安徽省中药饮片炮制规范公示草案
知母趁鲜切制饮片质量标准（草案）
知 母 Zhimu
ANEMARRHENAE RHIZOMA
本品为知母的炮制加工品。
【炮制】 春、秋二季采挖知母根茎，除去须根和泥沙，干燥至适宜程度时，切片，干燥。
【性状】 本品呈不规则类圆形的厚片。外表皮黄棕色或棕色，可见少量残存的黄棕色叶基纤维和凹陷或突起的点状根痕。质硬，切面黄白色至黄色，气微，味微甜、略苦，嚼之带黏性。
【鉴别】 （1）本品粉末黄白色。黏液细胞类圆形、椭圆形或梭形，直径53～247 μm，胞腔内含草酸钙针晶束。草酸钙针晶成束或散在，长26～110 μm。
（2）取本品粉末0.5g，加稀乙醇10ml，超声处理20分钟，取上清液作为供试品溶液。另取芒果苷对照品，加稀乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典》2015年版四部 通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-水（1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（3）取本品粉末0.2g，加30%丙酮10ml，超声处理20分钟，取上清液作为供试品溶液。另取知母皂苷BⅡ对照品，加30%丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部 通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相
应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】 水分 不得过12.0%（《中国药典》2015年版四部 通则0832第二法）。
总灰分 不得过9.0%（《中国药典》2015年版四部 通则2303）。 酸不溶性灰分 不得过2.0%（《中国药典》2015年版四部 通则2303）。 【含量测定】 芒果苷 照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版四部 通则0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.2 %冰醋酸水溶液（15∶85）为流动相；检测波长为258 nm。理论板数按芒果苷峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备 取芒果苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1 ml含50 μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25 ml，称定重量，超声处理（功率400W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，含芒果苷（C19H18O11）不得少于0.70%。
知母皂苷BⅡ 照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版四部 通则0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25∶75）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按知母皂苷BⅡ峰计算应不低于10000。
对照品溶液的制备 取知母皂苷BⅡ对照品适量，精密称定，加30%丙酮制成每1 ml含0.50 mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.15 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入30 %丙酮25 ml，称定重量，超声处理（功率400 W，频率40 kHz）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用30 %丙酮补足减失的重
量，摇匀。滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。
本品按干燥品计算，含知母皂苷BⅡ（C45H76O19）不得少于3.0%。 【性味与归经】 苦、甘，寒。归肺、胃、肾经。
【功能与主治】 清热泻火，滋阴润燥。用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘。
【用法与用量】 6～12 g。 【注意】 脾虚便溏者忌用。 【处方应付】 写知母付知母。 【贮藏】 置通风干燥处，防潮。
起草说明
《中国药典》2015年版一部收载白芍饮片的炮制方法为“洗净，润透，切薄片，干燥”。现代化大生产过程中发现，知母药材质地坚硬，润透需较长时间，且用水闷润过程中可能导致水溶性成分流失，影响成品的质量。据知母主产地实地走访和调研，目前药农和饮片生产企业多采用产地一体化加工模式，即“春、秋二季采挖知母根茎，除去须根和泥沙，干燥至适宜程度时，切片，干燥。”另外，为规范知母趁鲜加工工艺，保证趁鲜切制饮片质量，研究建立了知母趁鲜切制饮片质量标准。此次标准起草共收集10批样品，均来源于亳州。样品信息见表1。
表1 样品信息表
样品 ZM1 ZM2 ZM3 ZM4 ZM5 ZM6 ZM7 ZM8 ZM9 ZM10
产地 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州 亳州
采收日期 2017.02.18 2017.02.18 2017.02.18 2017.02.19 2017.02.19 2017.02.22 2017.02.22 2017.02.22 2017.02.23 2017.02.23
样本量（kg）
5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
【名称】 由于本标准主要增加知母产地趁鲜加工工艺，故名称等参照《中国药典》2015版一部拟订。
【来源】 本品为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的根茎。
【炮制】 春、秋二季采挖知母根茎，除去须根和泥沙，干燥至
适宜程度时，切片，干燥。 图1 饮片性状图
【性状】结合10批中试所得知母样品的实物性状及参考传统方法加工所得饮片性状，将本品描述为“黄白色或淡黄色饮片”，将本品摊开，嗅其气味，
本品气微，味微甜、略苦，嚼之带黏性。同时结合《中国药典》2015年版一部综合描述而得，见图1。
产地趁鲜加工的知母片与传统片性状区别：知母传统片通常为不规则类圆形厚片，而知母趁鲜片为不规则直片，也有切制为不规则类圆形厚片；此外，趁鲜片较传统片色泽更鲜亮，无霉变、腐烂现象，气味清香。
【鉴别】1.显微鉴别：照《中国药典》2015年版四部 通则2001显微鉴别法试验，对本品粉末进行显微鉴别研究。取本品粉碎，粉末过五号筛，挑取少许置载玻片，滴加水合氯醛进行透化，再滴加稀甘油试液，盖上盖玻片，显微镜下检视并拍照，见图2。
结合《中国药典》2015年版中知母显微鉴别标准进行综合描述。趁鲜加工的知母片显微鉴别为：本品粉末黄白色。黏液细胞类圆形、椭圆形或梭形，直径53～247 μm，胞腔内含草酸钙针晶束。草酸钙针晶成束或散在，长26～110 μm。与《中国药典》2015年版一致。
图2 知母粉末显微图（示粘液细胞及草酸钙簇晶）
2.薄层色谱：（1）芒果苷薄层鉴别 照《中国药典》2015年版四部 通则0502薄层色谱法试验结果：紫外光灯（365 nm）下检视，供试品色谱中，在与芒果苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。与《中国药典》2015年版一致。见图3。日光灯下检视，供试品色谱中，在与知母皂苷B-Ⅱ对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图4。
图3 薄层色谱图（紫外光灯365 nm下）
薄层板来源：聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂） 温度：19 ℃ 湿度：62%
1 :ZM1供试品 2: ZM2供试品 3: ZM3供试品4: ZM4供试品 5: ZM5供试品6 :ZM6供试品 7: ZM7供试品8: ZM8供试品 9 :ZM9供试品10: ZM10供试品
图4 薄层色谱图（日光下）
薄层板来源：硅胶G薄层板（Merck，德国默克） 温度：19 ℃ 湿度：55 %
1 :ZM1供试品 2: ZM2供试品 3: ZM3供试品4: ZM4供试品 5: ZM5供试品6 :ZM6供试品 7: ZM7供试品8: ZM8供试品 9 :ZM9供试品10: ZM10供试品
【检查】 水分：按照水分测定法（《中国药典》2015年版四部 通则0832第二法）测定，采用烘干法对10批产地趁鲜加工的知母样品进行水分测定，结果平均值为9.68%，最大值为10.71%，最小值为8.60 %。根据水分测定结果，采用统计学分析，参考《中国药典》2015年版知母水分限度，将其限度拟定为“不得过12.0%”。
总灰分：按照《中国药典》2015年版四部 通则2302测定，对10批产地趁鲜加工的知母样品进行总灰分测定，结果平均值为4.78 %，最大值为5.94 %，最小值为3.75 %，根据总灰分测定结果，采用统计学分析，参考《中国药典》2015年版知母总灰分限度，将其限度拟定为“不得过9.0%”。
酸不溶性灰分：按照《中国药典》2015年版四部 通则2302测定，对10批产地趁鲜加工的知母样品进行总灰分测定，结果平均值为1.23 %，最大值为1.58 %，最小值为0.76 %；根据酸不溶性灰分测定结果，采用统计学分析，参考《中国药典》2015年版知母酸不溶性灰分限度，将其限度拟定为“不得过2.0%”。
【含量测定】 参照《中国药典》2015年版一部知母中芒果苷含量测定方法，对照品及供试液的高效液相色谱图如下，按照上述方法，对10批知母样品芒果苷含量进行测定，见图5、图6。
图5 芒果苷对照品色谱图
图6 供试品色谱图
对10批样品进行芒果苷含量测定，结果平均值为1.22 %，最大值为1.52 %，最小值为0.84 %；根据含量测定结果，采用统计学分析，参考《中国药典》2015年版
知母含量限度，将其限度拟定为：本品按干燥品计算，含芒果苷（C19H18O11）不得
少于0.70%。
知母皂苷BⅡ含量的测定：参照《中国药典》2015年版一部知母中知母皂苷BⅡ含量测定方法，以此方法测定，见图7、图8。
图7 知母皂苷BⅡ对照品色谱图
图8 供试品色谱图
按照上述方法，对10批知母样品知母皂苷BⅡ含量进行测定，，根据上述10批知母样品测定数据，结果平均值为6.13 %，最大值为6.61 %，最小值为5.15 %。根据含量测定结果，采用统计学分析，参考《中国药典》2015年版知母含量限度，将其限度拟定为：本品按干燥品计算，含知母皂苷B-Ⅱ不得少于3.0 %。
【用法与用量】【处方应付】【注意事项】 【贮藏】 参照《中国药典》2015年版，未做修订。
发布单位：安徽省药品监督管理局
起草单位：安徽协和成药业饮片有限公司 安徽中医药大学 安徽省食品药品检验研究院 亳州市永刚饮片厂有限公司
起 草 人：张亚中 李素亮 金传山 罗云 黄思照 鲁轮 班永生 郭晓康
