慢性乙肝患者血清HBeAg、HBV-DNA定量与ALT水平的关系及其临床意义

Ｍｏｄ　Ｄｉａｇｎ　Ｔｒｅａｔ　现代诊断与治疗２００７　Ｍａｙ　１８（３）　慢性乙肝患者血清ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ．ＤＮＡ定量与ＡＬＴ水平的关系及其临　床意义　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＨＢｅＡｇ　ｉ　ＨＢＶ—ＤＮＡ　ａｎｄ　ＡＬＴ　Ｌｅｖｅｌ　ｉｎ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｃｈｒｏｎｉｃ　Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ａｓ　ｗｅｌｌ　ａｓ　Ｉｔｓ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　江志兰，周少雄，谢伟贤，何　山，邓爱红，卢国为（佛山市第二人民医院检验科，广东佛山５２８００）　摘要：目的　比较慢性乙肝患者血清ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与ＡＬＴ之问的关系并分析其临床意义。方法　采用时间分　辨免疫荧光分析法检测６２８例患者血清ＨＢｅＡｇ含量，同时采用荧光定量聚合酶链反应法（ＦＱ．ＰＣＲ）检测ＨＢＶ．ＤＮＡ含　量，并对患者血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）水平作统计分析。结果ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阳性、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ—　ＤＮＡ定量阳性率（９４．７８％）显著高于ＨＢｓＡｇ阳性、抗一ＨＢｅ阳性、抗一ＨＢｃ阳性组（３１．８２％）和ＨＢｓＡｇ阳性、抗一ＨＢｃ阳　性组（３５．５１％，Ｐ＜０．０１）；ＨＢｅＡｇ含量＞４．０Ｎｃｕ／ｍｌ患者中血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量＞１０　组的阳性率（６７．０３％）显著高于　ＨＢＶ・ＤＮＡ含量１０　组（４４．４５％）和ＨＢＶ－ＤＮＡ含量１０　组（７．６９％），而ＨＢｅＡｇ阴性患者ＨＢＶ．ＤＮＡ检出率仍较高；　ＨＢＶ・ＤＮＡ（＋）组与ＨＢＶ．ＤＮＡ（一）组的ＡＬＴ异常率差异显著（Ｐ＜０．０１），ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）组之间ＨＢＶ・ＤＮＡ含量高低与　ＡＬＴ无相关。结论慢性乙肝患者血清中ＨＢｅＡｇ含量与ＨＢＶ．ＤＮＡ含量有明显的相关性，ＨＢｅＡｇ阴性不能代表病毒停　止复制；肝功能状态与血清ＨＢＶ．ＤＮＡ含量有关。　关键词：乙型肝炎病毒；乙型肝炎ｅ抗原定量；ＨＢＶ．ＤＮＡ；荧光定量聚合酶链反应；丙氨酸氨基转移酶　中图分类号：Ｒ５１２．６２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－８１７４（２００７）０３－０１４９－０２　ＨＢＶ病毒为具有多种蛋白抗原并能导致机体产　１．２．２血清ＨＢＶ．ＤＮＡ含量检测　采用ＦＳＥＹ－ＰＣＲ・　生多种抗体的ＤＮＡ病毒，ＨＢＶ感染后，患者在临床表　ＡＢＩ７３０００　ＦＱ．ＰＣＲ仪。应用荧光定量聚合酶链反应法　现方面的差异很大，可以表现为无症状携带者、急性肝　（ｒＱ．ＰＣＲ）检测慢性乙肝患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量，试　炎、慢性肝炎、重型肝炎、肝硬化及肝癌等多种疾病状　剂由广州中山大学达安基因公司提供，每批ＰＣＲ试验　态¨Ｊ。目前对于人体内ＨＢＶ感染的乙肝活动期及抗　均做阴、阳性对照，临界阳性对照，并严格按照说明书　病毒治疗效果的观察多使用乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）　操作。测定结果进行对数转换，正常参考值＜１０　ｃｐ／　血清学转换与ＨＢＶ．ＤＮＡ阴转等指标，本文定量测定　ｍｌ（拷贝／ｍ１）。　慢性乙肝患者血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ．ＤＮＡ及丙氨酸氨　１．２．３肝功能指标测定　仪器为Ｏｌｙｍｐｕｓ　ＡＵ６４０全　基转移酶（ＡＬＴ）水平，现将结果报告如下。　自动生化分析仪，试剂为原装配套试剂盒，ＡＬＴ正常参　ｌ　材料与方法　考值５￣４０Ｕ／Ｌ。　１．１一般资料６２８份血清选自我院肝科门诊患者，　１．３统计学处理测定数据以　±　表示，计量资料　男４２０例，女２０８例，年龄２—７５岁。病例诊断符合　以％表示，组间比较用ｔ检验和ｘ　检验。　１９９５年（北京）第五次全国传染病与寄生虫病学术会　２结果　议讨论修订的病毒性肝炎防治方案中的诊断标准。并　２．１　ＨＢＶ．ＤＮＡ含量与乙肝标志物（ＨＢＶ－Ｍ）的关系　经临床及实验室多方面检查均已排除甲型肝炎　见表ｌ。　（ＨＡＶ）、丙型肝炎（ＨＣＶ）、丁型肝炎（ＨＤＶ）、戊型肝　２．２不同ＨＢＶ．ＤＮＡ含量与ＨＢｅＡｇ含量及ＡＬＴ关系　炎（ＨＥＶ）等病毒感染及自身免疫性肝炎、肝癌。　见表２。　１．２检测方法　ＨＢｅＡｇ含量＞４．０　Ｎｃｕ／ｍｌ患者中，ＨＢＶ－ＤＮＡ含　１．２．１　血清ＨＢｅＡｇ定量采用上海新波生物技术有　量１０　ｃｐ／ｍｌ组的阳性率（９．００％）显著低于其余２　限公司Ａｎｙｔｅｓｔ　２０００时间分辨免疫荧光分析系统（ＴＲ－　组（４４．４５％，６７。０３％）；ＨＢｅＡｇ含量０．０４－４．０Ｎｃｕ／ｍｌ　ＦＩＡ）及配套设备，使用该公司提供的定量试剂盒。批　的患者中，有ｌ７例ＨＢＶ－ＤＮＡ含量＜１０　，阳性率（６，　内两点定标，批间六点定标，测定范围０．０３—８．　８８％）显著低于其余３组（３２．００％、３３．３３％、２５，　００Ｎｃｕ／ｍｌ，检测ＨＢｅＡｇ＞０．４０Ｎｃｕ／ｍｌ为阳性，操作步　２８％）；ＨＢｅＡｇ含量＜０．０４Ｎｃｕ／ｍｌ患者中，ＨＢＶ－ＤＮＡ　骤严格按说明书进行。　含量＜１０　组的阳性率（９３．１２％）显著高于其余３组　维普资讯 http://www.cqvip.com

ｌ￣ｌｏｄ　Ｄｉａｇｎ　Ｔｒｅａｔ　现代诊断与治疗２００７　Ｎａｙ　１８（３）　（５９．ｏｏ％、２２．２２％、７．６９％）。　３讨论　表Ｉ　ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与ＨＢＶ　Ｍ的关系［１３（％）】　注：ＨＢｅＡｇ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ定量阳性率与其它两组比较，・：Ｐ＜０．Ｏｌ　表２不同ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与ＨＢｅＡ￣含量及ＡＬＴ关系　ＨＢＶ—ＤＮＡ含量　不同ＨＢｅ，Ａｇ含量患者［Ｎｃｕ／ｍｌ，ｎ（％）］ＡＬＴ＞４２Ｕ／Ｌ　（ｅｐ／，￣　＜ｌｏ３　２４７　２３ｏ（９３．１２）‘　１７（６．８８　‘　２１．３２△　ｌｏ３～　１００　５９（５９．Ｏ０）　３２（３２．Ｏ０）　９（９．Ｏ０）‘　５０．１３　１ｏ５～　１５３　３４（２２．２２）　５１（３３．３３）　６８（４４．４５）　６５．１２　＞ｌｏ７　１８２　１４（７．６９）　４６（２５．２８）　１２２（６７．（１３　４８．６５　注：与其它各组比较，・：Ｐ＜０．Ｏｌ；△：Ｐ＜０．Ｏｌ　近年来，ＨＢＶ病毒标志物定量分析的价值受到越　来越多研究者的重视，研究显示，ＨＢＶ病毒在肝细胞　的复制水平与各种临床疾病状态之间存在一定的联　系，乙肝不同临床阶段其血清ＨＢＶ．Ｍ和ＨＢＶ—ＤＮＡ水　平存在差异…。ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ—ＤＮＡ的定量检测是乙　肝动态观察的两个特异性指标，是抗病毒药物疗效观　察的主要依据。我们用时间分辨免疫荧光技术定量测　定慢性乙肝患者血清ＨＢｅＡｇ含量和应用ＦＱ—ＰＣＲ检　测慢性乙肝患者血清ＨＢ￣一ＤＮＡ含量。本次统计结果　显示，ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗一ＨＢｃ（＋）即大三　阳组中ＨＢＶ—ＤＮＡ定量阳性率高达９４．７８％，与文献报　道接近　，明显高于ＨＢｓＡｇ（＋）、抗一ＨＢｅ（＋）、抗一　ｎＢｅ（＋）（即小三阳）组的３１．８２％和ＨＢｓＡｇ（＋）、抗．　ＨＢｃ（＋）组的３１．５ｌ％（Ｐ＜０．Ｏ１），说明ＨＢｅＡｇ与　ＨＢＶ—ＤＮＡ存在显著的相关性，均为ＨＢＶ传染性的极　好指标。大三阳组ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＞１０　的阳性率为　４８．７０％，明显高于小三阳组（３．７９％）和ＨＢｓＡｇ（＋）、　ＨＢＣ—Ａｂ（＋）组（５．４８％，Ｐ＜０．Ｏ１），提示ＨＢｅＡｇ阳性　组中ＨＢＶ—ＤＮＡ含量明显高于ＨＢｅＡｇ阴性组。而且　大三阳组ＨＢＶ—ＤＮＡ含量呈现病毒载量递增的趋势　（见表１），应引起临床关注。在小三阳组和ＨＢｓＡｇ　（＋）、抗一ＨＢｃ（＋）组中（即ＨＢｅＡｇ阴性）仍有部分患　者ＨＢＶ—ＤＮＡ定量阳性而具有传染性，表明ＨＢｅＡｇ消　失或抗一ＨＢｅ或抗．ＨＢｃ出现不能代表病毒停止复制，　只是复制水平低而已，这些病人中部分可能伴有ＨＢＶ　前ｃ区变异，这种变异导致不能产生ＨＢｅＡｇ，但不影　响ＨＢＶ的复制和传播　Ｊ，因此对ＨＢｅＡｇ阴性而ＨＢＶ—　ＤＮＡ水平较高的携带者应予重视。　从表２中可见，当患者ＨＢｅＡｇ阳性时ＨＢＶ—ＤＮＡ　基本也为阳性，ＨＢｅＡｇ含量＞４．ＯＮｃｕ／ｍｌ组中患者血　清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＞１０　组的阳性率（６７．０３％）显著高　于ＨＢＶ—ＤＮＡ含量ｌＯ　组（４４．４５％）和ＨＢＶ—ＤＮＡ含　量ｌ０　组（７．６９％），而ＨＢｅＡｇ含量＜０．０４Ｎｃｕ／ｍｌ组　中患者血清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＜１０　组的阳性率（９３．　１２％）显著高于其余组（５９．００％，２２．２２％，７．６９％）。　结果表明ＨＢｅＡｇ含量的高低与ＨＢＶ—ＤＮＡ含量有一　定的相关性，高浓度的ＨＢｅＡｇ患者血清中ＨＢＶ—ＤＮＡ　平均含量也较高，ＨＢｅＡｇ确实是反映病毒复制的良好　指标。但有ｌ７例ＨＢｅＡｇ阳性患者ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＜　ｌ０　，可能是患者体内病毒低水平复制而无法检出，也　有ｌ４例患者ＨＢｅＡｇ阴性而血清ＨＢＶ　ＤＮＡ含量＞　ｌ０　，提示不能只根据ＨＢｅＡｇ来判断病毒的复制状态，　ＨＢｅＡｇ阴性并不意味着病毒复制停止，应结合ＨＢＶ—　ＤＮＡ含量综合判断。　有观点认为ＨＢＶ—ＤＮＡ含量的高低反映了病毒复　制的强弱，病毒的活跃复制是启动或激发肝脏组织炎　症的因素，并与肝脏组织炎症程度有关　ｊ。国内关于　ＨＢＶ—ＤＮＡ定量与肝功能的关系的报道各不相同，许　多报道认为ＨＢＶ—ＤＮＡ含量与ＡＬＴ、ＡＳＴ等无相关　性　．７ｊ。我们按ＨＮＶ—ＤＮＡ含量从高到低将乙肝患者　分组，统计结果表明ＨＢＶ—ＤＮＡ（一）组与ＨＢＶ—ＤＮＡ　（＋）组ＡＬＴ异常率的差异显著（见表２），但是ＨＢＶ—　ＤＮＡ（＋）组之间的比较，ＨＢＶ—ＤＮＡ（＋）组ＨＢＶ—ＤＮＡ　拷贝数与ＡＬＴ无显著相关性。以上结果提示在乙肝　患者的诊治过程中要采用不同的方案对症治疗，要辨　证地看待ＨＢＶ—Ｍ及ＨＢＶ—ＤＮＡ含量与肝脏病的关系。　参考文献：　［１］周小平．乙肝病毒基因定量分析的临床意义及应用价值［Ｊ］．中西医　结合肝病杂志，２００３，ｌ３（５）：３ｌ１．　［２］胡晓芳，孟冬亚．１０３１例乙肝病毒携带者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与血清标　志物的关系［Ｊ］．现代医学检验杂志．２００２．１７（４）：５５，　［３］吕娇健．孙惠玲，丁友法，等．乙型肝炎病毒ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与血清　标志物的关系【Ｊ］．上海医学检验杂志，２００１，１６（６）：３３９．　维普资讯 http://www.cqvip.com

Ｍｏｄ　Ｄｉａｇｎ　Ｔｒｅａｔ　现代诊断与治疗２００７　Ｍａｙ　１８（３）　・ｌ５ｌ・　［４］白艳丽，李建平．许玉仙．ＨＢＶ．ＤＮＡ与ＨＢＶ．ＴＲＦＩＡ检测结果比较分　析［Ｊ］．现代医学检验杂志，２００４，１９（５）：４４．　［５］曹莉，关引伟，李２２７．　［７］齐文杰．定量ＰＥＲ对乙型肝炎患者血清ＨＢＶ．ＤＮＡ的测定与分析　［Ｊ］．中西医结合肝病杂志，１９９８，８（２）：８１．　收稿日期：２００７－０１－０５　敏．乙型肝炎患者血清ＨＢｅＡｇ与ＨＢＶ．ＤＮＡ　含量的关系及其ｌ豳床意义［Ｊ］．中西医结合肝病杂志．２００３，１３（４）：　作者简介：江志兰（１９５９一）、女．广东台山人．本科、副主任技师．从　事临床免疫检验工作。　［６］蔡惠萍．慢性乙型肝炎ＨＢＶ—ＤＮＡ定量检测与病毒学标志物和肝损　伤程度的关系［Ｊ］．中国实用内科杂志，１９９８，１８（３）：１４９．　脑脊液免疫球蛋白测定的临床应用　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　ｉｎ　Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ　Ｆｌｕｉｄ　潘宝龙，孔繁林，张秀琴（玉溪市人民医院检验科．云南玉溪６５３１００）　摘要：目的　尝试以脑脊液中免疫球蛋白（Ｉｇ）含量及其与血清相应成份比值鉴别脑脊液性质，为各种脑部疾病提供诊断　和鉴别诊断依据。方法检测６５例各类脑病患者脑脊液及血清Ｉｇ含量，并将结果进行统计学处理。结果各类脑病脑　脊液Ｉｇ及其与血清相应成份比值存在一定的差异。以脑脊液中一定浓度的Ｉｇ设定范围，用本组资料衡量阳性预测值．　则各类脑病诊断阳性预测值分别为非炎性、病毒性（９７．Ｏ％）．癌性（９７．６％），化脓性（９６．８％），结核性（９４．２％）．多发性　硬化（７７．８％）。就脑脊液Ｉｇ与血清相应成份比值Ｄ而言，综合三种Ｉｇ比值设定范围，则各类脑病诊断阳性预测值分别　为非炎性（９２．５％），病毒性（８９．４％），化脓性（８７．５％），结核性（９２．５％）．多发性硬化（８８．９％）。结论多类脑病作出诊断和鉴别诊断。　关键词：脑脊液；免疫球蛋白；脑病　中图分类号：Ｒ４４６．１４　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－８１７４（２００７）０３－０１５１－０２　表１　ＣＳＦ　Ｉｇ测定结果（ｉ±ｓ．　Ｌ　Ｊ　脑部各类疾病　可能导致脑脊液中Ｉｇ含量的改变，通过对患者脑脊液中Ｉｇ含量检测及其与血清相应成份比值计算．在一定程度上司对　脑脊液（ＣＳＦ）检查是临床常用化验项目之一，国　内外对此报道很多，但利用免疫球蛋白（Ｉｇ）测定及其　与血清相应成份比值来鉴别ＣＳＦ性质还少见文献报　道。作者测定了６５例各类脑病患者ＣＳＦ的Ｉｇ含量，　并计算其与相应血清成份的比值，尝试鉴别ＣＳＦ性　质。现将结果报告如下。　１材料与方法　注：和相邻前者相比。・：Ｐ＜Ｏ．０５：＃：Ｐ＜Ｏ．０１　１．１研究对象标本均来自我院住院病人，其中非炎　表２　ＣＳＦ　Ｉｇ与血清相应成份比值（ｉ±ｓ）　性ＣＳＦ　ｌｌ例，病毒性ｌｌ例，癌性９例，化脓性１２例，　结核性１４例，多发性硬化８例。均经临床、病理及各　种医技检查确诊。检测ＣＳＦ　Ｉｇ的同时作同一患者空　腹静脉血Ｉｇ测定。　１．２方法Ａｕ５６０全自动生化仪３４０ｎｍ透射比浊法　测定，试剂由上海长征医学科学有限公司购得。　１．３统计学处理各组数据均经正态性矩形检验，其　Ｐ值均大于０．２，基本呈正态性分布。统计学方法为　方差分析和多样本均数的两两比较ｑ检验法。　２结果　２．１　６５例ＣＳＦ　Ｉｇ测定结果见表１。　注：和相邻前者相比。・：Ｐ＜０．０５；＃：Ｐ＜０．０１　２．３设定ＣＳＦ　Ｉｇ一定浓度范围对各类脑病诊断的阳　性预测值见表３。　２．４设定一定浓度范围ＣＳＦ　Ｉｇ与血清相应成份比值　对各类脑病诊断的阳性预测值３讨论　见表４。　２．２　ＣＳＦ　Ｉｇ与血清相应成份比值见表２。