国眶｜匿■国同２０１ ３年４月第１ １卷第１ １期 ・临床研究・２５５ 急性白血病患者体内ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１ ４３在骨髓细胞中的表达及其意义分析 张忠强 吴涛 于红涛 何锦照 （河源市人民医院内二区，广东河源５１７０００） 【摘要】目的探讨ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３在急性白血病患者骨髓细胞表达情况，并分析其临床意义 方法入选２００９年５月至２０１１年９月在 我院住院治疗的急性白血病患者４７例，同时入选在我住院治疗并进行骨髓穿刺检查的非白血病患者４６例作为对照组，比较两组患者 ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３表达情况，以及白血病组患者经治疗后ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３表述变化情况。结果白血病组患者其ＭｉｃｒｏＲＮＡ．１４３表达水平显著 低于对照组患者，差异均具有显著的统计学意义，Ｐ＜０．Ｏ５；且ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３表达水平在白血病患者不同年龄、性别、疾病分型、基因 类型等方面的差异无明显差异，Ｐ＞Ｏ．０５；入选白血病患者经化治疗后ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３表达水平较治疗前水平显著升高，差异具有显著的 统计学意义，Ｐ＜Ｏ．０５。结论ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３表达与急性白血病发病的发生、发展存在非常显著的关系，检测其水平的变化可以对患者的 预后做出有效的评价。 【关键词】急性白血病；骨髓细胞；表达；临床意义；ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３ 中图分类号：Ｒ７３３．７１ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７１－８１９４（２０１３）１１－０２５５－０２ 要见参考文献 ］，分为四个阶段进行：第ｌ阶段，５０度２ｍｉｎ钟Ｉ第２阶 段，９５℃２ｍｉｎ，以上两个阶段均进行１各循环ｊ第３阶段，９５℃１５ｓ， ６０Ｘ２３０ｓ，４０个循环；溶解曲线分析：９５℃１５ Ｓ、６０℃ｌｍｉｎ、９５ Ｘ２ １５ｓ、 近年来，随着社会发展，白血病患病率呈现逐渐上升的趋势，成 为威胁人类健康和生命安全的主要疾病之一。急性白血病是一类由于 干细胞出现异常克隆的恶性疾病，其中克隆中的干细胞失去进一步分 化成熟能力而停滞在细胞发育不同阶段；并且在发展过程中不断浸 润器官和其他组织，抑制造血系统，对患者造成严重的危害［１】。及早 诊断并干预这类疾病对于挽救患者生命具有非常重要的临床意义。 ＭｉｃｒｏＲＮＡ是近年来研究较多的一种／］￣ＲＮＡ，为一种内生的、长度约 ２Ｏ～２４个核苷酸组成，在细胞内发挥着多种重要的调节作用，研究显 示，每个ＭｉｃｒｏＲＮＡ可以拥有多个靶基因，且多个ＭｉｃｒｏＲＮＡ也可以对 同一个基因发挥重要的调节作用，ＭｉｃｒｏＲＮＡ对人类基因也存在重要 的调节作用，大约控制人类１／３的基因 】。随着研究的深入，人们发 现ＭｉｃｒｏＲＮＡ与肿瘤的发生存在密切关系，通过细胞分化和增殖 ６０Ｘ３ １５ｓ、１个循环。每个标本均作复孔３管，至少重复３次。 １．２．３观察指标 比较两组患者ＭｉｃｒｏＲＮＡ．１４３表达情况，以及经治疗后，白血病患 者ＭｉｃｍＲＮＡ－１４３表达变化情况。 １．３统计学处理 采用ｓｐｓｓ ｌ ７．０软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（ ±ｓ）表示，２组间资料比较采用 险验；计数资料用百分比表示，采用ｘ２ 检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２结果 直接参与肿瘤的发生、发展 ，本研究旨在探讨ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３在急性 白血病患者骨髓细胞表达情况，并分析其临床意义。 １资料与方法 １．１资料 入选２００９年５月至２０１１年９月在我院住院治疗的急性白血病患者４７ 例，其中男性患者２９例，女性患者１８例，患者年龄１８－５７岁，其中髓 系白血病患者２７例，占５７．４％；淋巴系白血病２０例，占４２．６％；所有 患者均符合ＦＡＢ分型诊断标准，均为初次诊断的白血病，均未接受化 疗或其他治疗。同时入选在我住院治疗并进行骨髓穿刺检查的非白血 病患者４６例作为对照组，两组患者均签署知情同意书，两组患者在年 龄、性别等其他方面的差异无统计学意义，具有可比性。 １．２方法 ２．１两组人群ＭｉｃｒｏＲＮＡ・１４３表达情况比较 分析显示，白血病组患者其ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３表达水平显著低于对照 组患者，差异均具有显著的统计学意义，Ｐ＜Ｏ．０５Ｉ且ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３ 表达水平在白血病患者不同年龄、性别、疾病分型、基因类型等方面 的差异无明显差异，Ｐ＞０．０５。 ２．２不同阶段ＭｉｃｍＲＮＡ一１４３表达情况比较 人选白血病患者经化治疗后，再次检测患者ＭｉｃｒｏＲＮＡ・１４３表达水 平较治疗前水平显著升高，差异具有显著的统计学意义，Ｐ＜Ｏ．０５。 ３讨论 随着环境污染加剧，白血病发病率呈现显著上升的趋势，尽管近 年来在治疗急性白血病取得了巨大的进步。白血病仍然是威胁人类健 康和生命安全的主要疾病之一，早期诊断，并采取有效地治疗手段对 于改善白血病患者的预后具有非常显著的临床意义 。生物学技术的 进展给医学的发展提供了非常有利的临床工具，实时定量ＰＣＲ技术的 １．２．１标本处理 所有入选者在进行骨髓穿刺后，留取骨髓标本５ｍＬ，采用肝素抗 凝；单个核细胞提取，采用ＴＲｈｏｌ法提取ＲＮＡ，然后吸取２“ＬＲＮＡ在 出现是ＤＮＡ定量检测非常有效的手段，具有灵敏度高、特异性强、自 动化程度高等优点，因而被广泛应用于临床诊断、基础研究 。在本 研究中采用Ｑ．ＰＣＲ技术取得了非常好的效果。ＭｉｃｒｏＲＮＡ为小分子非 编码ＲＮＡ，广泛存在于真核生物中，其与靶基因结合的方式主要为碱 基配对，对靶基因产生负性作用，主要的生物学特点为在序列上 高度保守，表达上具有发育阶段性和组织特异性 】。是近年来临床研 究和基础研究的热点问题，随着研究的逐渐深入，人们发现其与多种 肿瘤的发生、发展存在非常显著的关系，如肝癌、乳腺癌等。其表达 核蛋白定量测定仪上测定ＯＤ值，进行准确定量。反转录严格按照试 剂盒说明书进行。 １．２．２实时定量ＰＣＲ 引物设计与合成由专门的生物科技公司负责设计和合成， ＭｉｃｒｏＲＮＡ・１４３实时定量反应总体系的构建，总量为２０ Ｌ，包括： １０“ＬＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ １ Ｌ、ｅＤＮＡ１０ ｍｏｌ／Ｌ、正向和反向引物各 １“Ｌ、ＲＯＸ参考资料０．０４ Ｌ、ＤＥＰＣ水补充至２Ｏ Ｌ，循环参数主 ２５６・临床研究・ Ａｐｒｉｌ ２０１３，Ｖｏ１．１１，Ｎｏ．１１ 生化检测指标在急性胰腺炎诊断中的临床意义 刘 琴 （苏州市相城区北桥街道卫生院检验科，江苏苏州２１５１４４） 【摘要】目的探讨血清生化指标在急性胰腺炎（ＡＰ）患者早期诊断和病情评估中的应用价值。方法选择我院２００６年７月至２０１２年１月 ・收治入院的３００例急腹症患者资料进行回顾性分析，根据临床确诊将３００例患者分为ＡＰ组（２００例）和非ＡＰ组（１００例），其中ＡＰ组 根据病情严重程度分为轻症ＡＰ（ＭＡＰ １００例）和重症ＡＰ（ＳＡＰ １００例），同时选取１００例健康体检者作为正常对照组。检测各组血淀粉 酶（Ｓ－Ａｍｙ）、尿淀粉酶（Ｕ—Ａｍｙ）、胰脂肪酶（ＬＰＳ）、胰蛋白酶原激活肽（ＴＡＰ）和Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）等５项指标。Ｓ—Ａｍｙ、Ｕ—ｍｙ Ａ和ＬＰＳ采用速率法检测，ＴＡＰ采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测，ＣＲＰ采用乳胶增强速率散射比浊法检测。结果ＡＰ组 ＬＰＳ水平明显高于非ＡＰ组和正常对照组（Ｐ＜Ｏ．０１）；重症胰腺炎患者Ｕ・Ａｍｙ、ＴＡＰ及ＣＲＰ水平明显高于轻症患者 ＜Ｏ．０１）；血清 ＬＰＳ敏感性９２．０％、特异性９１．０％明显高于Ｓ－Ａｍｙ、Ｕ—Ａｍｙ、ＴＡＰ和ＣＲＰ（Ｐ＜０．０５或Ｏ．０１）。结论ＬＰＳ的检测有助于ＡＰ的早期诊断， 而ＴＡＰ和ＣＲＰ则有助于病变严重程度的判断以及治疗效果的观察与预后评估。 【关键词】急性胰腺炎；诊断；血清生化指标；检测 中图分类号：Ｒ５７６ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７１－８１９４（２０１３）１１—０２５６—０２ 急性胰腺炎（ａｃｕｔｅ ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ，ＡＰ）为激活的胰酶自身消化胰腺 殊病史急腹症患者３００例，所有患者均符合中华医学会胰腺学组制定 组织所引起的一种急性化学性炎症。急性胰腺炎是常见病，多发病。 临床上按病因分为胆源性胰腺炎 酒精性胰腺炎、高脂或者高钙引起 的胰腺炎等等．本研究主要对院２００６年７月至２０１２年１月收治人院的３００ 例急腹症患者资料进行回顾性分析，探讨患者血清生化指标在急性胰 《急性胰腺炎的临床诊断及分级标准》的诊断标准。其中，男１４２ 例，女１５８例，年龄２３～８０岁，平均（４２．２±５．３）岁；其中ＡＰ患者 ２００例，非ＡＰ患者１ ００例，２００例ＡＰ中根据病情严重程度分为轻症ＡＰ （ＭＡＰ １００例）和重症ＡＰ（ＳＡＰ １００例）。 腺炎（ＡＰ）早期诊断和病情评估中的应用价值．现总结报道如下。 １资料与方法 １．１一般资料 １．２检测仪器与方法 采用ＴＢＡ一４０ＦＲ全自动生化分析仪，于发病后４８ｈ内采集，分离血 清后检测检测各组血淀粉酶（Ｓ－Ａｍｙ）、尿淀粉酶（Ｕ．Ａｍｙ）、胰脂 肪酶（ＬＰＳ）、胰蛋白酶原激活肽（ＴＡＰ）和Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）等５ 本文资料根据我院２００６年７ｙ］至２０１２年１月收治人院的既往无特 具有一定的组织特异性，因此可以通过检测患者细胞表达水平对患者 对策［Ｊ］＿ｌ临床血液学杂志，２００９，２２（２）：１ ６６—１ ６７． ［２］刘志，韩少良，黄颖鹏，等．ｍｉＲ．１４３和ｍｉＲ－１４５在胃间质瘤组织中 的表达及其意义【Ｊ】．中华普通外科杂志，２０１０，２５（８）：６７８—６８０． ［３］张嫒媛，郑永青，李小雨，等．ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３在急性白血病患者与 正常人骨髓细胞中的差异表达及意义［Ｊ］．中国实验血液学杂 志，２０１１，１９（２）：３０８—３１１． 疾病特点、预后做出非常有价值的评价 。 在本研究中通过比较发现，白血病患者ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３表达水平显 著下调，与患者年龄、性别、疾病分型等无显著相关性，并且经治疗后 其表达水平呈现上升趋势，研究证实了ＭｉｃｒｏＲＮＡ参与了白血病发生、 发展整个过程。有研究表明，ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１４３具有抑癌基因作用，并且 已经证实其在多种肿瘤中均发挥着非常显著的作用，可以显著抑制癌细 胞的增殖和迁移，发挥作用的主要机制为作用于ＫＲＡＳ基因抑制蛋白激 酶通路，并且增强部分化疗药物的化疗敏感性，ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３在白血病 患者中的作用是多方面的。ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４３这种作用不仅在白血病患者中 【４】 肖海静，王观宇，董庆华．人肝细胞肝癌和癌旁正常组织ｍｉｃｒｏＲＮＡ 表达差异的分析［Ｊ］．肿瘤防治研究，２０１２，３９（８）：９４７—９４９． ［５】朱明霞，克晓燕．ｍｉｃｒｏＲＮＡ在淋巴细胞发育分化及淋巴系统恶 性肿瘤发生中的作用［Ｊ】冲国实验血液学杂志，２０１２，２０（４）：１０１４— １０１９． 得到了有效地证实，并且在其他肿瘤中也得到了类似的结果，如胃癌、 淋巴瘤等其表达水平均出现明显异常。随着生物学研究进展，其信息数 ［６］曹志刚，邵志敏．ｍｉｃｒｏＲＮＡ在乳腺癌诊断及预后判断中的作用 据表明，每个ＭｉｃｒｏＲＮＡ对于数百个目标基因具有一定的控制作用，其 在血液系统中的研究最先与血细胞的分化开始的。多项研究结果表明， ＭｉｃｒｏＲＮＡ￣变或功能失调参与了白血病的发生、发展，因此在白血病患 者检测Ｍｉ讯ｌＲ ｊＡ表达水平及其变化清况对于白血病的基因诊断、预后判 断、靶向治疗等方面具有非常重要的作用 ｑ。 综上所述，随着研究的进展，白血病的发生、发展是多种基因共 同参与的结果；ＭｉｃｒｏＲＮＡ突变或功能失调参与了白血病的发生、发 展，检测其水平的变化可以对患者的诊断、预后做出有效的评价。 参考文献 【Ｊ］．中国癌症杂志，２０１２，２２（７）：５４２－５４５． ［７］张明，魏巍，刘禄成，等．反义微Ａ￣ＲＮＡ一２１对人膀胱癌细胞增殖和 凋亡的影响【Ｊ］．吉林大学学报（医学版），２０１０，３６（３）：４５０．４５２． ［８】张超，姚志勇，朱鸣阳，等．ＭｉｃｒｏＲＮＡ一３４ａ通￣Ｎｏｔｃｈ１对膀胱肿瘤 细胞株Ｔ２４增殖的影ｇｌｆ［Ｊ１．医学杂志，２０１２，３７（５）：４２６－４３０． ［９］蒋庆详，黄江波．ＭｉｃｒｏＲＮＡ检测与膀胱癌的诊断及治疗［Ｊ］冲国 现代医药杂志，２０１２，１４（８）：１２４－１２６． ［１Ｏ】李晓华，张莹，时永全，等．ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１０７通过负性抑癌基因 ＤＩＣＥＲＩ促进胃癌的侵袭和转移［Ｊ］冲国细胞生物学学报，２０１１， ｌ５（９）：１８８７．１８９５． ［１］黄治虎，陈宝安，欧阳建，等．我国白血病流行病学调查的现状和
