现代医院２０１５年ｌＯ月第１５卷第ｌ０期专业技术篇Ｍｏｄｅｒｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｏｃｔ ２０１５ Ｖｏｌ １５ Ｎｏ １０ ２１ 大鼠腹主动脉缩窄术致大鼠慢，ｌ￣ＪＯ衰的建模与体会 朱林强 周永焯谢晓明 赖洪珍 吕敏仪 张银霞 陈盛强 许卫 伍金雷 陈唏明 ＴＨＥ ＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮ ＯＦ ＲＡＴ ＣＨＲＯＮＩＣ ＨＥＡＲＴ ＦＡＩＬＵＲＥ ＭＯＤＥＬ ＩＮＤＵＣＥＤ ＷＩＴＨ ＡＢ— ＤＯＭｌＮＡＬ Ａ０ＲＴＩＣ Ｃ０ＡＲＣＴＡＴＩＯＮ ＺＨＵ Ｌｉｎｑｉａｎｇ，ＺＨＯＵ Ｙｏｎｇｚｈｕｏ， Ｊ Ｈｏｎｇｚｈｅｎ，ｅｔ ａｌ 【摘要】 目的采用腹主动脉部分缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型，评价慢性心力衰竭建模效果。 方法将大鼠随机分为Ａ、Ｂ两组，各２４只。Ａ组行腹主动脉部分缩窄术，Ｂ组仅分离腹主动脉而不缩窄，术 后每日观察大鼠的精神状态及体重等一般情况的变化。分别于术后第４周、第８周末行超声心动图检查，以 评价大鼠的心功能改变，并于第８周末取心脏组织进行ＨＥ染色、马松染色观察心肌组织结构改变及心肌纤 维化改变。结果 术后１周Ａ组大鼠存活１８只，死亡６只，存活率为７５％，Ｂ组全部存活；建模四周后Ａ组大 鼠出现毛发稀疏、蓬松、干燥无光泽，活动力降低，呼吸频率加快，体重增长缓慢等变化，而且这些变化随建模 时间增长而愈加明显，到８周时出现明显心力衰竭体征；建模４周后心动图检查结果：Ａ组大鼠心脏收缩末期 左室后壁厚度（ＬＶＰＷｓ）、舒张末期左室后壁厚度（ＬＶＰＷｄ）、收缩期室间隔厚度（ＩＶＳｓ）、舒张末期室间隔厚度 （ＩＶＳｄ）均增加，其差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），左心射血分数（ＬＶＥＦ）有下降趋势但无统计学意义（Ｐ＞ Ｏ．Ｏ５）；建模８周后Ａ组大鼠ＬＶＰＷｓ（Ｏ．２９７±０．０２０ ０．３７４±Ｏ．０２３）、Ｐ＜０．０５，ＬＹＰＷｄ（０．１９２±０．００９ ０．２９０±０．０２８）ｍｍ、Ｐ＜０．０５，ＩＶＳｓ（０．３１１±０．００８绑０．３６４±０．０１２）ｍｍ、Ｐ＜０．０５，ＩＶＳｄ（Ｏ．１８７±０．００８ ０．２２５ ±０．０２３）ｍｉｌｌ、Ｐ＜０．０５，ＬＶＥＦ（８６．５８６±１．４５２ ６０．６３０±２．７１６）ｎｌｍ、Ｐ＜０．０５，均差异明显（Ｐ＜０．０５）；ＨＥ染 色结果和马松染色结果显示Ａ组大鼠心肌细胞体积增大、数量减少、细胞排列紊乱、间隙增宽、细胞核浓染增 大、染色不均、心肌肌节增多、肌纤维间质胶原纤维增生。结论腹主动脉部分缩窄术可在８周时间成功建立 大鼠慢性心力衰竭模型，且稳定性高，重复性好，是研究慢性心力衰竭的理想建模方法。 【关键词】腹主动脉缩窄术ＳＤ大鼠慢性心力衰竭 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—３３２Ｘ．２０１５．１０．００７ 慢性心力衰竭（ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ，ＣＨＦ）是多种心血管 的可行性，并就如何建立稳定可靠的大鼠心力衰竭模型步骤 疾病的最终归宿，严重影响着患者的生活质量和健康水平， 展开讨论。 它给家庭和社会带来了沉重的经济负担和精神痛苦，ＣＨＦ现 １材料和方法 已成为全世界严重的公共卫生问题…。因ＣＨＦ相关实验研 １．１ 实验动物 究不能直接在病人身上进行，故ＣＨＦ动物模型越来越广泛的 被应用于实验研究中。所以建立一种稳定、可靠的动物心衰 八周龄健康雄性ｓＤ大鼠共４８只，购于广东省医学实验 模型对进一步研究该类疾病有重要意义。现今众多ＣＨＦ模 动物中心（ＳＰＦ级，动物编号：ＳＣＸＫ（粤）２０１３～０００２），于广 型建立方法中，腹主动脉缩窄术因经济、实用、操作简单而成 州医科大学医学实验动物中心适应性饲养两天（清洁级），体 为ＣＨＦ实验研究的常用模型。本组参照Ａｒｍｅｄ等 腹主动 重２２０—２７０ ｇ。随机分为Ａ、Ｂ两组（Ａ组２４只，为模型组；Ｂ 脉缩窄术制备大鼠压力超负荷性慢性心力衰竭模型 ，从建 组２４只，为对照组）。所有实验动物以标准大鼠饲料饲养， 模步骤、超声心动图结果、心脏病理结构等方面评价此方法 自由摄食饮水，温度２３～２５℃，湿度５５％～７０％。 １．２实验步骤 基金项目：广东省科技计划项目（编号：２０１３Ｂ０２２０００１０３） １．２．１术前准备 朱林强周永焯赖洪珍吕敏仪谢晓明张银霞：广州医科大 １．２．１．１术前８小时禁食，自由饮水。 学金域检验学院广东广州５１００００ １．２．１．２保持实验室室温为２５～３０℃，术中使用落地手术 陈盛强：广州医科大学附属第二医院广东广州５１００００ 灯为手术提供光源，同时利于维持大鼠正常体温。 许卫伍金雷陈唏明：广州医科大学附属第三医院广东广州 １．２．２详细操作 ５ｌＯ００ｏ １．２．２．１大鼠用１０％水合氯醛（０．３５ ｍｌ／ｌＯ０ ｇ）腹腔注射麻 通讯作者：陈唏明 醉，仰卧位，固定四肢，腹部手术区备皮，消毒，并铺一次性无 ２４ 现代医院２０１５年ｌＯ月第１５卷第ｌＯ期专业技术篇Ｍｏｄｅｍ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｏｃｔ ２０１５ Ｖｏｌ １５ Ｎｏ １０ 死亡率高，且必需呼吸机支持。 心室重构是ＣＨＦ的病理生理基础，超声心动图检查心脏 功能、评价心力衰竭等方面具有无创伤，动态监测方便等优 点 。本实验用超声心动图、ＨＥ染色和马松染色下心肌病 理变化反映大鼠心室重构。可见建模８周大鼠有显著的心 室壁增厚肥大、心腔扩大；组织学上表现为心肌细胞肥大、排 列紊乱、间质增生、心肌间质纤维化、间隙增宽、细胞核浓染 增大、着色不均、心肌肌节增多、肌纤维间疏松水肿等特点。 此外，结合临床水肿发绀等症状，可知按照此方法可以较稳 定的制备出大鼠慢性心力衰竭模型，并由手术操作简易、术 后大鼠存活率高以及８周后大鼠ＣＨＦ表现，可知本方法是一 种较理想的ＣＨＦ模型建立方法。 采用腹主动脉部分缩窄术时，大鼠腹主动脉缩窄后肾血 流量显著减少，激活ＲＡＡＳ系统并造成体内钠水潴留，加重 心衰” 。一方面增加压力后负荷，另 方面通过减少肾血流 量致钠水潴留、增加前负荷，血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）激活 增加使Ａｎｇ Ｉ转化为ＡｎｇⅡ，后者可使血管强烈收缩，加重心 脏后负荷，引起心肌重构，形成恶性循环 。故本建模方法 尤其适合研究由压力负荷过大而致的心肌肥厚并且从心衰 代偿期到失代偿期病理及临床表现的变化，并通过腹主动脉 的机械性缩窄直接导致心脏射血的后负荷增加，从而形成了 不易受药物影响的稳定的高血压，更利于研究从高血压致心 肌肥厚并转变成慢性心力衰竭的各种病理改变，与临床有较 好的相关性 。因此，腹主动脉缩窄术致动物心力衰竭 模型值得推广使用。 本课题组采用腹主动脉缩窄术制备大鼠ＣＨＦ模型，根据 建模的效果思考总结，得出建模过程中的注意事项： ①术前８小时禁食，否则手术中鼓胀的胃体会影响分离 腹主动脉的手术视野，胃附近连着脾处有大量血管，在隔离 过程中也容易损伤导致大出血。 ②开腹时要逐层剪开，避免伤到小血管造成出血。同时 在剪开最后一层时需要用镊子提起来再剪，防止锋利的剪刀 直接剪破内脏。 ③暴露手术视野时，肠管、胃体、脾的隔离固定需用经生 理盐水湿润过的纱布，同时在手术中注意保持湿润。若肝叶 挡住视野可放置小棉球进入腹腔顶住肝脏使不其下垂，但切 记放人小棉球位置和数量，方便术后取出。 ④分离腹主动脉动作要轻柔，注意避开附近小的血管， 防止术中出血，出血一方面影响手术视野，同时也降低手术 后成活率。另外，不必分离过长腹主动脉，可容４—０手术缝 线顺利穿过即可。 ⑤结扎松紧度的判断：腹主动脉结扎的松紧程度是缩窄 程度的重要影响因素，结扎紧后立即可观察到如图１左肾明 显缺血变白，结扎后向外轻拉针头，以针头有明显阻力，不向 外滑脱为宜。 ⑥结扎部位的选择：结扎部位需谨慎，多在左肾静脉水 平沿腹主动脉向上１．５—２ ｃｍ处将腹主动脉于７号针头共同 结扎，结扎点选择过上会增加分离腹主动脉难度且在分离过 程中易损伤膈膜导致气胸；结扎点过低则可能结扎在右肾动 脉分叉处以下，则不能导致大鼠心脏后负荷明显增加而难以 造成心力衰竭。 ⑦术后肠粘连肠梗阻的预防：术前备皮需尽量清理干 净，防止开腹后鼠毛进入腹腔。术前洗去乳胶手套上滑石粉 后进行手术操作，术前准备湿润纱布铺于切口左侧，术中需 用生理盐水保持外露肠胃湿润，术后确认放置进腹腔的棉球 全部取出后自然复位胃、脾和肠管。 ⑧大鼠麻醉后体温下降，故术中和术后都需注意保暖。 ⑨术后可喂养８小时糖盐水（４％葡萄糖、０．９％氯化 钠），同时观察大鼠是否有排便腹胀等情况以便确认是否有 肠粘连梗阻，并需勤换饲养垫料，保持自然环境清洁。 ⑩对４周及８周建模大鼠行超声时需要麻醉固定，但由 于八周时大鼠心功能不全，建议减量注射，以防麻醉 过深导致大鼠意外死亡。 参考文献 ［１］ 邢作英，王永霞，朱明军．慢性心力衰竭流行病学研究现状 及其病因［Ｊ］．中华实用诊断与治疗杂志，２０１２（１Ｏ）：９３７— ９３８． ［２］ ＦＥＬＤＭＡＮ Ａ Ｍ．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｃａｒｄｉａｃ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｃｏｍｐｅｎｓａｔｅｄ ｈｙｐｅ￣ｍｐｈｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｔｏ ｃａｒｄｉａｃ ｄｅ— ｃｏｍｐｅｎｓａｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｏ￣ｉｅ ｂａｎｄｉｎｇ『Ｊ］．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ． １９９３，７３（１）：１８４—９２． ［３］ 王瑞芳．压力负荷诱导的大鼠舒张性心力衰竭模型的建立 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［１３］ＭＥＲＣＡＤＩＥＲ Ｊ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｍｙｏｓｉｎ ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｓｅｖｅｒａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｒａｔ ｃａｒｄｉａｃ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ［Ｊ］．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，１９８１，４９（２）： ５２５—３２． ［１４］马力．心力衰竭模型大鼠心脏肥厚指标与心功能的关系研 究［Ｊ］．首都医科大学学报，２０１０（０５）：５９６—５９９． ［１５］朱文晖，张晓红，肖渊茗．超声心动图评价心力衰竭大鼠模型 心功能改变［Ｊ］．中南大学学报（医学版），２００９（０５）：４５３— ４５６．
