百色市2009～2011年狂犬病感染调查及防治对策

总第１４卷１５３期　２０１２年５月　大众科技　Ｐｏｐｕｌａｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ＶＯ　Ｌ＿１４　ＮＯ．５　Ｍａｙ　２０１２　百色市２００９￣２０１　１年狂犬病感染调查及防治对策　蒙振亩’覃勇’韦显凯２阮清杰３班雪花４　（１．百色市动物疫病预防控制中心，广西百色５３３０００；　２．广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁５３０００１；　３．隆林各族自治县动物疫病预防控制中心，广西隆林５３３５００；　４．田东县动物疫病预防控制中心，广西田东５３１５００）　【摘要】为了研究狂犬病在百色市的流行情况，采集人间狂犬病疫点、交易市场、屠宰场犬的脑组织样品４７０份，犬唾　液拭子１７８份，从野外采集蝙蝠样品３２份。通过ＲＴ～ＰＣＲ方法检测：脑组织阳性样品９份，阳性率达１．９％，唾液和蝙蝠样品均　未能检测出阳性材料。小鼠接种成功分离病毒７株。结果表明从表观健康的犬脑组织中带毒现象较多，唾液检出率较低，蝙蝠　未检出阳性样品。应切实做好农村犬狂犬病的免疫工作，为防止表观健康犬咬人而引起发病死亡。　【关键词】狂犬病；调查；ＲＴ—ＰＣＲ；百色　【中图分类号】￥８５２．４　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００８—１１５１（２０１２）０５—０１３４－０３　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｂｉｅｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｂａｉｓｅ　ｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｘｉ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ　ｆｒｏｍ　２００９　ｔｏ　２０１　１　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｏｂｔａｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｂｉｅｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｂｅｉｓｅ　ｃｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｘｉ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ，ｔｏｔａｌ　６８０　ｓａｍｐｌｅｓ　ｃｏｍｅ　ｆｒｏｍ　ｒａｂｉｅｓ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｆｏｃｕｓ，ｄｏｇ　ｔｒａｄｅ　ｆａｉｒ，ｓｌａｕｇｈｔｅｒ　ｈｏｕｓｅ　ａｎｄ　ｗｉｌｄ　ｆｉｅｌｄ　ｂａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＲＴ—ＰＣＲ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　１．９％（９／４７０）ｄｏｇ　ｂｒａｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ，．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｎｏｎｅ　ｏｆ　１７８　ｄｏｇ　ｓａｌｉｖａ　ｓａｍｐｌｅｓ　ａｎｄ　３２　ｂａｔ　ｂｒａｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗａｓ　ｒａｂｉｅｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ．Ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ，　７　ｓｔｒａｉｎ　ｖｉｒｕｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｏｇ　ｂｒａｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ｒｏｍ　ｓｆｌａｕｇｈｔｅｒ　ｈｏｕｓｅ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｋ　ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｔｈａｔ　ｂｒａｉｎ　ｏｆａｐｐａｒｅｎｔ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｄｏｇ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ　ｃａｒｒｉｅｒ，ａｎｄ　ｅｍｐｈａｓｉｚｅｓ　ｔｈｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｐｅｒｆｏｒｍｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒａｂｉｅｓ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ　ａｍｏｎｇ　ｄｏｇｓ　ｉｎ　Ｂａｉｓｅ　ｃｉｔｙ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｕｒａｌ　ａｒｅａｓ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｒａｂｉｅｓ；Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ；ＲＴ－ＰＣＲ；Ｂａｉｓｅ　狂犬病是由狂犬病病毒（Ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ，ＲＶ）引起的所有　蝙蝠等样品。抽样时认真填写采样单，对样品编号标识，样　品置于一２０℃以下冻存，在７ｄ内送广西壮族自治区动物疫病　预防控制中心实验室检测。　１．２资料来源　温血动物和人的一种急性致死性脑脊髓炎　。狂犬病又称恐水　症，是最古老的人兽共患病之一。狂犬病可防不可治，发病　后致死率１００％。犬科动物、猫科动物及自然界中的一些野生　动物成为人兽狂犬病的传染源、病毒的贮存宿主和传播载体，　动物狂犬病资料来源于辖１２个县（区）动物疫病预防控　制中心开展动物狂犬病流行病学专项调查；人间狂犬病疫情　材料来源于百色市疾病预防控制中心的疫情统计资料。　保护了狂犬病的生存，狂犬病成为自然疫源性疾病”　。为了研　究狂犬病的流行规律，有效遏制狂犬病发生，百色市于２００９￣　２０１１年连续三年开展了动物狂犬病流行病学调查、监测、技　术防治示范等工作。　１．３狂犬病毒特异性核酸检测　１．３．１试剂和引物　１材料和方法　１．１　样品来源　２００９￣２０１１年连续三年在本市辖１１个县（区）采集人　间狂犬病疫点、交易市场、屠宰场扑杀犬的脑组织样品，所　采集的犬脑样品均为本地饲养犬。同时还采集犬唾液拭子、　Ｔｒｉｚｏｌ试剂购自Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司；ＡＭＶ逆转录酶及相　关试剂、　ｇＤＮＡ聚合酶、等购自大连ＴａＫａＲａ公司。依据曾　兰等　合成弓Ｉ物Ｌ１：５’一ＧＡＡＣＡＡＣＴＧＧＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＣＡＡＣ一３’，　Ｌ２：５’一ＡＧＡＣＡＡＧＡＣＴＴＧＡＴＣＣＣＣＡＧｃＡＡＴ一３’，用于扩增Ｌ基因聚　合酶活性部位，预期扩增ＨＡ基因片段为９０５ｂｐ。引物由上海　生物工程有限公司合成。　【收稿日期】２０１２—０３—３０　【作者简介】蒙振亩，供职于百色市动物疫病预防控制中心。　１３４—　一３．２本次感染检测仅发现犬有感染，未能从犬唾液拭子和蝙　防控工作，是狂犬病防控工作的重点和难点。本次感染调查　蝠样品中检出阳性样品，原因可能是采集的唾液样品并　发现，狂犬病主要发生在农村，占狂犬病疫情的９８．５％。农　非来自有发病症状犬或者采样检测数量少　村犬饲养量多，密度大，放养、自由散放现象普遍，流浪犬　本市猫及野生动物狂犬病带毒调查还待今后进一步深入　增多，野性大，开展免疫注射时难于抓捕，免疫密度低。应　开展。总之，狂犬病病毒的贮存宿主中，犬带毒率居于首位　加强农村犬管理，加大宣传力度，引导农民有序养犬，养成　不容置疑，务必把消除犬忠工作作为重中之重来抓紧、抓好、　拴养习惯，减少犬伤人事件发生。　抓出成效。　３．８加强狂犬病危害性及防治知识的宣传，提高防护意识，　３．３本次检查阳性率较高的县为田阳、平果和西林县，推测　对防止疫情发生和流行起着至关重要的作用　和这几个县的地理位置有较大关系　本研究显示狂犬病死亡人数与动物发病数呈正相关关　田阳、平果县为百色市重要交通枢纽，犬类市场繁杂，　系，由于通过广泛宣传，使群众知晓狂犬病可防不可治，戒　交易量大或许成为田阳、平果县狂犬病带毒较高的一个原因。　除侥幸心理，一旦被犬、猫咬（抓）伤后立即到卫生部门规　西林县是百色市中最为偏僻的一个县，然而却和同是狂犬病　范处理伤口、全程注射疫苗和抗狂犬病毒血清。从而在　高发区的贵州省　接壤，散养犬和猫可以在两个地区间流窜，　２００９￣２０１１年，百色市人间狂犬病例呈逐年呈下降趋势。在　交易频繁，这其中是否有必然的联系还需进一步作调查研究。　加强动物免疫的同时，做好对广大群众的狂犬病知识普及，　３．４本次研究分析基因是狂犬病的Ｌ基因聚合酶活性部　对于狂犬病的防控起重要作用。　位，该基因对狂犬病的转录和复制发挥重要的功能　陆专灵　对该基因进行遗传进化分析，与Ｙ、　Ｇ基因的　【参考文献】　遗传进化树非常相似，本研究以该基因作为狂犬病病毒的分　［１】俞永新．狂犬病和狂犬病疫苗［Ｍ］．中国医药科技出版社（２　子流行病学及遗传进化分析的研究对象。研究表明　所有的　版），５—７．　狂犬病毒中国分离株属于基因Ｉ型，Ｎ基因序列分析结果表　［２】Ｎａｏｔｏ　Ｉｔｏ，Ｍｕｔｓｕｙｏ　Ｔａｋａｙａｍａ，Ｋｅｎｔａｒｏ　Ｙａｍａｄａ，Ｍａｋｏｔｏ　明：我国同一地区分离的街毒株，基因序列非常接近Ⅲ，和　Ｓｕｇｉｙａｍａ，Ａｎｄ　Ｎｏｂｕｙｕｋｉ　Ｍｉｎａｍｏｔｏ．Ｒｅｓｃｕｅ　ｏｆ　Ｒａｂｉｅｓ　Ｖｉｅｒｓ　本研究的结果一致。目前国产的动物用狂犬疫苗普遍为弱毒　ｆｒｏｍ　Ｃｌｏｎｅｄ　ｃＤＮＡ　ａｎｄ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　疫苗，毒株为ＥＲＡ株，本研究所分离的病毒Ｌ基因聚合酶活　Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ——Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｇｅｎｅ：Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｇｅｎｅ　Ｉｓ　性部位和ＥＲＡ的同源性达均达到９８．５％以上，说明目前所使　Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ　ｆｏｒ　Ａｄｕｌｔ　Ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　用的动物用狂犬病疫苗应具有较好的保护力。　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２００１，７５（１９）：９１２１—９１２８．　３．５做好计划免疫工作是控制狂犬病的基础　［３】曾兰，陆武，王雯，等－广西狂犬病野毒株Ｌ基因３’端的多态性　坚持“预防为主”的方针，通过免疫降低犬（猫）对狂　分析田．中国预防兽医学报，２００９，３１（１Ｉ）：９０６—９０９．　犬病的易感性，ＷＨＯ研究表明７５％的犬群免疫率就能高效阻断　［４】张永振．中国狂犬病的流行病学Ｕ］．中国计划免　狂犬病的传播链，从而有效控制动物狂犬病发生和流行。在　疫，２００５，４（１１）：１４０－１４３．　狂犬病高发县（区），要对从事屠宰职业、畜牧兽医、儿童和　［５】ＳｃｈｎｅＨ　Ｍ　Ｊ，Ｃｏｎｚｅｌｍａｎｎ　Ｋ　Ｋ．Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｙｔ　ｏｆ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　养犬户等密切接触的高危人群进行暴露前免疫，提高群体抗　ｍｕｔａｔｅｄ　ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ　Ｌ　ｐｒｏｔｅｉｎⅢ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，１９９５，　狂犬病免疫水平，这是在高流行地区有效控制人间狂犬病发　２１４：５２２－５３０．　病率的重要防控策略。　【６】陆专灵，尹伟力，宋宏立，等．广西狂犬病病毒Ｌ基因聚合酶　３．６扑杀检测阳性和疫点可疑带毒及患病的犬猫是消除传　活性部位的多态性分析Ｕ１．广西农业科学，２００８，３９　染源的重要措施，是防控狂犬病疫情发生的关键　（３）：３６８—３７３．　要建立疫情报告网络，定期开展动物狂犬病流行学调查　【７］　Ｓｈｅｎｇ—ＬｉＭｅｎｇＪｉａ—ＸｉｎＹａｎ，Ｇｅ—ＬｉｎＸｕ．Ａ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　和监测工作，及时发现疫情隐患，掌握疫情动态，把疫情消　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　灭在萌芽状态阶段，防忠于未然。　ｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　ＣｈｉｎａＵ］．　Ｖｉｒｕｓ　３．７切实抓好狂犬病疫苗的免疫工作　Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００７．１２４：１２５－１　３８．　本研究发现动物发病数与免疫数呈反相关关系，免疫的　好坏直接关系到狂犬病疫情的发生。尤其要做好农村狂犬病　（上接第１７４页）给ＰｈｏｔｏＳｈｏｐ带来了生机，注入了新的活　望电子出版社．　力。总之，中学计算机教育是素质教育的一个重要组成部分，　［２］导向科技主编．ＰｈｏｔｏＳｈｏｐ７．０培训教程［Ｍ】．人民邮电出版　我们不仅要把ＰｈｏｔｏＳｈｏｐ软件知识传授给学生，还要培养学　社．　生的科技意识和科学技能，让学生感受到汲取知识的快乐。　【３】向玉琴．愉快教育理论与实践的探索　以］　等教育出版社．　只有这样，才能真正把素质教育推向前进，最终做到“师生　［４】黄斌生．提高计算机教学效率七法【Ｍ】．职教论坛．　互乐”。　【５】周明星，董国谦．实践能力培养案例全书ＩＭ】．华龄出版社．　［６］别敦荣，王前新．国外学生实践能力培养借鉴全书［Ｍ】．华　【参考文献】　龄出版社．　…高军锋，苑丽芳．Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ　ＣＳ轻松课堂实录［Ｍ］．北京希　一１３６—