维普资讯 http://www.cqvip.com 天津医药２００７年２月第３５卷第２期 １１５ 失血性休克时细胞线粒体呼吸功能变化及中药防治研究 傅强崔乃杰 摘要目的：研究失血性休克时细胞线粒体呼吸功能变化及防治方法。方法：将２４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机均分为假手 术组、模型组和治疗组，模型组和治疗组颈动脉快速放血造成失血性休克模型，维持１．５ ｈ后复苏。假手术组动物除不 放血及复苏外其他操作同模型组。治疗组于实验前２ ｄ开始及放血前４ ｈ各给予静脉注射中药益气活血解毒汤１ ｍ ｇ 干预治疗。于复苏后４ ｈ处死动物，测定肝匀浆内毒素和线粒体呼吸功能。结果：与假手术组比较，模型组肝脏内毒素 水平明显升高（Ｐ＜０．０１），而Ⅲ态呼吸耗氧速率（ＲＳ３）和呼吸控制率（ＲＣＲ）下降显著（Ｐ＜０．０１）。与模型组比较，治疗组 肝脏内毒素的升高及ＲＳ３、ＲＣＲ的降低明显减轻（Ｐ＜０．０５）。结论：大鼠失血性休克复苏后肝线粒体呼吸功能严重受 损，以ＲＳ３下降为主，中药益气活血解毒汤治疗可明显改善线粒体功能。 关键词休克，出血性线粒体呼吸功能试验中草药 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂ ｏｎ Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ Ｓｈｏｃｋ ｉｎ Ｗｊｓｔａｒ Ｒａｔｓ ＦＵ Ｑｉａｎｇ，ＣＵＩ Ｎ ｉｅ ＳｕｒｇｅｒｙＩｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｕｎｉｔ，ＴｉａｎｊｉｎＮａｎｋａｉＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００］００，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂｓ ｏｎ ｍｉｔｃｏｈｏｎｄｒｉａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｓｈｏｃｋ ｉｎ ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｗｅｎｔｙ－ｆｏｕｒ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ，ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｆａｌｓｅ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂｓ ｔｅｒａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ．Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｓｈｏｃｋ ｍｏｄｅｌ，Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｒａｗｎ ｂｌｏｏｄ ｆｒｏｍ ｃａｒｏｔｉｄ ａｒｔｅｒｙ ｒａｐｉｄｌｙ ｎａｄ ｗｅｒｅ ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｄｅ １．５ ｈｏｕｒｓ ｌａｔｅｒ．Ｔｈｅ Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｅｄｕｔａｎｇ ｗａｓ ｇｉｖｅｎ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｌｙ ｉｎ ｔｅｒａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ．Ａｌｌ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｋｉｌｄｅ ４ ｈｏｕｒｓ ａｆｔｅｒ ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｔｈｅ ｈｖｅｒ ｗａｓ ｄｉｓｓｅｃｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ． Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｆａｌｓｅ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ Ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ，ｂｕｔ ｔｈｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ８Ｌｌｇｅ ＩＩＩ（ＲＳ３）ａｎｄ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｒａｔｉｏ（ＲＣＲ）ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｌｉｔｔｌｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｒｔｅａｔｍｅｎｔ ｎａｄ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｍｉｔｃｏｈｏｎｄｒｉａｌ ｅｒｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏ ｒａｔ ｌｉｖｅｒ Ｗａｓ ｉｎｓｕｌｔｅｄ ｓｅｖｅｒｅｌｙ ｄｕｒｉｎｇ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｓｈｏｃｋ，ｍａｉ￣ｙ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｉｎｇｉｆｃａｎｔ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｏｆ ＲＳ３．Ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂｓ （Ｙｉｑｉｈｕｏｘｕｅｊｉｄｅｕｔｎａｇ）ｃａｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ｈｔｅ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｉｎ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｓｈｏｃｋ ｉｎ ｒａｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｓｈｏｃｋ，ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｔｅｓｔｓ ｄｒｕｇｓ，Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ 急性大量失血所引发的失血性休克是外科临 １．２方法 床常见急症之一，多见于外伤及原有重要器官器质 １．２．１主要仪器及试剂ＣＲ２１高速冷冻机（日立公司），ＳＰ－２ 性疾病者。尽管充分复苏，若失血量大或延迟复苏 溶氧测定仪（上海植生所），水平式记录仪（四川仪表厂）。鲎 常可诱发多种急性器官损害（如急性肾功能衰竭）． 试剂盒（定量）购自上海市医学化验所和上海生物制品研究 直至出现多脏器功能障碍综合征（ＭＯＤＳ）和死亡． 所。鱼藤酮、腺苷二磷酸（ＡＤＰ）为Ｓｉｇｍａ公司产品。蔗糖、甘 迄今为止对这一过程的确切原因尚不十分明确【”。 露醇、琥珀酸等为国产ＡＲ级试剂。治疗中药为益气活血解 根据祖国医学“气随血脱”的理论圆，结合现代医学 毒方，主要组分为黄芪、红参、当归、麦冬、赤芍和连翘等，用 水煮醇沉法制成可供静脉注射用１：１（ｗ：ｖ）针剂。 有关线粒体氧化磷酸化产能功能的认识，笔者进行 １．２．２模型制备按文献【３避行。所有动物腹腔注射３％戊 了一组失血性休克动物实验研究，报告如下。 巴比妥钠（３５ ｍｇ／ｋｓ）麻醉后，全身肝素化（２５０ Ｕ／ｋｇ），行一侧 颈动脉插管，插管外接三通，供观察血压及放血用。模型组 １材料与方法 和治疗组动物经插管快速放血。至平均动脉压３０～３５ ｍｉｎ Ｈｇ １．１实验动物及分组Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只（购白天津药物研 （１ ｍｉｎ Ｈｇ＝０．１３３ ｋＰａ），维持该水平１．５ ｈ，然后回输失血，并 究所，合格证号：医动字２００４０２０），体质量（２１０±１０）ｇ，雌雄 天津市科委基金资助项目（项目编号：９５３１０２９１１） 不拘，实验前１ ｄ禁食，自由饮水，随机均分为模型组、假手 作者单位：３００１００天津南开医院外科重症监护病房（傅强）； 术组和中药治疗组（治疗组），每组８只。 天津第一中心医院急救医学研究所（崔乃杰） 维普资讯 http://www.cqvip.com １１６ Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｅｄ Ｊ，Ｆｅｂ ２００７，Ｖｏｌ ３５ Ｎｏ ２ 用３０ ｍｉｎ左右补充等容量林格液。假手术组动物除不放血 及复苏外其他操作同模型组．治疗组于实验前２ ｄ开始及放 血前４ｈ各静脉注射中药１ ｍＩ＿／ｋｇ。 １．２．３检测项目及方法所有动物于复苏后４ ｈ处死，取肝 脏。一部分于无热源条件下制成肝匀浆，供测内毒素；一部分 进行线粒体呼吸功能测定Ⅲ态呼吸耗氧速率（ＲＳ３）、ＩＶ态呼 祖国医学认为血为水谷精微变化而成，认为中 焦受气，取汁变化而赤，是谓血。认为血生化于脾， 藏于肝，统于心，血与气相互为用，气为血帅，血随 气行。失血过多可转为“气虚”或“虚寒”，以致气随 血脱，阴阳离决。《医方考・气门》说“气化即物生，气 变即物易，气盛即物壮，气弱即物衰，气正即物和， 气乱即物病，气绝即物死”。说明气与生命的关系至 为密切［８】。现代医学认为新陈代谢是生命的基本特 吸耗氧速率（ＲＳ４）和呼吸控制率（ＲＣＲ）。（１）内毒素测定方法 采用鲎试剂基质显色法［４１。吸取样品于无热原的２４孔板中． 每孔１００ ｉＬＬ，每样品３个复孔，加入鲎试剂５Ｏ 混匀，３７ ℃水浴３ ｗｉｎ。取出后加入０．５％亚钠０．５ ｍＬ．混匀后加入 ０．ｏ５％氨基磺酸铵０．５ ｍＬ混匀。加入０．ｏ５％萘乙二胺０．５ ｍＬ 混匀，于波长５４５ ｎｍ比色读数。（２）肝线粒体呼吸功能测定 方法按照参考文献【５】进行。制备大鼠肝脏线粒体悬液，用 Ｌｏｗｒｙ法测定线粒体蛋白浓度，在反应体系中加入反应物，用 溶氧测定仪测定及记录耗氧率（ＲＳ３、ＲＳ４）。ＲＳ３、ＲＳ４单位以 每毫克蛋白每分钟所消耗氧的纳摩尔数表示。耗氧速率＝氧 饱和度Ｘ单位时间耗氧格数Ｘ反应体积ｘ（２／￣标格数），呼吸 控制率（ＲｃＲ）：ＲＳ３／ＲＳ４。 １．３统计学方法采用ＳＰＳＳ １０．０统计软件进行分析，计量 数据以均数±标准差（互±ｓ）表示，采用方差分析，组间比较用 ｑ检验，以Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。 ２结果 模型组和治疗组失血复苏后肝脏内毒素定量 明显高于假手术组（Ｐ＜０．０１），而且ＲＳ３下降，模型 组与假手术组差别有统计学意义（Ｐ＜０．Ｏ１），ＲＣＲ亦 明显降低，模型组和治疗组与假手术组差别有统计 学意义（Ｐ＜０．０１），治疗组ＲＳ３、ＲＣＲ均较模型组高 （Ｐ＜０．０１），见表１。 表１各组动物肝脏内毒素水平及肝脏 线粒体呼吸功能变化 （互±ｓ） ｎ（ 蕊）（ｍ０１． 。 ）（ｍ０１． 。 。）ＲｃＲ ３讨论 失血性休克及其复苏的病生理过程极为复杂． 其所产生的组织缺氧及再灌注损害和进一步引起 的肠道细菌及内毒素易位，使机体遭受氧自由基及 内毒素等多种因素打击导致组织损伤及细胞功能 障碍［６，７１ 征。线粒体是细胞中独特的细胞器，能将食物吸收 消化后的物质与呼吸摄人的氧气结合进行氧化磷 酸化反应，为机体提供９０％以上的能量。此与祖国 医学提出的“肾中先天的精气，脾胃所受的水谷精 气及肺吸人的大气三部分结合成元气的理论极为 相似。故可以认为线粒体的功能可能是人体“气”的 一个重要组成部分 。 本实验结果表明大失血复苏后。模型组动物出 现血内毒素水平升高，肝线粒体ＲＳ３、ＲＣＲ均明显 降低，而ＲＳ３是线粒体在耗氧条件下将ＡＤＰ磷酸 化为ＡＴＰ的过程．表明大出血后由于内毒素血症及 缺血再灌注损害等因素导致机体肝脏线粒体摄氧 能力下降，内呼吸功能障碍，机体将进一步出现能 量代谢障碍，若不能有效干预最终将导致组织脏器 功能衰竭，出现中医所谓“急性气脱”和“亡阳证”。 而中药治疗组动物较模型组血内毒素水平下降．肝 线粒体ＲＳ３、ＲＣＲ显著升高，表明益气活血解毒汤 可有效地提高失血性休克时肝线粒体的摄氧能力． 改善机体的能量代谢。益气活血解毒汤黄芪、当归 为当归补血汤《内外伤辨惑论》，补气重于养血，取 阳生阴长之意；人参、麦冬是为生脉饮《内外伤辨惑 论》，在救阴的同时，以防阴竭阳无所附之散越［】ｏｌ。赤 芍活血、连翘清热解毒。该方具有清除氧自由基、降 低细胞脂质过氧化反应、拮抗内毒素及提高细胞耐 缺氧功能等作用，用于危重病急救效果满意．本组 实验表明益气活血解毒汤治疗可明显改善线粒体 呼吸功能，有进一步深入研究并推广应用于临床救 治失血性休克患者的前景。 参考文献 ［１】１ 杨峰，陈斌．严重创伤后多器官功能障碍综合征的病理生理变化 叨．国外医学．夕 科学分册，２００５，３２（２）：１２６－１２９． ［２１黄海龙．关于中医理论中“气”的几个问题田．中国医药学报， １９９１，（６）：８一ｌＯ． 【３】蒋建新，陈惠新，有芳，等．失血性休克后内源性内毒素在组织 及循环中的分布及其对器官功能的影响叨．医学杂志， 维普资讯 http://www.cqvip.com 天津医药２００７年２月第３５卷第２期 １９９８，２３（２）：１３１—１３２． ［４】蒋建新，陈惠孙，有芳，等．鲎变形细胞裂解物基质显色法定量 测定组织匀浆内微量内毒素的含量及其应用叨．第三军医大学 学报．１９９７，１９：Ｓ４ｏ－Ｈ４２． 【５】ＢａｕｍａｒｍＭ，ＢｅｎｄｅｒＥ，ＳｔｏｍｍｅｒＧ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆｗａｌＴｎ ａｎｄ ｃｏｌｄ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｏｎ ｍｌｔｃｈｏｎｄｉｏｒａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｂｒａｉｎ，ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ叨． Ｍ０ｕ Ｃｏｌｌ Ｂｉｃｈｅｒａ，１９８９，８７（ｏ２）：１３７－１３９． 【６】ＢｒｅａｌｅｙＤ，ＢｒａｎｄＭ，ＨａｒｇｒｅａｖｅｓＩ，ｅｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎｍｉｔｏ－ ｌｌ７ 前炎症细胞因子的影响【Ｊ】．中国危重病急救医学，２０００，１２（６）： ３４６－３４９． 【８】张茂林，张六通，邱幸凡，等．论线粒体与中医“气”的关系叨．中国 中医基础医学杂志，２００１。７（４）：６０—６１． 【９】毕铭华，张淑文，王宝恩等．内毒素血症时大鼠肝细胞线粒体损 伤及其机制的研究叨．中国病理生理杂志，２００３，１９（２）：２６６－ ２６８． 【１０】赵伟康，周志乐，金国琴，等．老年期肾阴阳虚损大鼠的线粒体能 量代谢及其机制的研究叨．中国中医基础医学杂志，２００１，７ （３）：３１－３４． ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ａｎｄ ｏｕｔｃｏｍｅ ｏｆ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ叨． Ｌａｎｃｅｔ，２００２，３６０（２０）：２１９－２２３． 【７】萧正伦，黄海鹭，徐远达，等．低剂量内毒素对低血容量性休克兔 （２００６－０４．２１收稿２００６—０８—１２修回） 腕管综合征３。例Ｉ临床与神经电生理分析李关键词腕管综合征电生理学神经传导 短篇与病例报告 冰籍延华 腕管综合征（Ｃａｒｐａｌ ｔｕｎｎｅｌ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＣＴＳ）是指正中神经 在腕管内受嵌压后而引起手指感觉异常为主要特征的一种 症候群。笔者对我院２００３年１月—２００５年１月诊治的３Ｏ 例ＣＴＳ患者的临床特点进行分析讨论。 １资料与方法 碍。它与腕管的解剖结构特点密切相关ｌ２】。腕管是由８块腕骨 与横架其上的腕横韧带共同围成的骨性纤维性隧道样结构。 正中神经是唯一与其他９条肌腱一同通过腕管的神经结构。 任何原因导致急性或慢性腕管内压力升高均可使正中神经 受到挤压发生功能障碍，引发腕管综合征。早期诊治可以避 免残疾发生。 １．１ 一般资料本组临床症状、体征符合ＣＴＳ诊断标准【ｌ１的 神经传导速度测定在明确腕管综合征诊断方面具有高 度敏感性和高度特异性，敏感性为４９％～８４％，特异性等于或 ３Ｏ例患者，女２５例，男５例，年龄２６～６４岁，平均年龄 （４８．６±８．７）岁。病程５个月～２年。其中双侧病变９例，单侧 病变２ｌ例。临床表现均有不同程度的腕以下手指麻木疼痛。 高于９５％。正中神经感觉传导速度敏感性高于正中神经运动 传导速度。腕以下段正中神经感觉和运动纤维传导减慢是典 型表现，伴有运动神经传导远端潜伏期延长【ｌ１。 目前认为，神经电生理检查是诊断ＣＴＳ的重要手段嘲。本 组３Ｏ例患者中的异常表现与腕管综合征的电生理诊断依据 相一致。笔者发现早期腕管综合征患者仅表现为正中感觉神 感觉异常，夜间及劳累后加重。甩手和局部按摩可使症状有 所缓解。 １．２检查方法采用美国产Ｎｉｃｏｌｅｔ Ｖｉｋｉｎｇ肌电诱发电位仪 检测。所有患者均进行常规的正中神经、尺神经运动和感觉 传导速度测定，计算运动和感觉神经传导速度及正中神经运 动传导远端潜伏期，观察其波幅。判定标准正常值参照北京 大学第一附属医院神经电生理室及《实用肌电图学》关于正 中神经、尺神经感觉和运动传导的正常参考值。 １．３结果 本组３Ｏ例正中神经电生理检查异常率为 经传导速度ＳＣＶ下降，诱发电位波幅降低，而正中神经运动 神经很少受累，此期患者经过治疗，功能很快恢复。随着病情 的发展，运动神经远端潜伏期延长，ＭＣＶ开始下降，临床症 状逐渐加重，治疗恢复较慢且易复发。所以神经电生理检查 不仅对诊断腕管综合征有重要价值。而且也是判断腕管综合 征预后的重要指标。 参考文献 【１】汤晓芙．神经系统临床电生理学（下）【Ｍ】．北京：人民军医出版 社。２００２：３０９—３１１． １００％，其中正中神经感觉神经传导速度（ＳＣＶ）异常２８例。占 ９３．３％，感觉神经传导波幅降低２１例，占７０．Ｏ％，感觉神经传 导诱发电位未引出４例，占１３．３％。正中神经运动神经传导 速度（ＭｃＶ）异常２２例，占７３．３％，运动神经传导远端潜伏期 延长２４例，占８０．Ｏ％。同侧尺神经检查，感觉神经传导速度。 运动神经传导速度均正常，同侧尺神经运动神经传导。远端 潜伏期正常。 ２讨论 【２】卢祖能，曾庆杏，李承晏，等．实用肌电图学【Ｍ】．北京：人民卫生 出版社。２ＯＯＯ：８７８－８８０． 【３】任朝辉，雷青．腕管综合征的电生理诊断叨．中国现代医学杂志， ２００４，１４（５）：１０２． ＣＴＳ是嵌压性周围神经病中最常见的一种。早期症状包 括手部麻木、刺痛、感觉异常等 晚期可导致严重手功能障 （２ＯＯ６－０２—１３收稿２００６－０８－０７修回） 作者单位：３００１５０ 天津市第四中心医院神经内科
