新AFP验证报告

验证内容：正确度、精密度、线性范围、临床可报告范围及参考区间的确认 验证人员：王爱林 李琳 马丽 张卫

一、 检测系统信息

项目：AFP

仪器名称 全自动电化学发光免疫分析仪 仪器型号Cobas e601

试剂及厂商：罗氏诊断有限公司 检测方法：双抗体夹心法

二、 厂商提供的相关参数

需验证参数 分析灵敏度 线性范围 可报告范围 参考区间 三、验证过程 1、正确度

目的：评价仪器测量结果与真值的一致程度。通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性

评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评卫生部质控值

厂商参数 0.61 ng/ml 0.605-1210 ng/ml 0.600-60500 ng/ml <7.0 ng/ml 验证结果 沿用厂商参数 1.81-1111ng/ml 0.600-55600 ng/ml 已验证合格

正确度验证试验数据记录表

项目名称/单位 检测设备/编号 检测试剂/批号 校准品/批号 质控品/批号 检测方法 甲胎蛋白（AFP）/ng/ml Roche E601/103 Roche 试剂/159299 Roche 校准品/161204 Roche 质控品 (PC TM)/158274 双抗体夹心法 最近一次参加的卫生部室间质评 样本 编号 我室 结果 靶值 PT允许范围 PT 得分 回报日期：2011-07-15 与靶值 VIS允偏倚 许范围 VIS 得分 201111 201112 201113 201114 9.9 72.2 82.8 9.6 10.5 76.2 85.5 9.9 7.9-13.1 57.2-95.2 100% 100% -5.71 -5.25 -3.16 -3.03 -3.57 - - - - - - - - - - 64.1-106.9 100% 7.4-12.4 100% 201115 189.3 196.3 147.2-245.4 100% 判断标准：<1/2CV总误差：12.5%。 准确度验证结果： ■满足要求 □不满足要求 结论：Cobas e 601分析检测系统所检测的项目AFP 正确度在允许范围内 统计者： 王爱林 李琳 统计日期： 审核者： 审核日期： 2精密度(Precision)

重复性精密度

目的：考察仪器检测方法的随机误差

原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这

20个独立结果间的一致程度

方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）各20份，测量前

先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到重复性精密度。 标本来源：高、低值标本均为混合血清

结果：本室AFP重复性精密度低值CV为：1.88% 高值CV为：2% 结果判断方式：<1/4CV总误差：6.25%

重复性精密度验证试验数据记录表

项目名称/单位 检测设备/编号 检测试剂/批号 校准品/批号 质控品/批号 检测方法 甲胎蛋白（AFP）/ng/ml Roche E601/103 Roche 试剂/159299 Roche 校准品/161204 Roche 质控品 (PC TM)/158274 双抗体夹心法 重复性精密度数据 低值样本条码号：混合样本 测定 次数 1 2 3 4 5 6 测定 结果 3.23 3.19 3.20 3.12 3.19 3.21 高值样本条码号：混合样本 测定 结果 3.12 3.04 3.11 3.14 3.25 3.06 测定 次数 11 12 13 14 15 16 测定 次数 1 2 3 4 5 6 测定 结果 461.6 419.6 444.7 421.9 438.9 425.6 测定 次数 11 12 13 14 15 16 测定 结果 436.8 437.6 441.9 430.2 438 426.5 7 8 9 10 3.15 3.16 3.20 3.22 17 18 19 20 3.10 3.19 3.08 3.20 7 8 9 10 440.9 437.9 441.1 416.9 17 18 19 20 438.5 430.3 444 429.8 低浓度均值：3.158 SD：0.06 CV：1.88% 高浓度均值：431.33 SD：7.04 CV：2.4% 判断标准： <1/4CV总误差：6.25% 重复性精密度验证结果： ■满足要求 □不满足要求 结论：Cobas e 601分析检测系统所检测的项目AFP低值、高值重复性精密度均在允许范围内，可接受。 检测者：王爱林、李琳 检测日期：2011-08-01 审核者： 审核日期： 日间精密度：

目的：考察目前实验室检测方法日间精密度

原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结

果，判断这20个独立结果间的一致程度。

方法：新鲜混合血清（高值、低值）分装20份冷冻，每天取两份随

标本连续测定10天，测定前定标做质控，测定结束做质控，且结果在控制范围内，计算CV，SD，得到批间精密度。 结果：本室AFP日间精密度平均低值CV：1.7% 平均高值CV：1.6% 结果判断方式：日间精密度CV值<1/3CV总误差

日间精密度验证试验数据记录表

项目名称/单位 检测设备/编号 检测试剂/批号 校准品/批号 质控品/批号 检测方法 甲胎蛋白（AFP）/免疫激素 Roche E601/103 Roche 试剂/159299 Roche 校准品/161204 Roche 质控品 (PC TM)/158274 双抗体夹心发 日间精密度数据 低值质控品批号： 测定 天数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 测定 结果 2.64 2.37 2.42 2.36 2.32 2.33 2.38 2.48 2.49 2.35 高值质控品批号： 测定 天数 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 测定 结果 2.55 2.37 2.18 2.66 3.1 2.25 2.36 2.64 2.42 2.38 测定 天数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 测定 结果 642 632.2 634.5 605.5 578.8 541.8 555 536.2 520 526.8 测定 天数 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 测定 结果 488.5 512.5 568.1 554 572.2 547.1 583.6 614.3 613.2 585.5 低浓度均值：2.37 标准差： 0.198 变异系数：8.07% 高浓度均值：550.55 标准差：15.03 变异系数：7.6% 判断标准： <1/3CV总误差：8.33% 中间精密度验证结果： ■满足要求 □不满足要求 结论：本室所检测项目AFP低值、高值中间精密度均在允许范围内。 检测者：王爱林、李琳 检测日期： 审核者： 审核日期：

3线性范围（Linearity range, AMR）

目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，

从而保证该浓度范围检测结果的准确性。

标本要求：高值标本可使用病人混合血清。一般地样本的高值推荐在AMR上限的90％，低值推荐在AMR下限的10％，但这不是绝对的规则。最好有5个或以上的系列浓度的实验样品，数据点数不得低于4个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。 方法：

a) 以50ul为一个体积单位，将高值标本与低值标本以3：1、2：2、1：3的体积比例混合，加上高低值标本共5个标本按照由低到高测定，记录结果。

b) 线性统计：以直接测定结果计算得出的相应浓度为X，以通过稀释测定结果为Y，回归方法学统计，得到a、b及r值。 c) 结果判断：

若b在0.97-1.03范围内，r2>0.95，作a与0有无显著性差异的t检验，如果P>0.05，则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度。 若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。

线性范围验证试验数据记录表

项目名称/单位 检测设备/编号 甲胎蛋白（AFP）/ng/ml Roche E601/103 检测试剂/批号 Roche 试剂/159299 校准品/批号 质控品/批号 检测方法 Roche 校准品/161204 Roche 质控品 (PC TM)/158274 双抗体夹心法 厂家声明线性范围：0.605-1210 ng/ml，线性方程：Y=bX+a ，R2＞0.95 样本编号 1 2 3 4 5 平均斜率b 采用线性回归，以预期值为X，以按比例稀释的实测均值为Y，得线性方程： Y=1.0105X+21.735 线性回归散点图： 配制比例 4L 3L+1H 2L+2H L+3H 4H 1.82 288.6 645.8 872.7 1110.9 测定值1 测定值2 测定均值 预期值 差值 1.80 288.8 645.7 873 1110.8 1.0105 1.81 288.7 646.0 872.4 1111 1.81 279.11 556.41 833.7 1111 0 -9.59 -89.59 -38.7 0 线性回归y = 1.0105x + 21.7352R = 0.992814001200100080060040020000200400600预期值80010001200实测均值 计算每一稀释度测定均值和预期值的差值。以预期值为横轴，差值为纵轴，制作线性差异图。 X Variable 1 Residual Plot100残差500-50020040060080010001200X Variable 1 回归方程：Y=1.0105X+21.735 ■b在0.97-1.03范围内 □b不在0.97-1.03范围内 a的P值：0.5673 ■a与0无显著性差异 □a与0有显著性差异 R2：0.9928 ■R2≥0.95 □R2＜0.95 直线回归方程是否可接受 ■可接受 □不可接受 线性范围延伸：  在直线回归方程可接受基础上，如果验证的线性范围小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为（上限+上限*10%），验证下限扩展为（下限-下限*50%）；  若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准； 扩展后的线性范围：1.062-1222.1 ng/ml 结论：在标本状态良好无干扰的情况下，已验证AFP测定结果在1.81-1111ng/ml 范围内呈线性，进行线性范围延伸后，可使用的线性范围为1.062-1222.1 ng/ml 检测者：李琳 王爱林 检测日期：2011-06-25 审核者： 审核日期： 4临床可报告范围（Clinical reportable range ,CRR）

目的：分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数，从而确保高值样本报告的准确性。

原理：未经过任何处理的病人检验标本，通过检测系统检测得到的可

靠结果范围。

方法;结合本实验室制定的AFP的可报告范围（CRR）及该项目的检测范围，从而确定该项目的最大稀释倍数，予以验证。 过程描述：

结果： 50倍稀释的R值为102.2％

临床可报告范围试验数据记录表

项目名称 检测设备 检测试剂/批号 校准品/批号 质控品/批号 分析测量范围 AFP Cobas E601 AFP/162355 AFP定标液/161204 AFP/158272;158273 0.6-1210ng/ml 高值标本条码号：1004292279 临床可报告范围高限数据记录 实测值1 未稀释 1104 1/10 1127 1/50 1135 单位：ng/ml 实测值2 实测均值 预期值 偏差（%） R（%） 1120 1112 1112 1133 1130 1112 1.62% 101.6% 实测均值 预期值1137 1136 1112 2.16% 102.2.% R(%)=结果判断： 1/4最大允许误差：5% 偏差（%）1/4最大允许误差的最大稀释倍数：50 R（%）值在90%～110%之间的最大稀释倍数：50 结论：我室所检测项AFP的最大稀释倍数为50倍， 临床可报告范围高限50*1210=60500 ng/ml，如果50倍仍超出，报告＞60500 ng/ml。 检测者： 检测日期： 审核者： 审核日期： 结论：AFP临床可报告范围0.6-1210ng/ml，最大稀释倍数50倍，当结果>1210ng/ml时，用肿瘤标志物稀释液进行50倍稀释，结果乘以稀释倍数，若 50倍稀释结果仍超出报告>60500ng/ml。

灵敏度：直接引用罗氏试剂说明书上提供的分析灵敏度：AFP 0.61 ng/ml。

6 干扰物质

干扰物质对本项目的影响大小沿用厂商参数，详细内容见本项目SOP。

7 参考区间（Reference intervals）:

目的：选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，

对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。

原理：收集20 例正常健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别

等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立参考范围。 验证范围：<7.0ng/ml 方法： AFP标本的要求 1、 2、

体检合格健康的筛选者 脂血、溶血均勿用

结果：统计方式 R= 测定的结果在参考范围例数≥90%即合格

总测定例数

生物参考区间数据及验证记录表 项目名称/单位 检测设备/编号 检测试剂/批号 校准品/批号 质控品/批号 检测方法 甲胎蛋白（AFP）/ng/ml Roche E601/103 Roche 试剂/159299 Roche 校准品/161204 Roche 质控品 (PC TM)/158274 双抗体夹心法 试剂说明书提供参考范围：<7.0ng/ml 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 各编号样本测定情况 条形码号 性别 年龄(岁) 1004139105 女 37 1004139690 女 50 1004140218 女 30 1004139311 女 52 1004139368 女 51 1004139762 女 46 1004139349 男 50 1004139353 男 28 测定结果 1.77 2.03 1.77 1.41 3.43 2.51 2.65 3.67 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 结果判断：R1004139302 1004139530 1004139364 1004139198 1004139085 1004139259 1004139109 1004139114 1004140049 1004139120 1004139058 1004139518 女 男 男 女 男 女 男 男 男 男 男 男 36 27 25 58 30 45 61 31 24 47 46 55 1.35 2.80 1.50 10.29 3.75 3.62 4.70 3.30 1.84 1.85 2.31 3.41 测定结果在参考范围内的例数90%为合格 总测定例数R值：95% ■满足要求 □不满足要求 结论：厂家提供的AFP参考范围<7.0ng/ml可用（可被转移） 检测者： 检测日期： 审核者： 审核日期： 结论：若本实验室所检测的20个标本其检测结果19个均在验证区间

<7.0ng/ml内，故本实验室参考区间验证通过。

四、 总结(Summary)

罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪检测系统的精密度、正确度、线性范围、可报告范围及生物参考区间通过验证。通过以上各项性能验证室验的结论，罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪检测系统达到检测要求，保证检验结果准确可靠，可以满足临床需求