悬浮细胞:细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,这类细胞称为悬浮细胞。如淋巴细胞。
贴壁细胞:在动物细胞培养过程中,必须有可以贴附的支持物表面,其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。
兼性贴壁细胞:有些细胞并不严格地依赖支持物,它们既可以贴附于支持物表面生长,但在一定条件下,它们还可以在培养基中呈悬浮状态良好地生长,这类细胞称之为兼性贴壁细胞。
贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动。
悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动
贴壁细胞要加血清,不贴壁的可以不加血清。不贴壁的一般用各种摇瓶和反应器培养,贴壁的一般用方瓶或孔板培养,使用微载体时也可以用反应器培养。
贴壁生长的细胞跟悬浮的细胞都有很多种。
活体体内的细胞当离体置于体外培养时大多数均以贴壁方式生长,主要包括正常细胞和肿瘤细胞,比如成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞,内分泌细胞,黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。
少数细胞在体外培养是悬浮生长,包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞,尤其是血液白细胞以及癌肿细胞
淋巴细胞分离液买来就应该是无菌的。红细胞裂解液要过滤除菌。分离脾细胞时好像有两种方法.1.裂解红细胞2.直接用淋巴细胞分离液.
淋巴细胞分离液得到的是脾脏内的淋巴细胞(以B淋巴细胞为主).
用红细胞裂解液是去除细胞悬液中的红细胞,保留了淋巴细胞(以B淋巴细胞为主)及脾脏实质细胞(主要是脾细胞).
所以两者是有区别的,做混合淋巴细胞反应以前者为好,检测刺激后的细胞因子以后者较适宜.