维普资讯 http://www.cqvip.com 食品加工中原料肉嫩度影响因素研究 刘冠勇李慧东 滨州职业学院生物工程系食品生物技术研究室 山东滨州 256624 众所周知,肉的营养丰富,是人们日常膳食中 不可缺少的优质蛋白质及脂溶性维生素的主要来 2宰后因素对肌肉嫩度的影响 源,也是食品加工中的重要原料。在肉的加工过程 中,其嫩度至关重要,是评价肉及肉制品综合品质 的一项重要指标,直接影响着肉的食用价值和商品 价值,反映着肉中各种蛋白质的结构状态与特性。 在市场竞争日益激烈的今天,如何生产出嫩度高, 口感好的肉及肉制品,已经成为食品行业一项非常 重要而又实际的研究内容。本文主要从宰前因素和 宰后因素对原料肉嫩度的影响加以阐述。 1宰前因素对原料肉嫩度的影响 1.1年龄 幼龄家畜的肉一般比老龄家畜的嫩。老龄家畜 因胶元蛋白共价交联键较多,有较高的热稳定性, 同时对酸碱等的敏感性也相对较差,而幼龄家畜肌 肉中胶元蛋白的交联程度低,热稳定性差,因而嫩 度存在差异。Shorthose和Harris通过对1~60个 月龄牛的研究发现:随着牛年龄的增加,肉的嫩度 明显下降(P<0.01)…。这与肌原纤维蛋白质的 关系不大而主要与结缔组织的强度有关。 1.2解剖部位不同原料肉的嫩度也不同 48个月龄牛肉的西冷(Tenderloin)、尾龙扒 (Lump)、牛柳(Fillet)具有可以接受的嫩度,而 对24个月龄牛霖肉(Knuckle)、真扒(Topside) 则肉质粗老不可接受。对于脍扒(Siverside)和胸 扒(Brisket)即使低于24个月龄,也同样具有不 可接受的硬度。这一现象则主要与不同解剖部位结 缔组织的含量与构成有关。 1.3营养状况对肉嫩度的影响 营养良好的家畜,肌肉间脂肪含量高,呈现出 丰富的大理石花纹。脂肪有冲淡结缔组织的作用, 也相当于降低了肌肉中结缔组织的含量,从而提高 了肉的嫩度,而消瘦动物的肌间脂肪含量低,肉质 老,嫩度较差。 26 2007年第8期总第316期 2.1尸僵和成熟 宰后发生尸僵时,肉的硬度会大大增加,这主 要源于宰后肌肉缺氧,有氧氧化途径被破坏,只能 进行糖原酵解,其反应式为( Hl0O5)n+3ADP +3磷酸一2乳酸+2H2O+3ATP+(C6H10 ) 。由于糖原酵解产生乳酸致使肉的pH值下 降,向肉中肌球蛋白和肌动蛋白等主要蛋白质的等 电点靠近,使肌肉蛋白所带净电荷减少,这样就缩 小了肌肉蛋白之间的间隙,束缚水分减少,降低了 肉的嫩度,同时糖原酵解产生ATP远远少于有氧 氧化所产生的ATP的能量,在肌纤维中,开始 ATP的减少可由CP含量(磷酸肌酸)的分解产 生,而随着CP含量的急骤降低,ATP的含量因得 不到补充也急骤降低,ATP的减少和pH值的下 降,使肌浆中的Ca“浓度增高;肌原纤维粗丝中 的肌球蛋白头部ATP酶被 一激活,加快了 ATP的分解,结果肌球蛋白和肌动蛋’白结合形成 紧密的肌动球蛋白;从宏观上就表现为肌肉的尸僵 (rigor)。尸僵程度的大小受多种因素的影响,如家 畜屠宰后以较快的速度冷却,在肌肉还没有发生尸 僵时而被冻结,在解冻时则会发生较强的解冻僵直 收缩,这主要由于肉在冻结状态前,肌肉中还有大 量的ATP存在,而在低温或解冻时,肌质网和线 粒体失去了重新吸收被释入肌浆的Ca一的能力, 从而激活了肌球蛋白ATP酶,在较高水平的ATP 下使发生了较正常情况下明显的肌肉收缩,收缩率 甚至高达50%。而在肌肉发生最大尸僵后再进行 冻结,解冻后则不会发生解冻僵直收缩。另外牛、 羊肉还会有发生寒冷收缩的可能。在牛羊肉僵直状 态末完成之前,温度降至10℃以下,肉尸pH值> 6.0,这些肌肉更会发生强烈的寒冷收缩,红色肌 肉的收缩率高于白色和中间型肌肉,这主要因为红 色肌肉中含线粒体较多,而线粒体和内质网由于受 冷的刺激,释放出大量的Ca一,使肌肉发生了强 烈的收缩,Youling等人将尸僵前的牛羊肉分别在 15℃,012,一29℃条件下贮存,经过一定时间之 后(将一29℃贮存下的肉解冻)测它们的肌肉收缩 维普资讯 http://www.cqvip.com 产品开发・试验研究 肉类工业 A/feat /no/ustrV 情况,发现三者在15℃,0℃,一29℃条件下贮存 的肌肉收缩率分别为6%,29%,50%。15℃下贮 存反映了正常情况下的尸僵情况,0℃反映了发生 寒冷收缩情况下的尸僵。一29℃则反映了解冻僵直 收缩的情况 。 2.2肉的成熟 用。Shibkos等对分离纯化的溶酶体的稳定性做了 系统的研究,认为在低pH值和高温(37℃以上) 促进溶酶体的裂解,而低温则使溶酶体稳定。动物 屠宰后随pH值的下降,会促进溶酶体膜的破裂, 释放出组织蛋白酶,降解肌纤维结构蛋白,其作用 主要表现在成熟后期。但提纯溶酶体破裂规律是否 与肌肉内溶酶体膜的破裂规律相吻合,还有待于进 尸僵时肉的僵硬是肌纤维收缩的结果。经过一 定时间的放置,肌肉又逐渐变软,解除僵直状态。 关于解僵的机理,很多人进行了大量的研究,至今 尚未得到的判明,但主要有以下几种论点。 (1)肌原纤维的小片化。由数十个到数百个肌 节沿长轴方向的肌原纤维,在肉成熟时断裂成1~ 4个肌节相连的碎片,同时在相邻肌节的I带Z 线,变得脆弱,受机械作用很易断裂。小片化主要 由以 作用引起,由于肌浆网破裂,释放出 Ca2 使肌浆中的Ca2 浓度为活细胞肌浆中的100 倍。高浓度的 长时问作用于z线,使z线蛋 白变性而脆弱。 (2)肌动蛋白和肌球蛋白纤维之间的结合变 弱。随着保藏时间的延长,肌原纤维分解量逐渐增 加,如家兔肌肉在10℃条件下保存20d的肌原纤 维只分解5%,而6d时近50%的肌原纤维被分离。 (3)肌肉中结构弹性网状蛋白发生了变化。结 构弹性网状蛋白是指肌原纤维中除去粗丝、细丝及 z线蛋白后,不溶性的并且具有较高弹性的蛋白 质。死后肌肉的结构性蛋白的含量随时间的延长而 明显降低,从而促使肉质变软。 (4)内源蛋白酶说。许多学者认为与肌肉成熟 嫩化直接有关的酶系为钙激活中性蛋白酶系(eal— pains)和溶酶体组织蛋白酶系(1ysosomal cathep— sins),并认为这两种酶系在动物宰后对蛋白质的降 解作用是使肌肉嫩化变为食用肉的基础。Drans— field(1993)提出了calpalns活性模型,该模型认 为calpains对宰后肌肉嫩度的调节是通过对calpains 的激活与失活来实现的。其过程如下:它被其激活 离子ca2 激活,此时肌肉pH值较高,被激活的 calpains与其抑制剂calpastain结合,从而失去活 性,随着僵直的进行pH值下降ATP减少,cal— pastain失去活性而calpains又重新具有分解蛋白质 的活性,从而导致肉的结构变弱。温度、pH值、 底物、抑制剂等因素可以导致calpains的失活, calpains也可以自溶,从而终止了calpains的蛋白 质水解作用。溶酶体组织蛋白酶包括,B、D、H、 L等形式,它们都位于溶酶体内,只有当溶酶体膜 破裂时,才被释放到细胞溶质中发挥降解蛋白的作 一步的深入研究 。 2.3热处理 加热对肌肉嫩度的影响有双重效应,它既可使 肉变嫩,又可使其硬度增加,这取决于加热温度和 时间,加热可以引起肌肉蛋白质的变性,从而发生 凝固、凝集和短缩现象,但另一方面,肌肉中结缔 组织在一定范围逐渐变为明胶,从而使肌肉嫩度增 加。Bertola等人用DSC(差式扫描量热法)对牛 肉蛋白质变性温度范围进行了界定,并给出肌肉嫩 度变化的动力学方程,他们发现在60~68℃,肌 肉嫩度随蒸煮时间的延长而升高,直到临界值,这 与胶原蛋白在此温度内的降解有关,在66~80℃, 硬度开始下降,但接着由于肌动蛋白的变性上升, 在80--90℃肌肉蛋白已全部变性,肌肉硬度保持 在较高水平,他们得出了和试验相吻合的动力学的 方程 J,方程如下。 LnD=InDo+Kht 式中:Do一肌肉的初始硬度;D一不同时间 下的肌肉硬度;t一时间(rain);Kh一动力学常 数。 2.4 电刺激 近十几年来科学工作者对宰后直接用电刺激胴 体来改善肉的嫩度进行了广泛研究,研究表明电刺 激能够加快死后肌肉的pH值下降速度,加快尸僵 的形成,提高肉的质量,尤其是改善肉的嫩度,这 些实验多限于牛羊肉和禽肉,同时电刺激还可避免 牛羊肉胴体发生寒冷收缩,但对肌肉的具体作用机 制还有待于研究,同时,对电刺激的参数,如电 压、刺激时间、频率等参数还有待优化。 2.5外源酶 利用蛋白酶类可以嫩化肉类。常用酶有木瓜蛋 白酶(Papain),菠萝蛋白酶(Bromelin)和无花果 蛋白酶(Ficin),其作用是使肌肉蛋白降解,降低 肉的硬度。但使用此种方法存在着难以控制的缺 点。除植物蛋白酶外,一些微生物蛋白酶类也可用 于肉的嫩化处理。嫩化肌肉的商品酶主要是些水解 2007年第8期总第316期 27 维普资讯 http://www.cqvip.com 酶类,按来源大致可分为三类。(1)植物蛋白酶 类,如木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、 生姜蛋白酶、朝鲜梨蛋白酶以及猕猴桃蛋白酶等。 它们在肉中可分解胶原蛋白(Collagen)、弹性蛋白 (Elastin),特别是对弹性蛋白降解作用较大,即使 是老龄牲畜肉,经处理后也都有嫩化效果。(2)微 生物蛋白酶类,如枯草杆菌蛋白酶、米曲霉蛋白 酶、根霉蛋白酶、黑曲霉蛋白酶等。这些酶溶解肌 原纤维后,立即分解蛋白质,其嫩化的程度很快, 溶液与肉类原料混合后放在6O℃左右的环境中, 以加快嫩肉粉中木瓜蛋白酶分解肉类蛋白质的速 度;大约放置5~8min,即可用于烹调。 在食品加工中,使用方法主要有两种:宰前注 射法和宰后浸泡法,前者用得较多。实践中通常采 用5%~1O%的酶溶液,在肉畜屠宰前30min内, 在颈静脉按每kg活体中注射1.1mg标准的酶溶液 (木瓜蛋白酶),这种活体注射酶的方法被称为 “Pro—Ten”艺,经过该工艺处理的肉称为“Pro— “速效性”是这种酶的嫩化作用的一大特点。(3) 动物蛋白酶,如胰蛋白酶等。这些酶主要是对肌纤 维的分解作用,对结缔组织纤维也有一定的分解效 果。对肌肉的嫩化程度介于前两种之间。其中,前 两种来源是科学研究和实际应用的主要酶。几种常 见酶使用条件及情况见表1。 表l常见酶的使用条件及情况 然而,实际实用得最多的还是木瓜蛋白酶。木 瓜蛋白酶是半胱氨酰基蛋白酶,能降解胶原纤维和 结缔组织蛋白质,它将肌动球蛋白和胶原蛋白降解 成为小分子的多肽甚至氨基酸,令肌肉丝和筋腱丝 断裂,使肉类变得嫩滑爽脆,并简化蛋白质结构而 使食用后易于人体消化吸收。南庆贤等(1992)报 道,由于木瓜蛋白酶的水解作用,特别是对胶原蛋 白和弹性蛋白的强烈水解作用,可使老龄畜禽肉得 以嫩化。对较薄的片丝状肉,使用剂以0.05%~ 0.1%较适宜,而蒸煮肉块以0.2%~0.5%较好。 嫩化效果和处理时间长短也有关,通常以1O~ 20min为宜。经常作为商品而使用的嫩肉粉,其主 要成分就是木瓜蛋白酶。莫琪和蒋治良(1996)研 究嫩肉粉对猪、牛肉的适宜作用条件时发现,在 5O℃以下嫩化作用进行得很缓慢,7O℃时活性最 强;肉的pH值为7.0时最佳;使用量为肉量的 0.5%左右时肉的口感最好;嫩化时间在20min以 内即可 引。 在烹饪中,通常是先将嫩肉粉溶化,然后将切 好的肉片、肉丝放入,拌匀,放置15~30min即可 用于烹制。也可以将嫩肉粉直接加入酱油或其它调 味料中,再一起放人肉丝、肉片,拌后静置15~ 30min再烹调。如果急于烹调,可将溶有嫩肉粉的 28 2007年第8期总第316期 Ten”肉,这种肉受到消费者的好评。活的畜体注 射酶溶液对机体没有损害,这是由于畜体的温度、 组织液的pH值不在嫩化酶的最适范围内。随着肌 肉的搁置,pH值下降,烹煮温度达到70~85℃ 时,嫩化酶才发挥最大水解能力。 不同的酶水解能力和作用部位不同。大多数酶 对肌纤维蛋白质具有强烈的水解作用,植物酶类还 具有较强的水解结缔组织蛋白质的能力,其中无花 果蛋白酶水解能力最强。由此可见,嫩化效果首先 与酶的种类有关,如0.0003%的植物蛋白酶即可 使嫩度显著提高;酶浓度对嫩化效果也有重要影 响;提高酶的活性水平可以增加水溶性蛋白质水解 产物的含量。(陈明造等)推荐一种肉类嫩化 剂,其组成为:食盐9.0%、菠萝蛋白酶 0.0056%、木瓜蛋白酶0.0028%、水91.0%,用 量为肉重的3%。 用外源蛋白酶作为肉类嫩化剂,安全、卫生、 无毒,而且有助于提高肉类的色、香、味,增加肉 的营养价值,并且不产生任何不良风味,是一种极 有前途的肉类嫩化剂。 3其它因素 近年来,一些提高原料肉嫩度的新技术,如超 高压技术,外源钙的添加技术、NaHCO3或 NaCO3添加技术、激素法嫩化技术、维生素嫩化 法、盐酸半胱氨酸嫩化法、强冲击波技术等已成为 研究的热点,随着这些技术的成熟完善将逐步在食 品工业中得到应用。 参考文献 l Shorthose W.R.,Powell V.H.,and Harris P.V. Influence of electrical Stimulation,cooling rates and aging 013.the shear force v ̄ues of chilled lamb,J.Anim.Sci. 1986,(51):889--892 2 [美]杰佛里.佐贝编,曹凯鸣等译,生物化学(上、 下),复旦大学出版社,1992. 3黄明、罗欣,内源蛋白酶在肉嫩化中的作用,肉类研 究,1992,(2) 4 Bertola N.C Heat tream1ent effect on texture changes and thermal denaturation of proteins in ̄beef muscle.J.food processing and preservation,1994,(18):31 (收稿日期2007—03—19)