胞 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２—２６６Ｘ．２０１３．２８．０４１ 中图分类号：Ｒ３２９．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—２６６Ｘ（２０１３）２８－０１０５－０４ ＢＮＩＰ３属于Ｂｅｌ－２家族蛋白中的ＢＨ３．ｏｎｌｙ亚家 ④ｃ．末端跨膜区（ＴＭ）：位于１６４～１９４位氨基酸，是 族，其结构、细胞内定位、对细胞生存的与ＢＨ３． ＢＮＩＰ３行使其促凋亡功能的最重要的结构域。对促 ｏｎｌｙ亚家族的其他蛋白不尽相同。近年来研究发 进细胞凋亡、同源二聚化、介导ＢＮＩＰ３定位到线粒 现，ＢＮＩＰ３不仅参与细胞的凋亡，同时细胞自噬 体、活化ＢＮＩＰ３至关重要…。但也有相关研究提 和坏死等过程。在不同的外界环境下，其方式 示，ｃ末端ＴＭ的同源氨基酸序列可能不是凋亡所 和作用效应也不尽相同，其方式的复杂性预示 必需的，该结构介导细胞非Ｃａｓｐａｓｅ依赖性的线粒 着其生物学活性的多样性。阐明其作用机制对于理 体凋亡途径 Ｊ。 解和控制多种病理、生理过程具有重要意义。本文 就ＢＮＩＰ３在细胞凋亡与自噬中的作用作一综述。 ＢＮＩＰ３ １ ＢＮ鹏的结构与定位 图１ ＢＮＩＰ３的结构简图 １．１ ＢＮＩＰ３的结构 ＢＮＩＰ３是一种能与腺病毒 １．２ ＢＮＩＰ３的定位正常生理条件下，人类多种正 Ｅ１Ｂ１９ｋＤ蛋白相互作用的蛋白质，ＢＮＩＰ３基因定位 常组织中均有ＢＮＩＰ３的表达，但表达量很低，仅能 于１０号染色体１０ｑ２６．３，包含６个外显子，基因序 从人脑细胞和骨骼肌细胞中检测到ＢＮＩＰ３的表 列全长５８５ ｂｐ，编码１９４个氨基酸，分子量约２１ 达 Ｊ，但也有部分细胞不表达ＢＮＩＰ３，如神经元 ｋＤ 。Ｂｃｌ－２家族蛋白是参与调节细胞凋亡的主要 细胞 ；而在缺氧条件下，ＢＮＩＰ３的表达上调。研究 蛋白之一，所有成员的蛋白结构中包含至少１个 证实，正常脑组织细胞中ＢＮＩＰ３的表达定位于细胞 Ｂｅｌ－２同源结构域（ＢＨ１～ＢＨ４）；而作为仅含ＢＨ３ 核；在外界压力如缺氧的诱导下，ＢＮＩＰ３的表达则由 同源结构域的ＢＮＩＰ３，主要包含以下功能结构域＿４，５ Ｊ 核转位至胞质 Ｊ。 （图１）：①ＰＥＳＴ结构域：位于５４～８１位氨基酸，可 在多种细胞中，ＢＮＩＰ３核内表达之后，绝大多数 被胞质内的蛋白酶迅速降解，是ＢＮＩＰ３蛋白降解的 存在于胞液或松散地结合在线粒体外膜上，当凋亡 靶位点，调节细胞内ＢＮＩＰ３蛋白的含量。②ＢＨ３结 信号被激活时，ＢＮＩＰ３从胞液转移到线粒体外膜引 构域：位于１０４～１１９位氨基酸，绝大多数促凋亡蛋 起线粒体功能障碍，最终引起细胞死亡＿】， 。而当 白通过此结构域与抗凋亡蛋白（Ｂｅｌ－２、Ｂｅ１．ＸＬ）形成 ＢＮＩＰ３与Ｅ１ Ｂ１９Ｋ共表达时，其表达定位于细胞核， 异二聚体后发挥促细胞凋亡功能＿ｌ Ｊ，而ＢＮＩＰ３的此 这在多种肿瘤细胞中得到证实 Ｊ。但当细胞核中 序列与其他Ｂｅ１．２家族也有所不同，ＢＮＩＰ３不通过此 ＢＮＩＰ３表达增加时，细胞死亡的数量却没有增加，这 途径形成异源二聚体，此结构域参与ＢＮＩＰ３介导的 可能与ＢＮＩＰ３和凋亡诱导因子（ＡＩＦ）的相互作用有 Ｃａｓｐａｓｅ依赖性线粒体凋亡途径。③氨基端结构域 关 。ＡＩＦ是一种线粒体黄素蛋白，在外界刺激 （ＮＨ２结构域）：位于１～４９位氨基酸，与ＢＨ３结构 下，ＡＩＦ从线粒体转移到细胞核，介导非Ｃａｓｐａｓｅ途 域具有相似的功能，ＢＮＩＰ３此结构域与ＴＭ结构域 径的细胞死亡；当抑制ＡＩＦ表达时，细胞凋亡的数量 在形成二聚体促进细胞凋亡中有着重要作用＿１ Ｊ。 会有所减少；同时，在许多肿瘤细胞中也发现ＡＩＦ的 表达水平下降。位于核内的ＢＮＩＰ３能够与ＡＩＦ启 基金项目：山东大学大学生科技创新基金项目（２０１１４７３）。 动子结合，招募多蛋白复合物ＨＤＡＣ１／ＰＳＦ抑制ＡＩＦ 通讯作者：韩丽辉，Ｅ—ｍａｉｌ：ｈａｎｌｉｈｕｉ＠ｓｄｕ．ｄｅｕ．ｃｎ 的转录和翻译，减少ＡＩＦ介导的ＤＮＡ裂解；这可以 】０５ 氧引起的自噬和细胞死亡时，ＬＣ３在自噬小体的定 位并未受影响，这表明ＢＮＩＰ３参与自噬小体一溶酶 体的融合。相反，阻断ＢＮＩＰ３的表达能够阻断ＬＣ３ 的转化和减少自噬性的细胞死亡Ｌ２ 。 ３．３ ｍＴＯＲ通路与ＢＮＩＰ３介导的自噬之间的关系 研究显示，ＢＮＩＰ３介导的自噬能够通过ｒｏＴＯＲ通 路介导。ｍＴＯＲ调节许多生物过程，包括蛋白质的 翻译、核糖体的合成、自噬和代谢，并可协调细胞内 外信号。在ｍＴＯＲ途径中，ＢＮＩＰ３直接结合Ｒｈｅｂ， 引起Ｒｈｅｂ ＧＴＰ减少，进而抑制ｍＴＯＲＣ２的功能，其 中ＢＮＩＰ３的ＴＭ结构域与Ｒｈｅｂ的Ｃｙｓｌ８１相互作 用。进一步研究发现，在缺氧微环境下，ＢＮＩＰ３的 ＢＨ３结构域作为ＨＩＦ．１的作用靶位，能与Ｂｅｃｌｉｎ．１一 Ｂｃｌ－２或Ｂｅｄｉｍ—Ｂｃ１．ＸＬ复合物相互作用，通过破坏 复合物释放Ｂｅｃｌｉｎ．１引发自噬，而不引起细胞死亡， 由ＢＮＩＰ３／ＢＮＩＰ３Ｌ介导的缺氧下的自噬是一种保护 机制，可以促进肿瘤转移＿２０』。常氧状态下，ＢＮＩＰ３ 和ＢＮＩＰ３Ｌ的ＢＨ３结构域足以启动自噬；缺氧环境 下，ＢＮＩＰ３和ＢＮＩＰ３Ｌ（作为ＨＩＦ的两个作用靶位）表 达同时受抑制时，缺氧引起的自噬才会受到抑制。 综上所述，ＢＮＩＰ３作为促凋亡蛋白，在正常生理 条件下不同细胞内其表达水平有所差异，并适度调 控细胞的生存与死亡；在各种外界压力下，尤其是在 缺氧条件下，细胞内高表达的ＢＮＩＰ３通过不同的途 径来调节细胞活动，不仅促进细胞凋亡，同时也可通 过增加细胞自噬使细胞存活，表明ＢＮＩＰ３很可能在 肿瘤的转移过程中发挥重要作用。ＢＮＩＰ３在细胞内 的作用效应和作用机制还需进一步探讨，相关研究 的深入将为肿瘤的靶向治疗提供新途径。 参考文献： ［１］Ｒａｙ Ｒ，Ｃｈｅｎ Ｇ，Ｖａｎｄｅ ＶＣ，ｅｔ ａ１．ＢＮＩＰ３ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｚｅｓ ｗｉｔｈ Ｂｃｌ一 ２／Ｂｃｌ Ｘ（Ｌ）ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｓ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｆ ａ Ｂｃｌ－２ ｈｏｍｏｌｏ－ ｇＹ ３（ＢＨ３）ｄｏｍａｉｎ ａｔ ｂｏｔｈ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ａｎｄ ｎｏｎｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｓｉｔｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２０００，２７５（２）：１４３９－１４４８． ［２］谢晋予，郑长黎．ＢＮＩＰ３基因及其与肿瘤的关系［Ｊ］．国际病理科 学与临床杂志，２００６，２６（４）：２９８－３０１． ［３］曾浩，黄颖，陈铌，等．促凋亡线粒体蛋白ＢＮＩＰ３的表达与 功能［Ｊ］．现代泌尿生殖肿瘤杂志，２０１０，２（２）：１１７—１２０． ［４］ＢｕＲｏｎ ＴＲ，Ｇｉｂｓｏｎ ＳＢ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ０ｆ Ｂｃｌ－２ ｆａｍｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒ ＢＮＩＰ３ ｉｎ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ：ＮＩＰｐｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ｈｅｅｌｓ ｏｆ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ，２００９，１６（４）：５１５－５２３． ［５］Ｂｕｒｔｏｎ ＴＲ。Ｈｅｎｓｏｎ ＥＳ，Ｂａｉｊｌａ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｐｍ．ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ Ｂｃｌ－２ ｆａｍｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒ，ＢＮＩＰ３，ｉｓ ｌｏｃａｌｉｚｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ ｇｌｉｌａ ｃｅｌｌｓ：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｍｕｈｉｏｆｒｍｅ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｕｎｄｅｒ ｈｙｐｏｘｉａ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２００６，１１８（７）：１６６０—１６６９． ［６］ＣａｍｐｂｅＨ ＰＤ，Ｗｅｉｎｂｅｒｇ Ａ，Ｃｈｅｅ Ｊ，ｅｔ １ａ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏ—ａｎｄ ｎａｔｉ．．ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｃｌ－２ ｆａｍｉｌｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｉｓｌｅｔｓ ｐｏｓｔ．．ｉ．． １０８ 山东医药２０１３年第５３卷第２８期 ｓｏｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｅｌｉ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，２０１２，２１（１）：４９－６０． ［７］Ｌｕｏ Ｌ，ＸｉｏｎｇＺＢ，ＺｅｎｇＨ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＢＮＩＰ３ ａｎｄｉｔｓ ｃｏｒ－ ｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｔｏ ＨＩＦ－１ ａｌｐｈａ ａｎｄ ＶＥＧＦ ｉｎ ｃｌｅａｒ ｃｅｉｌ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏ－ ｍａ［Ｊ］．Ｓｉｃｈｕａｎ Ｄａ Ｘｕｅ Ｘｕｅ Ｂａｏ Ｙｉ Ｘｕｅ Ｂａｎ，２０１２，４３（１）：７９－ ８２． ［８］Ｃｈｏ Ｂ，Ｃｈｏｉ ＳＹ，Ｐａｒｋ ＯＨ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｌａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＢＮＩＰ ｆｍａｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒｓ ｏｆ ＢＨ３－ｏｎｌｙ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ａｘｏｔｏｍｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃｅｉｌｓ，２０１２，３３（６）：６０５－６１０． ［９］Ｌｕ Ｚｈａｎｇ，Ｌｉ Ｌ，Ｌｅａｖｅｓｌｅｙ ＨＷ，ｅｔ ａ１．Ｃｙａｎｉｄｅ—Ｉｎｄｕｃｅｄ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ Ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ Ｃｅｌｌｓ Ｉｓ Ｐｒｏｍｏｔｅｄ ｂｙ ＢＮＩＰ３ ａｎｄ Ｂａｘ Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ０ｆ Ｅｎｄ０ｐｌａｓｍｉｃ Ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ．Ｍｉｔｏｅｈｏｎｄｒｉａｌ Ｃａ Ｌｅｖｅｌｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒ． ｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ，２０１０，３３２（１）：９７－１０５． ［１Ｏ］Ｂｕｒｔｏｎ ＴＲ，Ｅｉｓｅｎｓｔａｔ ＤＤ，Ｇｉｂｓｏｎ ＳＢ．Ｂｃｌ－２ Ｎｉｎｅｔｅｅｎ ｋｉｌｏｄａｈｏｎ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＢＮＩＰ３）ａｃｔｓ ａｓ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｒｅｐｒｅｓｓｏｒ ｏｆ Ａｐ— ｏｐｔｏｓｉｓ Ｉｎｄｕｃｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒ（ＡＩＦ）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｇｌｉｏｍａｓ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｍｓｃｉ，２００９，２９（１３）： ４１８９＿４１９９． ［１ １］Ｌａｗｒｉｅ ＣＭ，Ｓｕｌｉｓｔｉｊｏ ＥＳ，Ｍａｃｋｅｎｚｉｅ ＫＲ．Ｉｎｔｅｒｍｏｎｏｍｅｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂｏｎｄｓ ｅｎｈａｎｃｅ ＧｘｘｘＧ．ｄｒｉｖｅｎ ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＢＮＩＰ３ ｔｒａｎｓｍｅｍ． ｂｒｎａｅ ｄｏｍａｉｎ：ｒｏｌｅｓ ｆｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｃｏｎｔｅｘｔ ｉｎ ｈｅｌｉｘ—ｈｅｌｉｘ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２０１０，３９６（４）：９２４－９３６． ［１２］Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｌｉ Ｌ，Ｌｉｕ Ｈ，ｅｔ ａ１．ＢＮＩＰ３ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｃｅｉｌ ｄｅａｔｈ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒ－ ｅｎｔ ｐａｔｈｗａｙｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｔｏ ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ ａｎｄ ｍｉｔｏｅｈｏｎｄｒｉｏｎ［Ｊ］．ＦＡＳＥＢ Ｊ，２００９，２３（１０）：３４０５－３４１４． ［１３］Ｔｒａｃｙ Ｋ，Ｄｉｂｌｉｎｇ ＢＣ，Ｓｐｉｋｅ ＢＴ，ｅｔ ａ１．ＢＮＩＰ３ ｉｓ ａｎ ＲＢ／Ｅ２Ｆ ｔａｒ－ ｇｅｔ ｇｅｎｅ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ａｕｔｏｐｈａｇｙ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉ— ｏｌ，２００７，２７（１７）：６２２９－６２４２． ［１４］Ｆｅｎｇ Ｘ，Ｌｉｕ Ｘ，Ｚｈａｎｇ Ｗ，ｅｔ ａ１．ｐ５３ ｄｉｒｅｃｔｌｙ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＢＮＩＰ３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｔｏ ｐｒｏｔｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ［Ｊ］．ＥＭ・ ＢＯ Ｊ，２０１１，３０（１６）：３３９７－３４１５． ［１５］Ｋｉｍ ＪＹ，Ｋｉｍ ＹＪ，Ｌｅｅ Ｓ，ｅｔ ａ１．ＢＮｉｐ３ ｉｓ ａ ｍｅｄｉａｔｏｒ ｏｆ ＴＮＦ—ｉｎ— ｄｕｃｅｄ ｎｅｃｒｏｔｉｃ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ［Ｊ］．Ａｏｐｔｏｓｉｓ，２０１１，１６（２）：１１４－１２６． ［１６］Ｔｈｏｍａｓ ＲＬ，Ｋｕｂｌｉ ＤＡ，Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ ＡＢ．Ｂｎｉｐ３一ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｍｉｔｏｐｈａｇｙ［Ｊ］．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ， ２０１１，７（７）：７７５＿７７７． ［１７］Ｑｕｉｎｓａｙ ＭＮ，Ｔｈｏｍａｓ ＲＬ，Ｌｅｅ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｂｎｉｐ３－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍｉｔｏ— ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｓ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉｌａ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉ－ ｔｙ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｐｏｒｅ［Ｊ］．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ，２０１０，６（７）：８５５－８６２． ［１８］Ｒｉｋｋａ Ｓ，Ｑｕｉｎｓａｙ ＭＮ，Ｔｈｏｍａｓ ＲＬ，ｅｔ ａ１．Ｂｎｉｐ３ ｉｍｐａｉｒｓ ｍｉｔｏ－ ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｔｕｒｎｏｖｅｒ［Ｊ］． Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｅｒ，２０１ｌ，ｌ８（４）：７２１－７３１． ［１９］Ｎｏｖａｋ Ｉ，Ｋｉｒｋｉｎ Ｖ，ＭｃＥｗａｎ ＤＧ，ｅｔ ａ１．Ｎｉｘ ｉｓ ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｕｔｏｐｈ— ａｇｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉｌａ ｃｌｅａｒａｎｃｅ［Ｊ］．ＥＭＢＯ Ｒｅｐ，２０１０， １１（１）：４５－５１． ［２０］Ｍａｚｕｒｅ ＮＭ，Ｐｏｕｙｓｓ６ｇｕｒ Ｊ．Ａｔｙｐｉｃａｌ ＢＨ３一ｄｏｍａｉｎｓ ｏｆ ＢＮＩＰ３ ａｎｄ ＢＮＩＰ３Ｌ ｌｅａｄ ｔｏ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｈｙｐｏｘｉａ［Ｊ］．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ，２００９，５ （６）：８６８－８６９． ［２１］Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｂｏｓｃｈ—Ｍａｒｃｅ Ｍ，Ｓｈｉｍｏｄａ ＬＡ，ｅｔ ａ１．Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ａｎ— ｔｏｐｈａｇｙ ｉｓ ａ ＨＩＦ－・１－－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｄａｐｔｉｖｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｈｙ・－ ｐｏｘｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００８，２８３（１６）：１０８９２—１０９０３． （收稿日期：２０１２—１２－０３）
