丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽及其制备方法

(12)发明专利说明书

(21)申请号 CN201210492616.6 (22)申请日 2012.11.27

(71)申请人 广州合诚实业有限公司

地址 510530 广东省广州市萝岗区云埔(白云)工业区云诚路8号 (72)发明人 周雪松 申世强 曾建新 蒋文真

(74)专利代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 代理人 裘晖 (51)Int.CI

C12P21/06

权利要求说明书 说明书 幅图

(10)申请公布号 CN 102994598 A (43)申请公布日 2013.03.27

(54)发明名称

丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉

米低聚肽及其制备方法 (57)摘要

本发明属于农副产品高附加值加工

利用技术领域，公开了一种丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽及其制备方法。该制备方法分为以下步骤：（1）玉米蛋白粉的分散、水化；（2）糊化、ɑ-高温淀粉酶酶解、脱脂、去淀粉；（3）酶解；（4）灭酶、脱色；（5）粗滤、超滤、纳

滤、干燥，即得弱苦味玉米低聚肽。该弱苦味玉米低聚肽中蛋白质的质量百分比为85.42%～87.63%，相对分子量小于1000Da肽的质量百分比为92.44%～94.21%，丙氨酸的质量百分比为6.75%～6.94%，亮氨酸的质量百分比为14.12%～14.66%；游离氨基酸的质量百分比为1.12%～1.36%，可广泛用作保健食品、普通食品的原料，尤其可用于醒酒护肝产品。 法律状态

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态

权 利 要 求 说 明 书

1.一种丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽的制备方法，其特征在于：包括以

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉粉碎，用去离子水配制为玉米蛋白溶液，

（2）糊化、脱脂、去淀粉：调节分散、水化好的玉米蛋白溶液的pH值为5～7，加热

至80℃～85℃，并保持20min～60min；加入相当于玉米蛋白

粉酶，在80℃～85℃条件下，搅

冷却，

将玉米蛋白溶液分散、水化；

下步骤：

粉质量0.1%～1%的α-高温淀

拌酶解30min～60min后，钝化α-高温淀粉酶活性，降温 离心，去脂肪和液体，取沉淀；

（3）酶解：用去离子水将步骤（2）得到的沉淀搅拌分散为玉米蛋白浆，保证玉米蛋白

浆中蛋白质的质量百分比为5%～20%，调节玉米蛋白浆的pH

蛋白浆中蛋白质质量0.5%～2%的

于玉米

值为6～7，加入相当于玉米

中性蛋白酶于50℃～55℃搅拌水解1h～2h，再加入相当

蛋白浆中蛋白质质量0.5%～2%的酸性蛋白酶于50℃～55℃搅拌水解4h～8h，至酶

（4）灭酶、脱色：酶解结束后，升温，加入活性炭粉末搅拌混匀，恒温搅拌30～60min；

（5）粗滤、超滤、纳滤：将灭酶、脱色后的玉米蛋白浆粗滤，压滤后的清液通过超滤，

滤过液再经过纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

弱苦味玉米低聚肽。

解结束；

干燥，得到丙氨酸和亮氨酸含量高的

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的玉米蛋白粉中蛋

所述的粉碎是指将玉米蛋白粉粉碎至80目；

所述的玉米蛋白溶液中玉米蛋白粉的终浓度的质量百分比为5%～20%；

所述的分散、水化的剪切速度为2000rpm～3000rpm，时间为10~20min。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的pH值通过使用

所述的搅拌酶解的搅拌速度为36rpm；

所述的钝化α-高温淀粉酶活性是指将酶解液在95℃～100℃保持10min～20min;

所述的降温冷却是指冷却到55℃～60℃；

所述的离心是在4000rpm～6000rpm下离心10min～20min。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的氢氧化钠溶液的浓度为1

氢氧化钠溶液调节；

白质的质量百分为60%以上；

mol.L^-1～5mol.L^-1。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所述的去离子水的温度

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（4）中所述的升温是指温度升

所述的活性炭粉末的加入量相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量的0.2%～1%；所用活性炭

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）中所述的粗滤是指将灭酶、

所述的超滤是指压滤后的清夜先通过截留分子量100kDa的超滤膜超滤，滤过液再通过

所述的纳滤是指滤过液经过孔径为1nm的纳滤膜纳滤；

所述的干燥通过干燥塔干燥，操作参数优选为进口温度为160℃～170℃，出口温度为

70℃～90℃。

截留分子量5kDa的超滤膜超滤；

脱色后的玉米蛋白浆泵入板框式硅藻土过滤机粗滤；

为200目以上的活性炭。

至80℃～85℃；

为50℃～55℃。

8.一种丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽，通过权利要求1～7任一项所述的

9.根据权利要求1所述的丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽，其特征在于：

所述的丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽中蛋白质的

87.63%，相对分子量小于1000Da肽的质

比为6.75%～

制备方法得到。

质量百分比为85.42%～

量百分比为92.44%～94.21%，丙氨酸的质量百分

6.94%，亮氨酸的质量百分比为14.12%～14.66%；游离氨基酸的质量百分比为

112%～136%。

说 明 书

技术领域

本发明属于农副产品高附加值加工利用技术领域，具体涉及一种丙氨酸和亮氨酸含量高 背景技术

玉米是世界上三大粮食作物之一，也是我国传统农作物。2009年，我国玉米产量已达

1.亿吨，约占谷物产量20%，位居世界第二位。玉米的主要用途

湿磨法生产玉米淀粉过程中的主要副产品是玉米

黄粉，玉米蛋白粉一般含

和球蛋

的弱苦味玉米低聚肽及其制备方法。

之一是生产玉米淀粉，

蛋白粉（Corn Gluten Meal，CGM），也称

60%左右的蛋白质，主要成分为玉米醇溶蛋白(68%)、谷蛋白(22%)

白(1.2%)。玉米蛋白质中含有高比例的亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸等疏水

性氨基酸和脯氨酸、谷氨酸等，但赖氨酸、色氨酸等必需氨基酸含量较低，

酸组成使玉米蛋白水溶性差，营养价值不高，了玉

玉米蛋白粉主要作为畜禽廉价的饲

液自然排放的

这种独特的氨基

米蛋白质的深加工利用。长期以来，

料来源或随废液自然排放。据不完全统计，全国每年随废

玉米蛋白粉在8万吨以上，不仅浪费了资源，而且造成了环境污染。因此研究

近年来，研究发现，玉米蛋白氨基酸组成的不平衡性使得其具有独特的生理功能，通过

科学合理的生物工程手段可获得具有多种生理功能的活性肽，包括易

除疲劳、降低血氨浓度、降血压、促进乙醇代谢

因玉米低聚肽与目前已有市

能迅速

玉米蛋白质的深加工有着重要的社会经济意义。

消化吸收、抗氧化、消

等生理活性肽，其中促进乙醇代谢功效方面，

售解酒、醒酒药物不同，属天然绿色保健食品，作用机理明确，

解酒护肝，缓解醉酒带来的身体不适，无防腐剂等化学添加剂、无中药成分、无副作

用，安全性高，具有良好的市场应用前景，具有醒酒功效的玉米低聚

肽已成为国内外研发的

热点。

玉米醒酒肽是通过提高血液中的丙氨酸和亮氨酸浓度而产生稳定的辅脱氢酶NAD+，增

强乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性，促进体内乙醇的分解和代谢，从

度，对酒精引起的肝脏损害可起到预防作用。所

以低聚肽形式存在的丙氨酸、

而降低血液中乙醇的浓

以，可以用丙氨酸和亮氨酸的含量，特别是 亮氨酸含量来衡量玉米醒酒肽的醒酒效果。

天然玉米蛋白分子由于氢键、疏水键、二硫键等作用，肽链卷曲于蛋白分子内部近似于

球状，结构紧密且有较强的疏水性，很难

的淀粉、油脂和色素

被蛋白酶水解；另外，玉米黄粉中还存在相当量

等，影响玉米蛋白质的深加工利用。目前，国内外玉米蛋白质深加工方

面研究主要集中在如何高效酶解玉米蛋白，获得高得率的小分子量玉米低聚

制备突出的难题包括四个方面：（1）产品纯度低，即

前期玉米蛋白粉提纯处理做得不到

优化，成本高，

肽。玉米低聚肽

玉米低聚肽蛋白质含量偏低，主要是

位，影响了产品的质量；（2）制备工艺繁琐、未经科学

难以工业化实施；（3）玉米活性肽的口感苦味浓甚至刺激，很难被大众接

受，推广应用受到；（4）玉米低聚肽具有多种生理功效，但没有针对

发，产品功效不突出。如专利CN101531700A公开了

原料，采用碱水处理，除去淀粉、

酶水解、离心

某一特定功效研

以玉米黄粉（蛋白含量60%左右）为

油脂等杂质得到高纯度玉米蛋白料渣，再将此料渣预处理、

过滤、浓缩干燥制备出蛋白质含量85%以上、分子量分布在2000Da以下的玉

米低聚肽粉，该发明中碱性蛋白酶用量为5%～8%、中性蛋白酶用量为

达到10%～16%，耗水、碱、酸量大，产品得率（玉米

24%，产品的制造成本非常高；另

有具体针对产

5%～8%，总酶用量

肽与玉米蛋白粉质量之比）22.3%～

外专利中没有脱色去异味工艺、没有描述产品风味，也没

品的某一功效设计；专利CN102028093A公开了以玉米黄粉为原料，采用碱

性蛋白酶Alcalase、复合蛋白酶Protamex分段酶解，酶解产物经离心分离，

上清液分别经 100kDa、10～6kDa截断分子量的超滤膜超滤，再将滤

粉，该产品中分子量小于1200Da

和12.42%，

过液浓缩、喷雾干燥获得玉米醒酒肽

的肽段占73.19%，丙氨酸和亮氨酸的含量分别大于6.43%

产品的玉米肽纯度低、风味情况没有描述，另外因发明中仅通过粗分离和超滤

去除大分子物质，获得的产品中游离氨基酸含量、灰分含量没有提供数据，

式存在的丙氨酸、亮氨酸含量不清楚；专利

剂制备方法，采用碱水处理

酶

实际以低聚肽形

CN102172293A公开了一种玉米活性小肽醒酒

玉米蛋白粉提纯，再加入碱性蛋白酶Alcalase4～5%、风味蛋白

Flavourzyme和复合蛋白酶Protamex1～3%分段水解，酶解产物离心分离后上清液经过二

级超滤膜分离获得主要分子量为200～1000Da的小肽，该法

用酶量大，达到5%～8%。 发明内容

为了解决上述现有技术的难点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种丙氨酸和亮

氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽的制备方法。该制备方法采用脱脂、

活性碳选择性吸附、浓缩、干燥制备出丙氨酸、

廉，适合工业化生产。

脱淀粉处理，结合酶解、

亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽，成本低

本发明的另一个目的在于提供通过上述制备方法得到的丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦

味玉米低聚肽。该肽可用作保健食品、普通食品的原料，尤其可用于

醒酒护肝产品。

本发明是通过下述技术方案来实现的：一种丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉粉碎，用去离子水配制为玉米蛋白

的制备方法，包括以下步骤：

溶液，

将玉米蛋白溶液分散、水化；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：调节分散、水化好的玉米蛋白溶液的pH值为5～7，加热

至80℃～85℃，并保持20min～60min，使得玉米蛋白分子结构充分

粉充分糊化；加入相当于玉米蛋白粉质量

下，搅拌酶解30min～

展开，并且使其中的淀

0.1%～1%的α-高温淀粉酶，在80℃～85℃条件

60min后，钝化α-高温淀粉酶活性，降温冷却，离心，去脂肪和液体，

（3）酶解：用去离子水将步骤（2）得到的沉淀搅拌分散为玉米蛋白浆，保证玉米蛋白

浆中蛋白质的质量百分比为5%～20%，调节玉米蛋白浆的pH值为

蛋白浆中蛋白质质量0.5%～2%的中性蛋白酶于

于玉米蛋白浆中蛋白质质量

解结束；

取沉淀；沉淀即为脱脂和去淀粉后的提纯玉米蛋白；

6～7，加入相当于玉米

50℃～55℃搅拌水解1h～2h，再加入相当

0.5%～2%的酸性蛋白酶于50℃～55℃搅拌水解4h～8h，至酶

（4）灭酶、脱色：酶解结束后，升温，加入活性炭粉末搅拌混匀，恒温搅拌30～60min，

（5）粗滤、超滤、纳滤：将灭酶、脱色后的玉米蛋白浆粗滤，压滤后的清液通过超滤，

滤过液再经过纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，干燥，

弱苦味玉米低聚肽。

实现灭酶、脱色、提升丙氨酸和亮氨酸的含量；

得到丙氨酸和亮氨酸含量高的

步骤（1）中所述的玉米蛋白粉（又称黄粉），要求至少达到饲料用玉米蛋白粉

所述的玉米蛋白粉中蛋白质的质量百分比为60%以上；

NYT685-2003规定，优选一级饲料用玉米蛋白粉；

所述的粉碎是指将玉米蛋白粉粉碎至80目；

所述的玉米蛋白溶液中玉米蛋白粉的终浓度的质量百分比为5%～20%；

所述的分散、水化的剪切速度为2000rpm～3000rpm，时间为10~20min。

步骤（2）中所述的pH值通过使用氢氧化钠溶液调节；

所述的氢氧化钠溶液的浓度为1mol.L^-1～5mol.L^-1；

所述的搅拌酶解的搅拌速度为36rpm；

所述的钝化α-高温淀粉酶活性是指将酶解液在95℃～100℃保持10min～20min;

所述的降温冷却是指冷却到55℃～60℃；

所述的离心是在4000rpm～6000rpm下离心10min～20min。

步骤（3）中所述的去离子水的温度为50℃～55℃。

步骤（4）中所述的升温是指温度升至80℃～85℃；

所述的活性炭粉末的加入量相当于玉米蛋白浆中蛋白质质量的0.2%～1%；所用活性炭

步骤（5）中所述的粗滤是指将灭酶、脱色后的玉米蛋白浆泵入板框式硅藻土过滤机粗

滤；

为200目以上的活性炭。

所述的超滤是指压滤后的清夜先通过截留分子量100kDa的超滤膜超滤，滤过液再通过

所述的纳滤是指滤过液经过孔径为1nm的纳滤膜纳滤；

所述的干燥优选通过干燥塔干燥，操作参数优选为进口温度为160℃～170℃，出口温

一种丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽，由上述方法制备得到，所制备得到的

玉米低聚肽中蛋白质的质量百分比为85.42%～87.63%，相对分子量

百分比为92.44%～94.21%，丙氨酸的质量百分

14.12%～14.66%；游离氨

健食品、

度为70℃～90℃。

截留分子量5kDa的超滤膜超滤；

小于1000Da肽的质量

比为6.75%～6.94%，亮氨酸的质量百分比为

基酸的质量百分比为1.12%～1.36%，该玉米低聚肽可广泛用作保 普通食品的原料，尤其可用于制备醒酒护肝产品。

本发明与现有技术相比，具有如下优点和有益效果：

（1）本发明采用高温糊化、α-高温淀粉酶降解、离心分离工艺，一方面高效去除玉米蛋

白粉中的淀粉、脂肪，提升酶解底物玉米蛋白粉的纯度，另一

玉米蛋白的紧密结构，降低其疏水性，便

于1000Da肽的质量

方面持续高温处理可有效打开

于后续酶解，提高玉米肽产品得率（相对分子量小

百分比为92.44%～94.21%），此法能耗低、操作方便、易于工业化实现。

目前研究打开玉米蛋白的紧密结构一般采用高温高压处理（如121℃左右处

超微粉碎、超声波处理等工艺，或采用变性剂如亚硫酸

CN101411494A等，能耗高、对设

会产生残留，

理10min以上）、

钠等，前者如专利CN101126103A、

备要求高；后者如专利CN1786183A等，添加的变性剂

降低产品的安全性。目前研究去除玉米蛋白粉中的淀粉、脂肪一般采用碱液处

理离心再高温或低温淀粉酶处理离心工艺，如专利CN101531700A、

这种方法在碱液处理离心中除掉了油脂，同时也损失了

产品得

CN102172293A等，

玉米蛋白粉中的可溶性蛋白，降低了

率；也有报道采用有机溶剂萃取油脂后再处理淀粉工艺，存在操作繁琐、残留安全性

（2）本发明酶解工艺中采用调节初始浆液pH值至6.0～7.0、中性蛋白酶酶解引起玉米蛋

白浆pH值降至5.0以下加入酸性蛋白酶酶解，组合梯度酶解

提高酶解效率和产品得率，酶用量1～4%

大大降低。另外，本

问题。

可充分发挥酶组合的作用优势，

即可，且避免引入过多的酸液、碱液，生产成本

发明采用中性蛋白酶和酸性蛋白酶组合酶解，避免了大部分文献报道中

（3）本发明通过科学优选活性碳和吸附工艺控制选择性吸附色素物质和苦味物质达到脱

色、去异味，同时该活性碳具有对含丙氨酸、亮氨酸的低聚肽

氨酸、亮氨酸低聚肽在产品中的含量，提

采用碱性酶酶解，可显著降低酶解产物的苦味，改善产品风味。

吸附率低特点，可明显提升丙

升产品的醒酒护肝功效，也非常易于工业化。

本发明旨在以玉米蛋白粉（黄粉）为原料，采用脱脂、脱淀粉处理，结合梯度酶解、活

性碳选择性吸附、浓缩、干燥制备出弱苦味的玉米低聚肽，该肽蛋白

对分子量小于1000Da低聚肽占90%以上，游离

酸（丙氨酸、亮氨酸）含量

以上，

质含量85%以上，相

氨基酸含量低于1.5%，苦味弱、特征氨基

高，低聚肽中含有的丙氨酸、亮氨酸含量分别达到6.75%、14.1%

可广泛用作保健食品、普通食品的原料，尤其可用于醒酒护肝产品。本发明通过预处

理、酶解、精制工艺的科学优选实现非常经济性的工业化制备玉米低

味弱、易于和其他食品配料搭配，醒酒护肝功效

各类食品、保健品中。本发

深加工

聚肽，产品品质好，苦

突出，可以作为优质功能性基料广泛应用于

明可实现玉米精深加工副产物的高附加值综合利用，提升玉米精

企业经济效益，促进玉米种植、加工、养殖的良性循环。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。 实施例1

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉（蛋白质含量≥60%，购于山东西王集

团）粉碎至80目，用去离子水将玉米蛋白粉配制成质量百分比为10%

搅拌机以2000rpm的转速将玉米蛋白粉分散、

的玉米蛋白溶液，用 水化20min；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：用摩尔浓度为3mol.L^-1的氢氧化钠溶液将玉米蛋白粉溶液

pH调节至6.0，加热至82℃，并保持40min，使得玉米

中的淀粉充分糊化；加入相当于玉

20，苏柯汉生

蛋白分子结构充分展开，并且使其

米蛋白粉质量的0.5%的α-高温淀粉酶（SUKAMy-Hi LQ

物工程有限公司），在36rpm、82℃条件下酶解45min，酶解结束后，酶解液

于95℃保持15min，α-钝化高温淀粉酶的活性，然后降温冷却至60℃，采

5000r/min转速离心15min，

粉；

用离心分离机以

去脂肪和液体，固体渣即为脱脂和去除淀粉后的提纯玉米蛋白

（3）酶解：用55℃去离子水将固体渣搅拌分散成玉米蛋白浆，保证浆液中蛋白质含量

为10%；调节浆液pH值至6.5，55℃恒温下，加入相当于玉米蛋白

性蛋白酶（Neutrase0.8L，诺维信（中国）投资

玉米蛋白浆中蛋白质质量1%

浆中蛋白质质量1%的中

有限公司）搅拌水解1.5h后，再加入相当于

的酸性蛋白酶（杰能科食品级酸性蛋白酶Protex26L，无锡杰 有限公司）搅拌水解6h；

能科生物工程

（4）灭酶、脱色：酶解结束后升温至85℃，加入相当于玉米蛋白浆液中蛋白质重量的

0.6%的活性碳粉末（200目）搅拌混匀，恒温36rpm搅拌45min，实

提升产物中含丙氨酸和亮氨酸的低聚肽含量；

现灭酶、吸附脱色以及

（5）粗滤、超滤、纳滤：将含活性碳的玉米蛋白浆液泵入板框式硅藻土过滤机粗滤，

压滤后的清液首先通过截留分子量为100kDa的超滤膜超滤，滤过液

的超滤膜超滤，滤过液再经过孔径为1nm的纳

浓缩液经干燥塔干燥，进口

得到丙

再通过截留分子量5kDa

滤膜纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

温度控制为170℃，出口温度控制为80℃，干燥结束，包装，即 氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽。 实施例2

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉（蛋白质含量≥60%，购于山东西王集

团）粉碎至80目，用去离子水将玉米蛋白粉配制成质量百分比为20%

搅拌机以3000rpm的转速将玉米蛋白粉分散、

的玉米蛋白溶液，用 水化10min；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：用摩尔浓度为5mol.L^-1的氢氧化钠溶液将玉米蛋白粉溶液

pH调节至7.0，加热至80℃，并保持60min，使得玉米

中的淀粉充分糊化；加入相当于玉

20，苏柯汉生物工程

蛋白分子结构充分展开，并且使其

米蛋白粉质量的1%的α-高温淀粉酶（SUKAMy-Hi LQ

有限公司），在36rpm、80℃条件下酶解60min，酶解结束后，酶解液

于95℃保持20min，α-钝化高温淀粉酶的活性，然后降温冷却至55℃，采

用离心分离机以 6000r/min转速离心10min，去脂肪和液体，固体渣即

粉；

为脱脂和去除淀粉后的提纯玉米蛋白

（3）酶解：用50℃去离子水将固体渣搅拌分散成玉米蛋白浆，保证浆液中蛋白质含量

为20%；调节浆液pH值至7.0，50℃恒温下，加入相当于玉米蛋白

性蛋白酶（Neutrase0.8L，诺维信（中国）投资

玉米蛋白浆中蛋白质质量

浆中蛋白质质量2%的中

有限公司）搅拌水解1h后，再加入相当于

0.5%的酸性蛋白酶（杰能科食品级酸性蛋白酶Protex26L，无锡

杰能科生物工程有限公司）搅拌水解4h；

（4）灭酶、脱色：酶解结束后升温至80℃，加入相当于玉米蛋白浆液中蛋白质重量的

0.2%的活性碳粉末（400目）搅拌混匀，恒温36rpm搅拌30min，实

提升产物中含丙氨酸和亮氨酸的低聚肽含量；

现灭酶、吸附脱色以及

（5）粗滤、超滤、纳滤：将含活性碳的玉米蛋白浆液泵入板框式硅藻土过滤机粗滤，

压滤后的清液首先通过截留分子量为100kDa的超滤膜超滤，滤过液

的超滤膜超滤，滤过液再经过孔径为1nm的纳

浓缩液经干燥塔干燥，进口

得到丙

再通过截留分子量5kDa

滤膜纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

温度控制为160℃，出口温度控制为70℃，干燥结束，包装，即 氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽。 实施例3

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉（蛋白质含量≥60%，购于山东西王集

团）粉碎至80目，用去离子水将玉米蛋白粉配制成质量百分比为5%

搅拌机以2500rpm的转速将玉米蛋白粉分散、

的玉米蛋白溶液，用 水化15min；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：用摩尔浓度为1mol.L^-1的氢氧化钠溶液将玉米蛋白粉溶液

pH调节至5.0，加热至85℃，并保持20min，使得玉米

中的淀粉充分糊化；加入相当于玉

20，苏柯汉生

蛋白分子结构充分展开，并且使其

米蛋白粉质量的0.1%的α-高温淀粉酶（SUKAMy-Hi LQ

物工程有限公司），在36rpm、85℃条件下酶解30min，酶解结束后，酶解液

于100℃保持10min，α-钝化高温淀粉酶的活性，然后降温冷却至55℃，采

4000r/min转速离心20min，去脂肪和液体，固体渣即

粉；

用离心分离机以

为脱脂和去除淀粉后的提纯玉米蛋白

（3）酶解：用50℃去离子水将固体渣搅拌分散成玉米蛋白浆，保证浆液中蛋白质含量

为5%；调节浆液pH值至6.0，50℃恒温下，加入相当于玉米蛋白浆

中性蛋白酶（Neutrase0.8L，诺维信（中国）投

于玉米蛋白浆中蛋白质质量

杰能科生物工

中蛋白质质量0.5%的

资有限公司）搅拌水解2h后，再加入相当

2%的酸性蛋白酶（杰能科食品级酸性蛋白酶Protex26L，无锡 程有限公司）搅拌水解8h；

（4）灭酶、脱色：酶解结束后升温至85℃，加入相当于玉米蛋白浆液中蛋白质重量的

1%的活性碳粉末（200目）搅拌混匀，恒温36rpm搅拌60min，实现

升产物中含丙氨酸和亮氨酸的低聚肽含量；

灭酶、吸附脱色以及提

（5）粗滤、超滤、纳滤：将含活性碳的玉米蛋白浆液泵入板框式硅藻土过滤机粗滤，

压滤后的清液首先通过截留分子量为100kDa的超滤膜超滤，滤过液

的超滤膜超滤，滤过

再通过截留分子量5kDa

液再经过孔径为1nm的纳滤膜纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

浓缩液经干燥塔干燥，进口温度控制为165℃，出口温度控制为90℃，干燥

得到丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽。

结束，包装，即

实施例4

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉（蛋白质含量≥60%，购于山东西王集

团）粉碎至80目，用去离子水将玉米蛋白粉配制成质量百分比为15%

搅拌机以3000rpm的转速将玉米蛋白粉分散、

的玉米蛋白溶液，用 水化15min；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：用摩尔浓度为4mol.L^-1的氢氧化钠溶液将玉米蛋白粉溶液

pH调节至6.0，加热至80℃，并保持30min，使得玉米

中的淀粉充分糊化；加入相当于玉

20，苏柯汉生

蛋白分子结构充分展开，并且使其

米蛋白粉质量的0.8%的α-高温淀粉酶（SUKAMy-Hi LQ

物工程有限公司），在36rpm、80℃条件下酶解50min，酶解结束后，酶解液

于95℃保持20min，α-钝化高温淀粉酶的活性，然后降温冷却至60℃，采

5000r/min转速离心20min，去脂肪和液体，固体渣即

粉；

用离心分离机以

为脱脂和去除淀粉后的提纯玉米蛋白

（3）酶解：用55℃去离子水将固体渣搅拌分散成玉米蛋白浆，保证浆液中蛋白质含量

为10%；调节浆液pH值至6.5，55℃恒温下，加入相当于玉米蛋白

中性蛋白酶（Neutrase0.8L，诺维信（中国）投

于玉米蛋白浆中蛋白质质量

锡杰能科生物

浆中蛋白质质量0.5%的

资有限公司）搅拌水解1.5h后，再加入相当

0.5%的酸性蛋白酶（杰能科食品级酸性蛋白酶Protex26L，无 工程有限公司）搅拌水解6h；

（4）灭酶、脱色：酶解结束后升温至80℃，加入相当于玉米蛋白浆液中蛋白质重量的

0.4%的活性碳粉末（200目）搅拌混匀，恒温36rpm搅拌40min，实

提升产物中含丙氨酸和亮氨酸的低聚肽含量；

现灭酶、吸附脱色以及

（5）粗滤、超滤、纳滤：将含活性碳的玉米蛋白浆液泵入板框式硅藻土过滤机粗滤，

压滤后的清液首先通过截留分子量为100kDa的超滤膜超滤，滤过液

的超滤膜超滤，滤过液再经过孔径为1nm的纳

浓缩液经干燥塔干燥，进口

得到丙

再通过截留分子量5kDa

滤膜纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

温度控制为160℃，出口温度控制为70℃，干燥结束，包装，即 氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽。 实施例5

（1）玉米蛋白粉的分散、水化：将玉米蛋白粉（蛋白质含量≥60%，购于山东西王集

团）粉碎至80目，用去离子水将玉米蛋

搅拌机以3000rpm

白粉配制成质量百分比为15%的玉米蛋白溶液，用 的转速将玉米蛋白粉分散、水化15min；

（2）糊化、脱脂、去淀粉：用摩尔浓度为4mol.L^-1的氢氧化钠溶液将玉米蛋白粉溶液

pH调节至6.0，加热至80℃，并保持30min，使得玉米

中的淀粉充分糊化；加入相当于玉

20，苏柯汉生

蛋白分子结构充分展开，并且使其

米蛋白粉质量的0.8%的α-高温淀粉酶（SUKAMy-Hi LQ

物工程有限公司），在36rpm、80℃条件下酶解50min，酶解结束后，酶解液

于95℃保持20min，α-钝化高温淀粉酶的活性，然后降温冷却至60℃，采

5000r/min转速离心20min，去脂肪和液体，固体渣即

粉；

用离心分离机以

为脱脂和去除淀粉后的提纯玉米蛋白

（3）酶解：用55℃去离子水将固体渣搅拌分散成玉米蛋白浆，保证浆液中蛋白质含量

为10%；调节浆液pH值至6.5，55℃恒温下，加入相当于玉米蛋白

中性蛋白酶（Neutrase0.8L，诺维信（中国）投

浆中蛋白质质量0.5%的

资有限公司）搅拌水解1.5h后，再加入相当 于玉米蛋白浆中蛋白质质量

锡杰能科生物

0.5%的酸性蛋白酶（杰能科食品级酸性蛋白酶Protex26L，无 工程有限公司）搅拌水解6h；

（4）灭酶：酶解结束后升温至80℃，恒温36rpm搅拌40min灭酶。

（5）粗滤、超滤、纳滤：将灭酶后的玉米蛋白浆液泵入板框式硅藻土过滤机粗滤，压

滤后的清液首先通过截留分子量100kDa的超滤膜超滤，滤过液再通

超滤膜超滤，滤过液再经过孔径为1nm的纳滤

浓缩液经干燥塔干燥，进口

得到丙

过截留分子量5kDa的

膜纳滤，完成脱盐、去游离氨基酸并浓缩，

温度控制为160℃，出口温度控制为70℃，干燥结束，包装，即 氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽。

以上实施例1～4制得的玉米低聚肽粉经10位经验丰富的人员感官评定苦味弱，直接用

水溶解口服，或加入牛奶、果汁等饮料溶解口服，可为广大人群接受，

配技术开发出风味良好的食品。实施例5为不加

粉经10位经验丰富的人员

高接受

也易通过简单风味调

活性碳吸附组，实施例5制得的玉米低聚肽

感官评定苦味较强，需要通过调配或加入苦味掩蔽剂改善风味提 性。

分别采用GB/T5009.3、GB/T5009.4、GB/T5009.5规定的方法测定实施例1～5制得的

玉米低聚肽粉水分、灰分、蛋白质含量；采用按GB/T22729-2008中

施例1～5制得的玉米低聚肽粉肽含量；采用

分析实施例1～5制得的玉

王光亚

6.3规定的方法分析实

GB/T22729-2008附录A高效凝胶过滤色谱法

米低聚肽粉相对分子量小于1000Da肽所占比例；采用杨月欣、

主编的《食用食物营养成分分析手册》（中国轻工业出版社，2002年第一版）提供的

游离氨基酸、水解氨基酸分析方法检测实施例1～5制得的玉米低聚

和总氨基酸质量，其

肽粉中游离氨基酸质量

中：低聚肽中丙氨酸质量为玉米低聚肽粉中丙氨酸含量减去游离丙氨酸

质量所得值占玉米低聚肽粉中总氨基酸含量比值，低聚肽中亮氨酸含量为玉

氨酸质量减去游离亮氨酸含量所得值占玉米低聚肽粉中

米低聚肽粉中亮

总氨基酸质量比值，结果见表1。

表1实施例1～5制得的玉米低聚肽粉分析检测结果

注：其中实施例1～5制得的玉米低聚肽粉分别记为1#、2#、3#、4#、5#。

由表1可见，采用本发明方法实施例1～4制得的玉米低聚肽中蛋白质的质量百分比为

85.42%～87.63%，相对分子量小于1000Da肽的质量百分比为

质量百分比为6.75%～6.94%，亮氨酸的

百分比为1.12%～

92.44%～94.21%，丙氨酸的

质量百分比为14.12%～14.66%；游离氨基酸的质量

1.36%；实施例5为不加活性碳吸附组，除添加活性碳外所有工艺参数和

实施例4一样，实施例5制得的玉米低聚肽蛋白质含量、游离氨基酸含量略

肽中丙氨酸、亮氨酸含量明显下降，丙氨酸含量为

性碳选择性吸附可明显提高玉米低

有增加，但低聚

5.86%，亮氨酸含量为12.97%，可见活 聚肽中丙氨酸、亮氨酸含量。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的，

其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替

为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围

代、组合、简化，均应 之内。