樱桃番茄种质资源遗传多样性的RAPD分析

福建农业学报２１（１）：５９～６２，２００６　Ｆｕｊｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｃ’ｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　文章编号：１００８－－０３８４（２００６）０１－－００５９－－０４　樱桃番茄种质资源遗传多样性的ＲＡＰＤ分析　温庆放　，朱海生　，林义章　，康建坂　，薛珠政　（１．福建省农业科学院耕作轮作研究所．福建摘福州３５００１３；２．福建农林大学园艺学院。福建福州３５０００２）　要：从２００个随机引物中筛选出２７个引物，对３２个樱桃番茄品种进行ＲＡＰＤ分析。并对樱桃番茄遗传多样性　和分类进行探讨和研究，结果显示，２７个引物共扩增出２０７条ＤＮＡ谱带，其中多态条带１３９条，多态性程度为　６７．１　５　；平均每个引物产生７，６７条，每个引物可扩增出２～１２条多态性谱带，谱带大小为２７０￣２　０００　ｂｐ；遗传　距离Ｄ值在０．３３水平上．能将供试材料聚为３类：野生种聚成一类，果皮为黄色和少数红色品种聚成一类。全部　是红色聚成一类；此外。还发现从重要特征观察，樱桃番茄品种表现出一定的聚集趋势。　关键词：樱桃番茄；ＲＡＰＤ；遗传多样性；聚类分析　中图分类号：Ｓ　６４１．２；Ｑ　７５　文献标识码；Ａ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍｓ　ｂｙ　ＲＡＰＤ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ＷＥＮ　Ｑｉｎｇ　ｆａｎｇ’．ＺＨＵ　Ｈａｉ—ｓｈｅｎｇ　，ＬＩＮ　Ｙｉ—ｚｈａｎｇ　，ＫＡＮＧ　Ｊｉａｎ—ｂａｎ’，ＸＵＥ　Ｚｈｕ—ｚｈｅｎｇ　（１－Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｏｔａｔｉｏｎ・Ｆｕｊｉａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｔ，　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｚｈｏｕ—Ｆｕｊｉａｎ　３５００１３．　Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　‘Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ。Ｆｕｊｉａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３　５０００２．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ　ｏｆ　ｔｈｉｒｔｙ－ｔＷＯ　ｃｕｌｔｉｖａｒｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎ—　ｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｒａｎｄｏｍ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ　ｍａｒｋｅｒｓ（ＲＡＰＤ）．Ｔｗｅｎｔｙ—ｓｅｖｅｎ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｗｏ　ｈａｎｄｒｅｄ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　２０７　ＤＮＡ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ａｎｄ　１３９　ｂａｎｄｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｔｈａｔ　ｏｃｃｕｐｉｅｄ　６７．１５　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｗｈｏｌｅ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｂａｎｄｓ．Ｅａｃｈ　ｐｒｉｍｅｒ　ｃｏｕｌｄ　ａｍｐｌｉｆｙ　２　ｔｏ　１２　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｂａｎｄｓ，ｗｉｔｈ　ａｎ　ａｖｅｒａｇｅ　ｏｆ　７＋６７　ｂａｎｄｓ．Ｔｈｅ　ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ｍｏｓｔ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｒａｎｇｅｄ　ｆｒｏｍ　２７０　ｔＯ　２０００　ｂｐ．Ｃｌｕｓｔｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　３２　ｃｕｌｔｉｖａｒｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ　ｉｎｔｏ　３　ｇｒｏｕｐｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｄ　０．３３，ｗｈｉｃｈ　ｅｖｉｄｅｎｔｌｙ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｓｏｍｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｔｒａｉｔｓ　ｏｆ　Ｌｙｃ＠ｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　ｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ；ＲＡＰＤ；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｇｅｒｍｐｌａｓｍｓ　樱桃番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉ－　来的分子标记技术，具有操作简便、标记数量多、不　受环境影响且不需同位素标记等优点，目前已广泛　ｆｏｒｍｅ）又名迷你番茄、微型番茄、小番茄等，为茄　科番茄属蔬菜。２Ｏ世纪８Ｏ年代开始，在全世界栽培　面积迅速扩大。我国近些年从国外引入，南北方均　可栽培，目前有迅速发展的趋势。长期以来，樱桃　番茄种质资源的研究滞后于育种实践，对多种类型　的地方资源或生态型在遗传上的差异及现有樱桃番　应用于水稻　¨、大麦［　、辣椒［引、大豆［　、茶树　ｓ　等　多种植物中，但该技术应用于樱桃番茄的研究目前　国内尚未见报道，国外也不多。本研究在前人研究　的基础上，从２００个随机引物中筛选出２７个引物，对　３２个樱桃番茄品种进行ＲＡＰＤ分析，初步探讨了樱　茄的遗传多样性等缺乏足够的研究。同时，由于传　统的基于表型分析的遗传资源研究方法的诸多局限　性，樱桃番茄品种选育过程中亲本的选择存在着不　同程度的盲目性和随意性，影响了育种效率的提高　和樱桃番茄杂种优势利用。ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ　Ａｍｐｌｉ．　ｌｆｅｄ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ）技术即随机扩增多态性　ＤＮＡ技术，是２ｏ世纪９ｏ年代在ＰＣＲ基础上发展起　收稿日期：２００５－－１０－－０２初稿；２００５－－１２－－２９修改稿　桃番茄遗传资源的遗传多样性和亲缘关系，并估测　它们之间的遗传差异。　１材料与方法　１．１试验材料　选取本研究所从国内外收集的３２份樱桃番茄　品种，其编号、品种名称及来源详见表ｌ。　作者简介　温庆放（１９６５－－）。男，副研究员。从事蔬菜育种与栽培研究。　基金项目：福建省科技厅重点项目（２００５Ｎ０２６）。　维普资讯 http://www.cqvip.com

６０　福建农业学报　第２１卷　表１试验材料　Ｔａｂｌｅ　１　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｏｆ　ｔｅｓｔ　编号品种名　来源　编号品种名　来源　１番柿６—１号　福州　１７樱桃番茄Ｐ１２一ｌ　福州　２番柿２号　福卅Ｉ　１８樱桃番茄Ｐｌ３　日本　３樱桃番茄１６—５—６福州　１９　以色列樱桃番茄　以色列　４番柿４号　福州　２Ｏ樱桃番茄Ａｏ　日本　５番柿１号　福州　２１樱桃番茄１６—５—１　福州　６樱桃番茄黄小玉Ｉ　福州　ｚ２樱桃番茄１６—８　印尼　７樱桃番茄黄小玉２　福卅Ｉ　２３樱桃番茄１６—９—１　福州　８樱桃番茄Ｐ。　日本　２４樱桃番茄１６—１０—５福州　９樱桃番茄１６—１３　台湾　２５樱桃番茄１６—１Ｏ一６福州　１Ｏ樱桃番茄１６—６—１　福卅ｌ　２６樱桃番茄１６—９—２　福州　１１樱桃番茄１６—９—４福卅ｌ　２７樱桃番茄１６—１１　福州　１２番柿３号　福州　２８樱桃番茄Ｐ。１　福州　１３樱桃番茄金保　韩国　２９美味樱桃番茄　中科院　１　４樱桃番茄黄小玉３　福州　３ｏ亚蔬６号　台湾　１５樱桃番茄１６—１４　台湾　３１樱桃番茄１６—１Ｏ　福州　１６樱桃番茄黄洋梨　台湾　３２樱桃番茄１６—５　福州　１．２试剂和仪器　ＲＡＰＤ随机引物、ｄＮＴＰ、Ｔａｑ酶购自上海生工　生物工程技术服务有限公司；琼脂糖购自宝生物工　程（大连）有限公司。扩增反应在美国Ａｐｐｌｅｒａ公司　生产的ＧｅｎｅＡｍｐ　ＰＣＲ　Ｓｙｓｔｅｍ　９６００上进行，凝胶成　像系统为ＵＶＰ公司的ＧＤＳ８０００。　１．３　ＤＮＡ的提取　用改进的ＣＴＡＢ法［６］提取ＤＮＡ：取樱桃番茄幼　嫩叶片０．３　ｇ左右，加液氮快速充分研磨至粉末状；　将粉末移至１．５　ｍｌ离心管中，加６００　ｍｌ预热至６ｏ℃　的２×ＣＴＡＢ提取缓冲液［ｉｏｏ　ｍｍｏｌ・Ｌ　Ｔｒｉｓ—　ＨＣ１（ｐＨ　８．Ｏ），２ｏ　ｍｍｏｌ・Ｌ　ＥＤＴＡ（ｐＨ　８．Ｏ），１．４　ｍｍｏ［・Ｌ＿。ＮａＣＩ，质量分数２　９，５　ＣＴＡＢ，质量分数　１　ＰＶＰ，０．１　ｍｏｌ・Ｌ　巯基乙醇，２０　ｍｍｏ［・Ｌ　Ｎａ。Ｓ。Ｏ　］，充分混匀；６５　Ｃ水浴１０　ｍｉｎ，期间颠倒　数次；加等体积氯仿一异戊醇混合液（２４／１，ｖ／ｖ），　室温下１２　０００　ｒ・ｍｉｎ　离心１０　ｒａｉｎ；取上清液至另　一离心管，加等体积异丙醇和１／１０体积３　ｍｏｌ・Ｌ　ＮａＡｃ（ｐＨ　５．２），于４＇Ｃ下１２　０００　ｒ・ｍｉｎ　离心１０　ｍｉｎ；用体积分数７Ｏ　９，６乙醇洗涤ＤＮＡ　２～３次，风干；　将ＤＮＡ溶于２ｏ　ｌ　ＴＥ溶液［１Ｏ　ｍｍｏ［・Ｌ　Ｔｒｉｓ—　ＨＣｌ（ｐＨ８．Ｏ）。１　ｍｍｏｌ・Ｌ一　ＥＤＴＡ（ｐＨ８．Ｏ）］，力口　入１　ｌ　ＲＮａｓｅ（１Ｏ　ｇ・Ｌ　）并于３７℃保温１５　ｍｉｎ。　一２Ｏ℃保存备用。　１．４　ＤＮＡ扩增反应　１．４．１　反应体系　采用２５　ｌ体系：２５　ｎｇ模板　ＤＮＡ，０．４　ｍｏｌ・Ｌ　引物，０．１５　ｍｍｏ［・Ｌ　ｄＮＴＰ，１　Ｕ　Ｔａｑ　ＤＮＡ聚合酶，１．５　ｍｍｏ［・Ｌ－。　ＭｇＣ１２，２．５　ｌ　１０×ＰＣＲ缓冲液，加入灭菌的超纯水　至２５　Ｉ。　１．４．２　反应程序　９５　Ｃ预变性５　ｒａｉｎ后进行下列　循环：９４　Ｃ变性ｌ　ｍｉｎ。３８　Ｃ退火１　ｍｉｎ，７２℃延伸　２　ｍｉｎ，４５个循环，最后７２℃延伸１０　ｍｉｎ。　１．４．３　检测与成像ＰＣＲ扩增产物在１＋５　９，６的琼　脂糖凝胶上，８Ｏ　Ｖ稳压电泳１．５　ｈ。ＥＢ染色，在ｕＶＰ　公司的ＧＤＳ８０００凝胶成像系统上观察并拍照。　１．５数据分析　根据ＲＡＰＤ扩增产物相同电泳迁移位置带的　有无，建立ｌ，０型数据。以１表示某一电泳迁移位　鼍上产物存在，０表示不存在。根据Ｎｅｉ—Ｌｉ相似系　数法计算，按照类平均聚类方法，运用ＤＰＳ软件生　成聚类图。　２结果与分析　２．１　ＲＡＰＤ标记的多态性　从２００个ＲＡＰＤ随机引物中筛选到有多态谱带　的引物２７个，其名称和序列见表２。用这２７个ＲＡＰＤ　引物对所有樱桃番茄品种进行扩增，共扩增出２０７　条ＤＮＡ谱带，其中多态谱带１３９条，多态性程度为　６７．１５　。平均每个引物产生７．６７条，每个引物可扩　增出２～１２条多态性谱带，谱带大小为２７０￣２　０００　ｂｐ。图１为引物￥５６扩增的３２个樱桃番茄品种ＤＮＡ　的ＲＡＰＤ电泳图。谱带统计结果表明，不同引物所　扩增出的带数不同，同…一引物不同材料之间的扩增　带数也不相同，反映了各个材料之间的多态性；绝　大部分引物在不同品种上都具有主特征带，说明同　一物种内的基因组的同一性。另外，有的引物可以　区别所有的３２品种，有的只能揭示出某些品种的特　征带。　２．２聚类分析　根据ＲＡＰＤ分析所得的１，０型数据，计算各个　基因型间的Ｃｚｅｋａｎｏｗｓｋｉ（１９１３）相似系数（Ｃｓ），并　采用离差平方和法进行聚类分析，获得聚类图（图　２）。各个基因型间的相似性系数分布在０．５７６　６９＂－＂　０．９８３　８７之间，平均相似性为０．７４８　３３。其中樱桃番　茄１６—９—１和樱桃番茄１６—９—２之间相似系数最大。　为０．９８３　８７，它们是从同一亲本中选育出来的，有彼　此最相似的基因型，外部形态也相似；番柿４号和樱　桃番茄１６一１０相似系数最小，为０．５７６　６９，番茄４号　为较大的圆形黄色品种，樱桃番茄１６—１Ｏ为较小的　椭圆形红色品种，两者外部形态差异也较明显。　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　温庆放等：樱桃番茄种质资源遗传多样性的ＲＡＰＤ分析　表２　ＲＡＰＤ引物及其扩增结果　Ｔａｂｌｅ　２　ＲＡＰＤ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ａｎｄ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　６１　引物名称　序列（５ｒ＿３　）　Ｓ１　Ｓ８　Ｓ５６　Ｓ５９　￥６７　Ｓ６８　ＧＴＴＴＣＧＣＴＣＣ　ＧＴＣＣＡＣＡＣＧＧ　ＡＧＧＧＣＧＴＡＡＧ　ＣＴＧＧＧＧＡＣＴＴ　ＧＴＣＣＣＧＡＣＧＡ　ＴＧＧＡＣＣＧＴＣＣ　耄喜美　总谱带数　引物名称　序列（５　３　）　２　６　５　１　４　３　５　９　７　５　４　６　Ｓ１　３４　Ｓ１　３５　Ｓ１　３９　Ｓ１５７　Ｓ１　５９　Ｓ１７２　ＴＧＣＴＧＣＡＧＧＴ　ＣＣＡＧＴＡＣＴＣＣ　ＣＣＴＣＴＡＧＡＣＣ　ＣＴＡＣＴＧＣＣＧＴ　ＡＣＧＧＣＧＴＡＴＧ　ＡＧＡＧＧＧＣＡＣＡ　喜霉　１　１０　６　６　２　６　总谱带数　２　１２　７　８　５　１１　￥６９　Ｓ７４　Ｓ７５　Ｓ７９　Ｓ８５　￥９９　Ｓ１０３　Ｓ１Ｏ８　ＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣ　ＴＧＣＧＴＧＣＴＴＣ　ＧＡＣＧＧＡＴＣＡＧ　ＧＴＴＧＣＣＡＧＣＣ　ＣＴＧＡＧＡＣＧＧＡ　ＧＴＣＡＧＧＧＣＡＡ　ＡＧＡＣＧＴＣＣＡＣ　ＧＡＡＡＣＡＣＣＣＣ　４　５　８　３　７　５　６　２　４　７　１２　７　８　１１　８　６　Ｓ１８０　Ｓ１８１　Ｓ１８７　Ｓ１９１　Ｓ１９４　Ｓ１９７　Ｓ２００　ＡＡＡＧＴＧＣＧＧＣ　ＣＴＡＣＴＧＣＧＣＴ　ＴＣＣＧＡＴＧＣＴＧ　ＡＧＴＣＧＧＧＴＧＧ　ＡＡＡＧＧＧＧＴＣＣ　．ｒＧＧＧＧＡＣＣＡＣ　ＴＣＴＧＧＡＣＧＧＡ　５　９　４　６　１０　６　７　９　１２　６　９　１１　９　７　１～３ｚ：樱桃番茄品种编号（表１）｝Ｍ；ＧｅｎｅＲｕｌｅｒ　１　ｋｂ　ＤＮＡ　Ｌａｄｄｅ￣　图１引物￥５６对樱桃番茄基因组扩增的ＲＡＰＤ谱带图　Ｆｉｇ．１　Ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｏｆ　Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｒｉｍｅｒ　Ｓ５６　由图２可见，遗传距离Ｄ值在０．３３水平上，３２　野生品种：樱桃番茄Ｐ　一　和樱桃番茄Ａ。，它们果皮　也为红色。　个樱桃番茄品种聚成３簇，分别为Ａ、Ｂ、ｃ类。Ａ　类有１４个品种，包括果皮全部为黄色和少数红色品　种，它们的果形较大，其中包括３个中国台湾黄色品　种（樱桃番茄１６　１３、樱桃番茄１６—１４和樱桃番茄　３　讨　论　３．１樱桃番茄ＤＮＡ的提取质量　黄洋梨）、１个韩国黄色品种（樱桃番茄金保）和１个　ＤＮＡ提取和纯化与获得一定数量的质量足够　好的ＤＮＡ样品是进行限制性酶切、分子杂交以及　ＰＣＲ扩增的首要步骤。樱桃番茄含有较高的色素和　多糖杂质，运用本试验改进的ＣＴＡＢ法能有效去除　这些杂质。同时，为提高ＤＮＡ得率和纯度，采用樱　印尼黄色品种（樱桃番茄１６—８）。Ｂ类有１６个品种，　果皮全部为红色，包括２个日本红色品种（樱桃番茄　Ｐ　。和樱桃番茄Ｐ　），另外樱桃番茄Ｐ。．　由樱桃番茄Ｐ。　选育，两者聚在一起，相似系数为０．９６６　２５　遗传距　离Ｄ值在０．２５水平上，Ｂ簇又可分为３小类，樱桃　番茄Ｐ。．　和樱桃番茄Ｐ。为一类，以色列品种以色列　桃番茄幼嫩叶片（处于延伸的细胞果胶含量较少）。　此外，试验中应使用液氮迅速研磨材料，并立即加　入６５　Ｃ预热的提取缓冲液，以便及时钝化组织中的　樱桃番茄单独为一类，其他聚为一类。ｃ类是２个半　维普资讯 http://www.cqvip.com

６２　福建农业学报　第２１卷　ＤＮＡ酶活性。试验发现，在缓冲液中加入抗褐变物　质琉基乙醇，溶液浓度１　能有效地防止酚化合物的　褐变。　鹰　毒　菇　遗传距离　图２　３２个樱桃番茄材料的聚类图　Ｆｉｇ．２　Ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｂｙ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｆｏｒ　３２　Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ　ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ　ｖａｒ．ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ　３．２樱桃番茄品种的遗传多样性　樱桃番茄近些年从国外引入后，经过演化和人　工栽培，形成了遗传多态性较为广泛的地方群体品　种，具有丰富的基因基础，分析它们的遗传差异有　助于樱桃番茄的遗传改良和育种工作。但遗憾的是　至今仍然没有较为详尽的亲缘关系系谱资料。我们　根据ＲＡＰＤ位点对３２个国内外樱桃番茄品种基因　型进行了聚类分析，绘出了亲缘关系树状图。这些　材料之间差异明显，有广泛的遗传多样性。根据研　究结果，明显能将野生种从栽培种中分开，说明野　生种中存在可供用于樱桃番茄遗传改良的特异基因　类型。我们能将不同果皮颜色分开，印证了传统形　态学分类框架的正确性，而且对传统形态学分类加　以补充细化，能将农艺性状有差异而在ＤＮＡ水平匕　没有显现出来的聚在一起。　参考文献：　［１］方宜钧，黄育元，陈启锋，等．若干水稻品种（组合）的等位　酶和ＲＡＰＤ遗传分析ｌＪ］．中国农业科学．１９９９．３２（２）：１—　２．　［２］施永泰．边红武．韩凝．等．中国江、浙地区栽培大麦遗传资源　的ＲＡＰＤ研究［Ｊ］．作物学报，２００４，３０（３）　２５８・２６５．　［３］王得元，彭世清．刘志昕，等．辣椒基因组ＤＮＡ提取与ＲＡＰＤ　分析口］．江西农业大学学报．１９９８，２Ｏ（２）；１８０—１８３＋　［４］史锋，张耀洲．曾广文．栽培大豆品种问遗传关系的ＲＡＰＤ研　究［Ｊ］．浙江农业大学学报，１９９８，２４（６）；６３３—６３６．　［５］罗军武，施兆鹏，沈程文，等．茶树种质资源遗传多样性的ＲＡＰＤ　分析［Ｊ］．作物学报，２００４，３０（３）　２６６—２６９．　［６］王得元，孪乃坚，邓义才．ＲＡＰＤ技术在奥星番茄种子纯度检　测鉴定中的初步研究［Ｊ］　广东农业科学．１９９９．３：１５—１６．　（责任编辑：林树文）