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利用外接CO2激光源的中红外ATR光谱仪原位无创探测人体血糖浓度

来源:化拓教育网
第3 7卷,第1期 2 0 1 7年1月 光谱学与光谱分析 Vo1.37,No.1,pp8 5-88 Spectroscopy and Spectral Analysis January,2017 利用外接CO2激光源的中红外ATR光谱仪原位无创探测人体血糖浓度 张芊茜h,范玉玲 ,何秀全 ,孙渝明。 1.济南大学信息科学与工程学院,山东济南2.山东大学医学院,山东济南250012 250022 250100 3.山东大学信息科学与工程学院,山东济南摘要糖尿病是一种严重威胁人类健康的疾病,取血检测人体血糖浓度造成病患痛苦甚至感染。因此人 体血糖浓度的无创检测技术在糖尿病的临床诊断、监测和治疗上具有重要的意义,也是一个具有挑战性的 热点研究课题。在目前报道的各种测试方法中,中红外光谱测试技术受到了广泛重视。利用常规光源的中红 外ATR光谱仪进行无创血糖检测时,由于探测光在人体组织中穿透深度低,难以到达含有体液的问质层乃 至含有血液信息的真皮层,结果导致测试数据与人体实际血糖浓度的相关性差,限制了临床应用。考虑到高 强、高纯的中红外激光在人体组织中具有较深的穿透深度,且c02激光器的1 035 am 的发射光非常接近 葡萄糖在1 029 cm 处的基频特征吸收峰,因此本文使用外接C02激光器作为中红外ATR光谱仪的自定 义外接光源,组装了新型中红外测试系统。利用此设备,测试了人手指在1 035 cm 激光辐照下的吸光度, 同时利用普通光源扫描了人手指的中红外吸收光谱,记录其在1 492 cm 的吸光度。利用常规医学方法测 定了人体实际血糖值。结果显示,人手指处受1 035 em 激光辐照的吸光度与常规光源的红外光谱中1 492 cm 处吸光度的相对强度与人体血糖浓度同步改变,两波数处吸光度的比值与人体实际血糖浓度具有一定 的正相关性(R一0.812 5)。测量结果可作为人体血糖值的一个新型指标,显示了外接CO 激光源的中红外 ATR光谱仪在无创探测人体血糖浓度方面的临床诊断潜力。 关键词中红外光谱;自定义外接激光源;人体血糖;无创探测 文献标识码:A DOI:10.3964/j.issn.1000—0593(2017)01—0085—04 中图分类号:0657.3 引 言 糖尿病是一种常见的内分泌代谢病,属慢性疾病,正严 重威胁着人类的健康l1 ]。我国也有很大的糖尿病患人群E 。 为了防止血糖水平长时间处于安全范围之外,重症糖尿病患 者需要频繁测量血糖水平_4]。目前,常用的血糖测量方法需 要在静脉或手指处取血,这不仅加重了病患者的生活、诊疗 负担,同时给病人带来疼痛、流血等诸多痛苦,而且易感染, 并可能引发其他疾病[2]。因此,医生和病患都企盼能有一种 中,红外光谱法的相关研究最为广泛,也被认为是最有发展 潜力的方向E53。与近红外光谱法相比l_6_,中红外在人体无创 血糖值检测中的研究较少,主要是中红外对组织的穿透性较 弱l7j,也就是中红外波段对高含水生物样品的穿透深度很浅 (仅5~6 m)_8j。然而,衰减全反射(ATR)技术可以有效解 决样品厚度对中红外光谱测量的局限性 ]。特别值得关注的 是,调谐范围在1 086~934 cm 的CO 激光器,可以发射 1 080,1 035和992 cm 高纯度、高能量的中红外光激光, 与葡萄糖基频特征吸收峰一致,这为血糖的高精度测量提供 了可能l1 。因此,以CO。激光为外接光源,结合红外ATR 快速、准确、特别是无创的临床检测方法,实现人体血糖水 平的测量,从而能有效地满足糖尿病人的便利需求。 目前广泛研究的无创血糖测量方法主要包括旋光法、拉 曼光谱法、光学相干层析法和红外光谱法等光学方法。这些 方法具有快速、无需试剂和可多组分同时测量等优点。其 收稿日期:2015—12—20。修订日期:2016—04—09 技术,开展无创探测人体血糖浓度监测研究,具有重要的应 用前景。 张兰等利用红外发射的激光器测试了人手指处的中红外 吸收光谱 ]。Kaiser也曾利用COz激光器作为红外光源结合 ATR测量方式,开展了血液生化指标的测量研究口 。 基金项目:国家自然科学基金项目(51273107),山东省自然科学基金重点项目(ZR2012EMZ001)NI济南大学科研基金项目(XKY1223) ̄lltJ 作者简介:张芊茜,1975年生,济南大学信息科学与工程学院讲师 *通讯联系人 e-mail:isezhangqq@ujn.edu.cn e-mail:isezhangqq@ujn.edu.cn 86 光谱学与光谱分析 第37卷 本研究在Nicolet iS50红外光谱仪的自定义外接光源入 口,引入了IAG(2 w)光栅可调型CO 连续激光器外光源, 可输出l 035 cm 的中红外光,如图1所示,用于人体手指 血液影响,且与张兰等的发现基本一致 ]。一般来说,中红 外光谱中1 333 ̄650 cm 称为指纹区,分子骨架振动及某 些单键伸缩振动和弯曲振动引起的谱带大都在此区,而葡萄 糖在1 20O~1 000 cm 区间有糖环C~(>一C振动引起的特 的测试。同时利用中红外ATR光谱仪测试人体手指处的中 红外光谱,与同步测定的人体的血糖值相比对。实验结果表 明,人体手指在1 035 cm 的吸光度与其在红外光谱中 征吸收。因此,选择1 029 CIII 处的吸收峰作为信号峰是合 理的。从图2中同时可以看到,在1 492 cIn 波数处,高糖 人血液与正常人血液的吸光度没有变化,即血液在该波数处 1 492 cm 处吸光度的比值,与人体血糖浓度实测值呈现较 好的线性正相关性。这一结果为无创探测人体血糖浓度的外 的吸光度不受血液中葡萄糖含量的影响。鉴于此波数远离葡 萄糖的特征吸收峰,可将其作为抵消其他影响因素的参比吸 光度。孙颖等曾选用1 465 cm 的C—H吸收峰作为参比, 用葡萄糖在1 123 cm 特征峰的峰高与参比峰高的比值度量 血糖浓度 J。 接CO。激光源的中红外ATR光谱仪的研制和测试方法的建 立提供了科学依据。 1实验部分 1.1材料 葡萄糖粉末采用国家标准物质,纯度为99.9 。在正常 人血液中加入葡萄糖粉末,充分溶解后得到17 mmol・I 的高糖人血液。正常人血液由齐鲁医院志愿者提供。 1.2仪器和样本 装有ATR附件的Nicolet iS50傅里叶变换红外光谱仪, 用于测试各种浓度的葡萄糖水溶液、正常人体血液、高糖人 ——爵08呐o《 体血液、以及人手指处的中红外吸收光谱。在装有ATR附件 的Nicolet iSSO傅里叶变换红外光谱仪的自定义外接光源入 口,引入IAG光栅可调型连续激光器的1 035 cm 的辐照激 光(图1),构成自制装置,用于测试人手指处的吸光度。 0 —≈D olso爵—_0一 图2正常(红色)和高糖(黑色)人血液红外吸收光谱 Fig.2 The lR spectra of normal human blood(red line)and human blood with high blood sugar concentration (black line) 鬟...[. . ̄巳L=Th三euser-defniedlight 图l装配使用者自定义光源的傅里叶变换红外光谱原理图 Fig.1 Principle map of FrIR detection equipment with the user-defined light source 2。2信号峰与参比峰的吸光度比值与血糖浓度的关系 配置1--4 mol・I ~ 、浓度梯度为0.3 tool・I 的葡萄 / 糖水溶液,测得其中红外吸收光谱如图3所示。重点对1 029 和1 492 cm 处的吸光度开展分析。最终由A z A cnl 1的计算方法所得的吸光度的比值与葡萄糖实际浓 度做比较,结果呈线性正相关,示于图4,r一0.980 7,显示 相关性强。有显著统计学意义。同时将人手指处中红外光谱 (图5)中1 029和1 492 cm 两处吸光度的比值(Al。2。 / A 1.3志愿受试者 )与人体的实测血糖值进行比对,并没有获得较好的 于山东大学齐鲁医院募集志愿者5O名,测量受试者左 手中指指尖血糖浓度及右手中指中红外光谱,开始测试前洗 手,一次性擦手纸擦干,等待1 rain手全干后,在受试者的 左右手同时测量血糖值与中红外光谱图。同时使用上述自制 装置测试了17名志愿者手指处在1 035 cm 激光辐照下的 吸光度。 2结果与讨论 2.1信号吸收峰与参比吸收峰的选取 测试1广正常人血液的中红外吸收光谱,然后在其中溶入 高纯葡萄糖粉末再测试其中红外吸收光谱,结果如图2所 图3不同浓度的葡萄糖水溶液的红外吸收光谱 红色曲线:l mol・I I;黑色曲线:4 mol・I 1 Fig.3 The IR spectra of glucose solutions with different concentrations Red line:l tool・I ;Black line:4 tool・I 示。根据图2,高糖人血液在1 029 cm。处的吸光度明显高 于正常人血液。该波数应为葡萄糖的基频特征吸收,与文献 报道的l 033 cm 的基频特征吸收的4 crD 位移应该是受 第1期 光谱学与光谱分析 87 窘 2.0 1.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3 5 4.0 Concentration/mol・L 图4不同波数处吸光度之比与葡萄 糖水溶液浓度梯度的相关性 Fig.4 Relevance between the ratio of absorbance in different wave numbers and concentration gradient in glucose a— queous solution O.0 4000 3 500 3 000 2 500 2 000 1 500 l 000 500 Wavenumber/cm 图5不同血糖值的人手指的红外光谱 黑色曲线:低值;红色曲线:高值 Fig.5 The IR spectra of human finger with different blood lgucose levels Black line:low level,Red line:high level 自 鬈 自 雪 0 1 2 3 4 ln【Glu】 图6人手指在不同波数处吸光度之比与人血糖值的相关性 Fig.6 Relevance between the absorbance ratios in different wave nmnbers of human finger and human blood gin。 coselevels 8宜 qB g 罡z鼍叠 10Z 相关性(图6),其r一0.4871 O 0 0  2。认为这是由于人体组织中角 O O 8 6 4 2 质层阻挡了低能量的中红外光,与样品发生作用的倏逝波并 不能穿透角质层到达含有血液信息的真皮层。因此利用红外 光谱仪自身的普通光源进行ATR-FTIR光谱的无创血糖测 量时,根据ATR测量原理,得到的光谱只反映皮肤角质层 的信息 。 2.3利用激光光源的信号峰与参比峰的吸光度比值与血糖 浓度的关系 CO2激光器可以发射波数为1 035 cm1的高纯、高强激 光,有助于增强入射光在人体组织中的穿透深度,使探测光 能够到达含有体液的问质层乃至含有血液信息的真皮 层 。, 。 利用图1装置获取了人手指在1 035 cm 处的吸收度, 激光输出功率为210 mW。同时将其与中红外光谱中的1 492 cm 处吸光度的比值作为纵坐标,实测的人体血糖值作为横 坐标作图,得到图7。根据图7,发现两者有较好的相关性, 同时线性回归分析表明,其r一0.812 5,显示二者呈线性正 相关,有显著统计学意义。 2.0 1.8 g 1.6 E 1.4 2 1.2 1.0 0 I 2 3 4 h[Glu】 图7激光激发下人手指在不同波数处 吸光度之比与人血糖值的相关性 Fig.7 Relevance between the absorbance ratiso in different wave numbers of human figner by excited by laser source nad human lbood lgucose levels 3结论 利用ATR-FTIR光谱进行无创血糖测量时,由于中红 外光谱仪的常规光源能量较低,造成倏逝波穿透能力差,不 能穿过角质层到达含有血液信息的真皮层,因此,人手指处 的ATR-FTIR光谱数据与人体血糖水平之间的相关性较差。 为了改进测量精度,引入了COz激光光源,并将其作为中红 外光谱仪的自定义外接光源组装了测量装置。同时使用了非 常接近葡萄糖1 029 cm 特征基频吸收峰的1 035 cm 波数 处的激光光源。结果表明,在1 035 cm 波数激光的辐照下, 人手指处吸光度与中红外光谱1 492 cm1处吸光度的比值与 人体实际血糖浓度具有一定的正相关性。利用C02激光器作 为红外光源结合中红外ATR光谱的方法具有无创检测人体 血糖值的前景。 88 光谱学与光谱分析 第37卷 References Malik F S,Taplin C E.Pediatric Drugs,2014,16(2):141. 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In—Vivo Noninvasive Measurement of Human Blood Glucose Levels by Mid-Infrared Spectrograph with External C02 Laser Source ZHANG Qian-qian ,FAN Yu-ling ,HE Xiu-quanz,SUN Yu-ming。 1.School of Information Science and Engineering,University of Jinan,Ji’nan 250022,China 2.Shandong University School of Medicine,Ji’nan 250012,China 3.Schoo1 of Information Science and Engineering,Shandong University,Ji’nan 250100,China Abstract Diabetes is a kind of diseases which does harm to people’s health.and the detection of human blood glucose levels uti一 1izing blood samples will result in pain even infection for patients.Thus the in-vivo noninvasive measurement of human blood glu— cose levels has vital value in clinical diagnosis,detection and therapy,and it also is a very hot research topic with challenging.At present,as to various noninvasive detection methods,the technology based on mid-infrared absorption spectrophotometry with ATR has been gaining increasing attention.However,when carrying out noninvasive measurement of human blood glucose levels by means of the spectrophotometry equipped with routine light sources,the penetration depth of probe light in human tissues is low and thus it is very difficult to reach the stromal layer containing body fluids and especially dermis layer containing blood for probe light,which resulting in low relativity between experimental data and real human blood glucose levels and thus limiting the clinical application.Generally,not only the mid-infrared laser with high strength and high purity can deeper penetrate the human tissues,but also the output wavelengths at 1 035 cm~of CO2 laser very coincide with the fundamental frequency characteristic absorption at 1 029 cm~of glucose.Thus,in this work,a novel noninvasive mid-infrared measurement system to detect human blood glucose levels has been successfully assembled,in which a COz laser was used a self-defined external light source of the new mid-infrared absorption spectrophotometry with ATR.In this system,the absorbance of human fingertip at 1 035 cm has been measured when external CO2 laser source was used as probe light,at the same time,the mid-infrared absorption spectra of fingertip have been also obtained and absorbance at 1 492 cm~has been recorded.The human blood glucose levels were deter— mined synchronously by means of the routine medical method.The experimental results showed that the ratio in fingertip be— tween absorbance at 1 035 cm一1 from the laser source and one at 1 492 cm一 from mid-infrared absorption spectrophotometry could synchronously change with the human blood glucose levels,and the ratio presents certain positive relativity with the real human blood glUCOse 1evels(R—O.812 5).Thus the measurement data could be used as a new index of blood glucose 1evel in hu— man body.which showed the potential in clinical diagnosis of the ATR mid-infrared absorption spectrophotometry with external COz laser source in noninvasive measurement of human blood glucose levels. Keywords Mid-infrared absorption spectra;User-defined external CO2 1aser source;Human blood glucose 1evels;Noninvasive meastlrement *Corresponding author (Received Dec.20,2015;accepted Apr.9,2016) 

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