中国现代普通外科进展［６】Ｕｐｐａｌａｐａｔｉ ＳＳ，Ｂｏｙｌａｎ ＪＤ，Ｓｔｏｌｔｚｆｕｓ Ｊ．Ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｐａ－ ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｂｌｅｅｄｉｎｇ ｐｅｐｔｉｃ ｕｌｃｅｒｓ：ａ ｃａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ，２００９，５４（３）：５９３－５９８． ２０１４年１月 第１７卷第１期 ［１１］于健春，葛军娜，唐云，等．胃、结直肠癌患者手术前后贫血状况 的多中心临床调查研究【Ｊ］．中华外科杂志，２０１１，４９（１）：５３—５６． ［１２］Ｃｈｅｕｎｇ ＦＫ，Ｌａｕ ＪＹ．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｓｓｉｖｅ ｐｅｐｔｉｃ ｕｌｃｅｒ ｂｌｅｅｄｉｎｇ ．【７］许新才，肖开提・阿不都卡德尔，张文斌，等．不同年龄段直肠癌患 叠 Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ ＡＩＩｌ＇２００９，３８（２）：２３１－２４３． 者临床病理学特征的研究【Ｊ】．中华胃肠外科杂志，２０１１，１４（１０）： ８１Ｏ一８１ １． ［１３］赵敏，赵光瑜，戴春宇，等．轻度低温对直肠癌根治术患者细胞免 疫功能的影响【Ｊ】．中华麻醉学杂志，２０１２，３２（１）：２４—２６． 【１４］商嵩山，升，张剑权，等．１０４例直肠癌患者淋巴结转移情况 及其相关因素分析【Ｊ】．山东医药，２０１０，５０（３５）：９－１１． 【８】王晶晶，陈康，徐万菊，等．直肠癌患者手术前后血清ＣＡｌ９９和 ＣＡ２４２水平测定及预后评价【ＪＪ．中华肿瘤防治杂志，２００９，１４ （２１）：１６６７—１６６８． ［１５］王瑜，于甬华，丛昌盛，等．直肠癌患者放疗期间情绪障碍与生活 质量的相关因素研究［Ｊ］．山东医药，２００８，４８（５）：７３—７４． （收稿日期：２０１３－０５—０３） 【９】于志奇，张畅，高显华，等．术前放化疗对中低位直肠癌患者手术及 术后并发症的影响 ．中华胃肠外科杂志，２０１２，１５（４）：３３２—３３５． 【１０］Ｖａｎ Ｌｅｅｒｄａｍ ＭＥ，Ｖａｎ ｄｅｒ Ｅｎｄｅ Ａ，Ｔｅｎ Ｋａｔｅ ＦＪ，ｅｔ ａ１．Ｌａｃｋ ｏｆ （本文编辑：周立波；技术编辑：张珂） ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｒｉｏｉｒ ｓｔｏｏｌ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｅｓｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｏｄｕｏｄｅｎａｌ ｕｌｃｅｒ ｂｌｅｅｄｉｎｇ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎ－ ｔｅｒｏ１．２００３。９８（４）：７９８—８０１． （上接第１１页） 异结合、降解，阻止ｍＲＮＡ的翻译，从而使靶基因的 ［３】Ｖｕｃｉｃ Ｄ，Ｄｉｘｉｔ ＶＭ，Ｗｅｒｔｚ ＩＥ．Ｕｂｉｑｕｉｔｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ａ ｐｏｓｔ－ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｔ ｔｈｅ ｅｄｇｅ ｏｆ ｌｉｆｅ ａｎｄ ｄｅａｔｈ［Ｊ】．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，２０１ １，１２（７）：４３９—４５２． 表达失活。ＲＮＡｉ主要在细胞质中发挥效应．无需克 服核膜屏障，并且具有高效、特异阻断靶基因表达 的作用，在功能基因组学中具有重要的地位．在治 ［４］Ｓｃｈｗｉｃｋａｒｔ Ｍ，Ｈｕａｎｇ Ｘ，Ｌｉｌｌ ＪＲ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｓｅ ＵＳＰ９Ｘ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｓ ＭＣＬ１ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｕｍｏｕｒ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ［Ｊ】．Ｎａｔｕｒｅ， ２０１０，４６３（７２７７）：１０３－１０７． ［５］Ｌｕｉｓｅ Ｃ，Ｃａｐｒａ Ｃ，Ｄｏｎｚｅｌｌｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎ ａｔｌａｓ ｏｆ ａｌｔｅｒｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ 疗肿瘤方面逐渐被报道【１３］。慢病毒载体具有转移基 因片段容量大、感染效率高、不易引发宿主免疫反 应、转基因可以持续而高效表达等优点。本研究利 用慢病毒介导的ＲＮＡｉ技术敲除结肠癌细胞ＳＷ６２０ 的靶基因ＵＳＰ９Ｘ，探讨下调ＳＷ６２０细胞ＵＳＰ９Ｘ的 表达水平能否抑制肿瘤生长。结果显示，感染 ＵＳＰ９Ｘ—ｓｈＲＮＡ病毒的ＳＷ６２０细胞ＵＳＰ９Ｘ ｍＲＮＡ ｏｆ ｄｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１ １，６ （１）：ｅ１５８９１． ［６］Ｄｕｐｏｎｔ Ｓ，Ｍａｍｉｄｉ Ａ，Ｃｏｒｄｅｎｏｎｓｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．ＦＡＭ／ＵＳＰ９ｘ，ａ ｄｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｅｓｓｅｎｔｉｌ ｆａｏｒ ＴＧＦｂｅｔａ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ｃｏｎｔｒｏｌｓ Ｓｍａｄ４ ｍｏｎｏｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎ ．Ｃｅｌｌ，２００９，１３６（１）：１２３－１３５． 【７］Ｚｈａｎｇ Ｃ，Ｃａｉ ＴＹ，Ｚｈｕ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｅｍｅｉｔａｂｉｎｅ ａｎｄ ＡＢＴ－７３７ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ 表达明显减少，ＵＳＰ９Ｘ蛋白水平明显降低。且 ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ处理后的沉默ＵＳＰ９Ｘ的ＳＷ６２０细胞凋亡 率明显增加。提示靶向ＵＳＰ９Ｘ的ＲＮＡｉ可阻断 ＳＷ６２０细胞ＵＳＰ９Ｘ的表达，ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ处理能够促进 ＳＷ６２０细胞的凋亡，是一个具有治疗价值的靶基因。 ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＵＳＰ９Ｘ ａｎｄ Ｍｃｌ一１【Ｊ１．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ，２０１ ｌ，１０ （７）：１２６４—１２７５． ［８］８ Ｇｏｍｅｚ—Ｂｏｕｇｉｅ Ｐ，Ｍｅｎｏｒｅｔ Ｅ，Ｊｕｉｎ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｎｏｘａ ｃｏｎｔｒｏｌｓ Ｍｕｌｅ— ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｍｃｌ－１ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｃｌ－ １／ＵＳＰ９Ｘ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ【Ｊ】＿Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２０１ １，４１３ （３）：４６０—４６４． 研究结果还显示，ＵＳＰ９Ｘ基因的沉默能够显著的增 加ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ引起的ＳＷ６２０细胞的凋亡。可能的一种 【９］Ｎａｇａｉ Ｈ，Ｎｏｇｕｃｈｉ Ｔ，Ｈｏｍｍａ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ—ｌｉｋｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｎ ＡＳＫ１ ｐｌａｙｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ 机制是ＵＳＰ９Ｘ基因的沉默引起抗凋亡ＭＣＬ一１蛋白 水平的下降，从而使得ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ处理后ＳＷ６２０细胞 的凋亡率升高。 综上所述，慢病毒介导的靶向ＵＳＰ９Ｘ的ｓｈＲＮＡ ＵＳＰ９Ｘ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ【Ｊ】．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ，２００９， ３６（５）：８０５—８１８． ［１０］Ｇｒｏｕ ＣＰ，Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ Ｔ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ ＴＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ—ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｐｒｏｔｅａｓｅ ９Ｘ （ＵＳＰ９Ｘ）ａｓ ａ ｄｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｓｅ ａｃｔｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ－ｐｅｒｏｘｉｎ ５（ＰＥＸ５）ｔｈｉｏｅｓｔｅｒ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ［，／］． Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２０１２，２８７（１６）：１２８１５—１２８２７． 能特异性沉默其在结肠癌细胞ＳＷ６２０中ｍＲＮＡ及 蛋白表达水平，促进由ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ引起的结肠癌细胞 ［１ １］Ｒｏｔｔ Ｒ，Ｓｚａｒｇｅｌ Ｒ，Ｈａｓｋｉｎ Ｊ，ｅｔ ａ１．ａｌｐｈａ－Ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ ｆａｔｅ ｉｓ 凋亡，为结肠癌的基因治疗提供了实验依据。 参 考 文 献 【１】Ｈａｎａｈａｎ Ｄ，Ｗｅｉｎｂｅｒｇ ＲＡ．Ｔｈｅ ｈａｌｌｍａｒｋｓ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ【Ｊ】．Ｃｅｌｌ，２０００， １００（１）：５７－７０． ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＵＳＰ９Ｘ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｍｏｎｏｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２０１１．１０８（４６）：１８６６６—１８６７１． 【１２】张娇，陈爱平，戚玉言，等．靶向ＥＧＦＲ的干扰ＲＮＡ对卵巢癌耐药细 胞凋亡的影响 ．中国肿瘤生物治疗杂志，２００９，１６（６）：６１９—６２３． 【１３］褚波，黄雪峰，唐云明．慢病毒载体及其应用进展【Ｊ］．生物医学工 程学杂志，２００８，２５（１）：２２４—２２６． （收稿日期：２０１３－０７－３１） ［２】Ｈａｎａｈａｎ Ｄ，Ｗｅｉｎｂｅｒｇ ＲＡ．Ｈａｌｌｍａｒｋｓ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ ｎｅｘｔ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ 【Ｊ１．Ｃｅｌｌ，２０１ １，１４４（５）：６４６－６７４． （本文编辑：毕轶；技术编辑：张珂）
