抗茵肽在畜牧生产上的应用 李子瑞 （东北农业大学动物营养研究所，哈尔滨１５００３０） 摘要：抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原微生物的多肽类物质，具有广谱抗菌活性，是宿 主防御系统的重要组成部分，文章主要介绍了抗菌肽的分子结构、杀菌机理及其在畜牧生产中的应用。 关键词：抗菌肽；分子结构；杀菌机理；应用前景 中图分类号：￥８１６．７３；Ｑ９５９文献标志码：Ａ文章编号：１００１—００８４（２０１０）０８—００１２～０２ 长期使用抗生素会引发细菌耐药性，威胁人类 健康。寻求和开发有利于环保的新型抗菌药物替代 抗生素具有重要意义。抗菌肽（Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐ— ｔｉｄｅｓ）最初是从昆虫免疫后的血淋巴细胞中发现的 碱性多肽类物质，分子量很小，是一类广泛存在于 胞（ＰＭＮｓ）、巨噬细胞、淋巴细胞和自然杀伤细胞＿３１。 Ｗａｎｇ等对５２５种抗菌肽分析研究，发现抗菌 肽的一级结构差异很大，含有６～８４个氨基酸残基， 能与革兰氏阴性菌的脂多糖和革兰氏阳性菌的磷壁 酸结合，发挥抗菌作用 。抗菌肽在自然界分布广 泛，来源不一，有许多种不同的分类方法。Ｍａｒｔｉｎ 动物体内具有广谱抗菌活性的阳离子型多肽，是生 物先天免疫的重要组成成分Ｉ 。抗菌肽易通过环境 等按氨基酸残基特点和二级结构将抗菌肽分为４ 类 。第一类为含有半胱氨酸的两亲性的 一折叠抗 菌肽。该类抗菌肽分子内含有２－６个二硫键最具有 与宿主反应起到抗病原微生物的作用，一般不易产 生耐药性，现已成为当前学术界中的研究热点。 １抗菌肽的概述 代表性的是动物防御素。其是动物体内防御系统的 最大成员，可分为 、 、０ ３大类。 一防御素在哺 乳动物粒细胞或巨噬细胞中表达， 一防御素在哺乳 抗菌肽是生物体内存在的一类具有广谱抗菌活 性的小分子多肽，具有两亲性结构。Ｂｏｍａｎ等首先 在果蝇中发现抗菌肽，随后从惜古比天蚕蛹中诱导 分离并命名为天蚕素或杀菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ） 。此后， 大量类似的抗菌肽被发现并分离出来。其共同特点 为分子量小、多聚阳离子型和两亲性结构。抗菌肽 主要由免疫系统的细胞产生，如多形核嗜中性白细 收稿日期：２０１０—０４—０８ 动物的上皮细胞中表达；第二类为含有两亲性的 一螺旋抗菌肽，此类抗菌肽Ｎ端富含碱性氨基酸 残基，Ｃ末端含有较多的疏水性氨基酸残基，这一 结构有利于其插入细菌的质膜。除此之外，这类抗 菌肽所带正电荷利于与细菌膜上的负电荷相互吸引 而结合到细菌的细胞膜上。分子的两端各形成一个 作者简介：李子瑞（１９８３一），男，黑龙江尚志人，硕士研究生 研究方向为动物营养学及分子免疫学。 ・● ・‘ ！ ● ， ！，．！ ● ！ ！ ！ ！ ・’ ■ 两亲性Ｏｔ一螺旋，两个螺旋之间有甘氨酸和脯氨酸 形成的铰链区，这种螺结构是破坏、裂解细菌的主 ， ｆ． ！ ・！ ！ ・！，．！ ！ ！ ＿ ！ ！，．！ ！ ！ １ ・！ ！ －！ １ １．， ｊｏｒ ｓｕｂｕｎｉｔｓ ｆｒｏｍ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ ｅｅｌ１ｕｌｏｓｏｍｅ ａｎｄ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｒｏｉｌｅｒ ｃｈｉｃｋｅｎ ｐｅｒｆｏｒ— ｔｈｅｉｒ ｓｙｎｅｒｇｉＳＩＴＩ ｉｎ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ— ｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｅｕｌｅｓ，１９９４，１６（６）： ３３５—３４２．ｍａｎｃｅＯ］．Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００５．８４（１）：３７—４７． ［１２］ Ｃｈｅｓｓｏｎ Ａ．Ｎｏｎ－ｓｔａｒｃｈ ｐｏｌｙｓａｃｅｈａｒｉｄｅ ｄｅｇｒａｄｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｐｏｕｈｒｙ ｄｉｅｔｓ：ｌｎｆｕｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ［１０】Ｗｏｎｇ Ｋ Ｙ Ｋ，Ｔａｎ Ｌ Ｕ Ｌ，Ｓａｄｄｌｅｒ Ｊ Ｎ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａ一 ｍｏｎｇ ｔｈｒｅｅ ｘｙｌａｎａｓｅｓ ｆｒｏｍ ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ…．Ｅｎｚｙｍｅ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１９８６（１Ｏ）：６１７－６２２． ［ＪＩ＿Ｗｏｒｌｄ Ｓ Ｐｏｕｈ Ｓｃｉ，２００１，５７：２５１～２６３． ［１３】Ｔａｈｉｒ Ｍ，Ｓａｌｅｈ Ｆ，Ｏｈｔｓｕｋａ Ａ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｓｅｓ ｔｈａｔ ｅｎａｂｌｅｓ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｂｒｏｉｌ一 【１ １］Ｍｅｎｇ Ｘ，Ｓｌｏｍｉｎｓｋｉ Ｂ Ａ，Ｎｙａｃｈｏｔｉ Ｃ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｗａｌｌ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｓｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｅｒｓ：ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ｈｅｍｉｅｅｌｌｕｌａｓｅ【Ｊ１．Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００８，８７： ７１３－７１８． １２饲料博览・技术版２０１０年第８期 要结构；第三类为含有二硫键的半胱氨酸环状结构 的抗菌肽，该类抗菌肽在Ｃ末端有分子内二硫键， 形成一个环链结构，而Ｎ末端为线状结构；第四类 为含有１～２个氨基酸的线性伸展结构的抗菌肽…。 结构不同，真核细胞含有丰富的膜蛋白和胆固醇， 特别是后者能够使膜蛋白趋于稳定，而ＮＳＬ动物细 胞存在丰富的膜骨架系统，抵抗了抗菌肽的作用。 ３抗菌肽在畜牧生产上的应用 该类抗菌肽由ｌ５～３４个氨基酸组成，不含半胱氨 酸，但富含脯氨酸、精氨酸或色氨酸。 抗菌肽具有广谱抗菌活性，对真核细胞没有伤 害作用。有望解决细菌耐药性、抗生素的残留及饲 其中，Ｏ／一螺旋和 一折叠这两种结构占自然界 中天然抗菌肽的８０％以上。这些抗菌肽具有广谱 料添加剂等问题。 ３．１临床药用及应用 抗菌和其他优良的特性，如高效的抗真菌、抗病 毒、原虫和抗肿瘤活性，这与其自身的结构特点密 不可分 】。因此，这类抗菌物质充分显示了其在 畜牧养殖上的应用前景。 ２抗菌肽的作用机理 传统抗生素的抗菌机理是与病原体上的某些特 殊部位结合，破坏病原体的结构或者阻碍其生物合 成，以达到抑菌或杀菌的目的。当作用的靶点改变 时，病原体就会产生抗药性。抗菌肽对真菌、病毒 及发生细胞病变的真核细胞也具有抗菌作用。其抗 菌作用一般不涉及特定受体，完全是阴阳离子的相 互作用，这种独特的抗菌机理形成了不耐药的特 性 。尽管人们对抗菌机理已经研究较多，但目前 仍处在理论假设阶段。主要有３种理论模型，包括 孔洞学、可变毯模型和离子通道学说ｌｌｏｌ。尽管有关 抗菌肽的抗菌机理研究的争论比较多，目前尚无定 论，但许多研究已经证明，静电荷、疏水性以及两 性分子性质是调节抗菌肽活性的重要参数ｌ】 。带有 正电荷阳离子结构的抗菌肽与带有负电荷细菌质膜 的磷脂表面通过静电相互吸引而靠近，抗菌肽分子 中的疏水端插入质膜中，Ｎ端的两亲性Ｏ／一螺旋也 插入质膜中，从而破坏了脂质双层原有的结构，在 质膜上形成离子通道，通过改变膜的构象，多个抗 菌肽聚合在膜上形成离子通道，造成细胞内容物泄 露致细胞死亡。人们对抗菌肽与细胞膜的接触也有 许多不同的看法，一种是抗菌肽与细胞膜作用，使 细胞膜上的蛋白凝聚，变性失活，形成离子通道， 改变细胞膜的通透性，最后导致细胞死亡，另一种 是细胞膜上存在特异受体及其他因子协助细菌死 亡。目前研究倾向于第一种假设。 抗菌肽对原核细胞产生特异的溶菌活性，对低 等的真核生物如真菌及某些植物的原生质体以及某 些肿瘤细胞也有杀伤作用，而对正常的哺乳动物细 胞没有作用，其原因可能是原核细胞和真核细胞膜 Ｗａｃｈｉｎｇｅｒ等的研究结果表明，蜂毒素和天蚕 素可以在亚毒性浓度下抑制爱滋病毒ＨＩＶ一１的基 因表达，减少ＨＩＶ一１的增殖ｌ】２１。天蚕素、爪蛙素、 鼠抗菌肽ＮＰ一１和ＮＰ一２及人抗菌肽ＨＮＰ一１均表现 出对肿瘤细胞的杀伤活性【ｌ３］。这可能是由于肿瘤细 胞的细胞骨架系统不发达，抗菌肽易插入细胞脂膜 形成离子通道，从而杀死肿瘤细胞。组蛋白衍生物 Ｐ一１１３是一个由ｌ２个氨基酸组成的阳离子肽，是 唾液中天然抗菌肽组蛋白的结构类似物【１４１。体外试 验已经证实，Ｐ一１ １３有很好的抗白色念珠菌、革兰 氏阴性菌和革兰氏阳性菌的作用，开发Ｐ一１１３用 来治疗艾滋病患者口腔白色念珠菌感染的Ｉ、Ⅱ期 临床试验已经完成。另外Ｐ一１ １３Ｄ也将被用于治疗 囊性纤维化患者肺部绿脓杆菌的感染ｌ 】。 ３．２抗菌肽替代抗生素的研究 传统的抗生素是通过阻断生物大分子的合成来 杀灭细菌的，而抗菌肽是通过裂解细菌的细胞膜使 其内容物外泄而导致细胞死亡的，两者的作用机理 完全不同，因此，使用抗菌肽杀灭细菌不会产生抗 药性。 设计一种高效、有利于人类健康的抗菌肽来代 替抗生素是完全可行的。温刘发等通过在断奶仔猪 饲料中用抗菌肽代替抗生素，结果表明，抗菌肽在 仔猪断奶应激期间抗腹泻效果较抗生素好，适量的 抗菌肽比抗生素的促生长效果更理想。但高剂量的 抗菌肽则降低了仔猪的生长速度ｌＪ６１。黄永彤等发 现，抗菌肽有促进肉鸡生长和提高免疫力作用。与 中草药抗生素相比，在出栏率、平均体重、饲料效 率等方面均无显著差异，且在出栏前３ ｄ停喂，抽 检无残留 。陈晓生等研究发现，添加抗菌肽制剂 ２ ｍＬ・ｋｇ 能有效提高１～２周龄肉鸭的生产性能， 添加２．３ ｍＬ・ｋｇ 可显著提高产肉率 １。添加抗菌 肽会使机体在蛋白质合成量变化不大的情况下减少 机体蛋白质的分解代谢，从而促进生长。 ２０１０年第８期饲料博览・技术版１３ ３．３抗菌肽的基因工程研究 畜禽病毒性疾病对临床工作者一直是棘手的疾 病，不利于畜牧业的发展。借鉴已成功的昆虫抗菌 肽转基因工程，把抗菌肽基因转入畜禽特定细胞使 其真核表达，从而产生抗病新品种。为养殖业发展 提供新思路。抗菌肽天然产量低，用化学合成的方 法价格昂贵，利用基因工程手段获得无疑是目前最 佳选择，目前多种抗菌肽已在不同的表达体系中得 到表达。但如何进一步提高表达水平，提高基因表 达产物的稳定性和广谱抗菌性，都是值得深入研究 的问题。廖文艳等在大肠杆菌系统里表达了重组禽 抗菌肽，该重组抗菌肽对大肠杆菌、多杀性巴氏杆 菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽胞杆菌 有抗菌活性，但对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性ｌ１９－２０１。 该重组禽抗菌肽对温度（一７０～ｌ００℃）和酸碱度（ｐＨ ３～１０）有较高的稳定性。这也暗示了这两种重组蛋 白在上述温度和ｐＨ范围之外仍具有抑菌活性。这 些研究结果为基因工程获得的抗菌肽作为饲料添加 剂或直接口服等应用的可能性提供了理论依据。 ４结语 近年来，人们一直在寻找可以彻底解决耐药性 问题的抗菌药物，尤其当禽流感、疯牛病等一些动 物疑难病症的出现，使人们更加渴望绿色、环保抗 菌药物的出现，寻找抗生素替代品已成为必然的趋 势。抗菌肽为机体内产生的天然成分，具有广谱抗 菌、抗病毒和免疫增强的作用，并且对机体无毒 害、无残留。并且其有着独特的不同于抗生素的抗 菌机理，现在已完全有可能用生物工程的技术方法 大量生产有生物活性的抗菌肽，使之成为新一代肽 类抗菌药的来源。 【参考文献】 Ｂｏｍａｎ Ｈ Ｇ，Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｋｅｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｎｅｅｄｅｄ ｉｎ ｉｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，１９９１，６５（２）：２０５—２０７． ［２］ Ｂｏｍａｎ Ｈ Ｇ，Ｎｉｌｓｓｏｎ Ｌ々Ｒａｓｍｕｓｏｎ Ｂ．Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｅ－ ｆｅｎｓｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ＤｒＩｌｓｏｐｈｉ ａＩ叨．Ｎａｔｕｒｅ，１９７２，２３７（５ ３５２）：２３２－２３５． ［３］ Ｌｅｈｒｅｒ Ｒ Ｉ，Ｇａｎｚ Ｔ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｉａｎ ａｎｄ ｉｎｓｅｃｔ ｈｏｓｔ ｄｅｆｅｎｓｅ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９９，１ １（１）：２３—２７． ［４】 Ｗａｎｇ Ｚ，Ｗａｎｇ Ｇ Ｓ．ＡＰＤ：ｔｈｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｄａｔａ ｂａｓｅ［Ｊ］． Ｎｕｃｉｌｅ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，２００４，３２：５９０—５９２． ［５】 Ｍａｒｔｉｎ Ｅ，Ｇａｎｚ Ｔ，Ｌｅｈｒｅｒ Ｒ Ｉ．Ｄｅｆｅｎｓｉｎｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ １４饲料博览．技术版２０１０年第８期 ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｏｆ ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｓ『Ｊ］．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ，１９９５，５８： １２８－ｌ３６． ［６】 Ｐｏｗｅ￣Ｊ Ｈａｎｃｏｃｋ Ｒ Ｅ．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｔｍ— ｅｔｕｒｅ ａｎｄ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｅｔｉｖｉｔ朋．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，２００３，１ １：１ ６８１－１ ６９１． ［７】 Ｍｏｒｉｍｏｔｏ Ｍ，Ｍｏｒｉ Ｈ，Ｏｔａｋ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔａｃｈｙｐｌｅ－ ｓｉｎ Ｉ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｅｙ ｖｉｒｕｓ ｉｎ ｖｉｔ— ｒｏ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１９９１，３７（３）：３２７－３３４． ［８］ Ｂａｋｅｒ Ｍ Ａ，Ｍａｌｏｙ Ｗ Ｌ，Ｚａｓｌｏｆｆ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｅｆｉｆｃａｃｙ ｏｆ ｍａｇａｉｎｉｎ ２ ａｎｄ ａｎａｌｏｇｕｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９３，５３（１３）： ３ ０５２—３ ０５７． ［９］ Ｋｅｌｌｅｙ Ｋ Ｊ．Ｕｓｉｎｇ ｈｏｓｔ ｄｅｆｅｎｓｅｓ ｔｏ ｆｉｓｈｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１９９６，１４（５）：５８７—５８９． ［１Ｏ］ Ｒｅｄｄｙ Ｋ Ｖ，Ｙｅｄｅｒｙ Ｒ Ｄ，Ａｒａｎｈａ Ｃ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ ｐｅｐ ｔｉｄｅｓ： ｐｒｅｍｉｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｍｉｓｅｓ［ＪＪ．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ，２００４，２４ （６）：５３６—５４７． Ｒｅｎａｔｏ Ｇ，Ｍａｒｇｈｅｒｉｔａ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏ－ｒｉｃｈ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓｆｒｏｍ ａｎｉｍａｌｓ：ｓｔｕｒｃｔｕｒｅ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓａｎｄ ｍｅｃｈａ－ｎｉｓｍｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｃｕｒｒｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ，２００２（８）：７６３—７７８． ［１２］ Ｗａｃｈｉｎｇｅｒ Ｍ，Ｋｌｅｉｎｓｃｈｍｉｄｔ Ａ，Ｗｉｎｄｅｒ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｍｅｌｉｔｔｉｎ ａｎｄ ｃｅｃｒｏｐｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｌ ｂｙ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ ｖｉｒａｌ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ［Ｊ１．Ｊ ＧｅｎＶｉｒｏｌ，１９９８，７９：７３１－７４０． ［１３】 周义文，尹一兵，涂植光．生物抗菌肽研究进展及应用前景［Ｊ１ ．国外医学临床生物化学与检验学分册，２００４，２５（２）：１３１． ［１４】 Ｋａｖａｎａｇｈ ｋ Ｄｏｗｄ Ｓ．Ｈｉｓｔａｔｉｎｓ：ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅｒ Ｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ＩＪｊ．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｅｏｌ，２００４，５６（３）：２８５—２８８． ［１５】 Ｔａｎａｂｅ Ｍ，Ｉｚｕｍｉ Ｈ，Ｉｓｅ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ４Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ［Ｊ］． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００３，６３（２４）：８ ５９２－８ ５９５． ［１６】 温刘发，张常明，付林，等．抗菌肽制剂代替抗生素在断奶仔猪 饲粮中的应用效果叫．中国饲料，２００１（１８）：１３—１４． ［１７】 黄永彤，黄自然，黄建清，等．抗菌肽与抗生素饲喂肉鸡的效果 比较『Ｊ１．广东饲料，２００４，１３（２）：２４—２５． ［１８】 陈晓生，刘为民，周庆国，等．饲粮中添加抗菌肽对肉鸭血清代 谢激素及生理生化指标的影响［ＪＪ＿兽药与饲料添加剂，２００５， １０（２）：４—６． ［１９］ 廖文艳，马得莹，刘胜旺，等．重组鸭卢一防御素９基因的克隆、 组织分布及其原核表达［ＪＪ．中国农业科学，２００９，４２（４）： １ ４０６—１ ４１２． 【２０］ 廖文艳，马得莹，王瑞琴，等．鸭口一防御素１Ｏ基因的克隆、遗 传进化分析及其生物学特性的初步研究【ＪＪ．畜牧兽医学报， ２００９，４０（９）：１ ３２０—１ ３２６．
