上海伍丰液相色谱仪基本操作规程
一、 操作前的准备
1、 流动相的制备 用液相色谱专用的试剂配置流动相,水应为新鲜制备的高纯去离子水,可用超级纯水器制得或用重蒸馏水。凡规定PH值的流动相,应使用精密PH计进行调节。配制流动相所用的试剂必须使用相应的、0.45um(或0.22um)的滤膜过滤,使用前脱气。应配制足量的流动相备用。
2、 样品的配制 标准品和样品需用规定的溶剂配制成标准样品和待测样品。在定量测定时,标准样品和待测样品均应分别配制2份。在待测样品注入液相色谱以前,一般要经过相应的0.45um(或0.22um)的针式过滤器进行过滤。必要时待测样品要进行预净化,以免对液相色谱系统产生污染和堵塞,影响色谱分离及其结果。
3、 检查上次使用纪录和仪器的状态 检查色谱柱是否适用于本次试验,色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致,原保存溶剂与现用流动相是否互溶,流动相的PH值与该色谱柱是否使用,仪器是否完好,仪器的各个开关位置是否处于关断的位置。
二、 操作
1、 泵操作
现将过滤脱气过的纯有机溶剂置入溶剂瓶中,替换原来保存仪器的溶剂。
打开泵电源,自检完毕后打开放空阀,按设定键,找到冲洗项,按“↓”或“↑”选择“是”,按两次启动键进行快速冲洗(在快速冲洗时一定要确保放空阀打开);。
快速冲洗完毕,关闭放空阀。按“设定”键,找到设定流速项,按“↑”“↓”调节所需的流速值,再按“启动”键确定。
按一次“启动”键,将泵开启;
再按一次“启动/停止”键,将泵关闭。
2、 检测器操作
打开检测器电源,等待检测器自检完毕。
按“设定”键,找到“波长”项,按“↑”“↓”调整所需的波长
找到“灵敏度”项,按“↑”“↓”调整所需的灵敏度。
3、 进样器操作
用相应溶剂清洗进样针,然后用所进样品润洗进样针后进行进样。做样完毕后将进样器用相应溶剂清洗干净。
4、 数据处理
将采集的谱图打开,记录下标样与样品的峰面积,套入计算公式进行计算所测样品的结果。
三、 保养
做样完毕后,一定要将整个系统进行清洗。对于甲醇、乙腈等和水相混合的流动相,在做样完毕后直接用甲醇、乙腈等有机溶剂进行冲洗即可。而对于含缓冲盐、或者调节了PH值的流动相,要先用5%-10%的甲醇水溶液对整个系统进行清洗约1小时,然后用纯甲醇在进行清洗。