国匣疆眭猛２０１４年１２月第１２卷第３４期 ・实验研究・ ５９ 消痹方对兔膝骨性关节炎软骨下骨Ｃｙｃｌ ｉｎ Ｄ１ ｍＲＮＡ的影响 林乔龄 李 陈志 （１福建中医药大学附属漳州市中医院，福建漳州３６３０００；２福建中医药大学附属康复医院，福建福州３５０００３） 【摘要】目的探讨消痹方对兔膝骨性关节炎软骨下骨Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｍＲＮＡ的影响。方法将新西兰大白兔分为试验组和对照组，术后１周开 始分组灌胃治疗 采用ｘ线摄片、光镜对软骨下骨进行组织形态学观察，ＲＴ－ＰＣＲ法检测软骨下骨Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达。结果试验组软骨下 骨退变表现、骨质增生和软骨下骨结构紊乱现象明显较对照组轻，试验组骨转换指标Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｍＲＮＡ表达量较低 ＜０．０５）。结论消 痹方通过下调Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｍＲＮＡ的表达，降低软骨下骨重塑速率。 【关键词】消痹方；骨性关节炎；ＣｙｃｌｉｎＤ１ ｍＲＮＡ 中图分类号：Ｒ６８４．３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７１－８１９４（２０１４）３４－００５９－０３ １材料与方法 １．２．１试验前动物处理：①分组及造模：健康６个月龄新西兰大白兔６４ １．１材料 只，随机分为试验组和对照组，每组各３２只。两组均行常规术前准 １．１．１试验药物：消痹方由巴戟天、紫河车、杭白芍、青风藤、两面 备，根据改Ｉ￣Ｈｕｌｔｈ法造模 ：取兔膝关节内侧入路，切断内侧副韧 针、白术组成，系根据福建省名老中医章宝春临症经验整理，现为漳 带，摘除内侧半月板，切断前交叉韧带。术后连续３ ｄ肌内注射青霉 州市中医院协定方。 素２Ｏ万单位，每日２次。②动物喂养：采用一笼一兔喂养，饲养期问 １．１．２动物：健康６个月龄新西兰大白兔６４只，体质量（２０００￣１００）ｇ， 观察其毛色、食欲、活动和体质量变化，术后１周开始每天驱赶２次， 雌雄各半。 每次３０ ｍｉｎ。③给药：按体表面积换算与人的给药剂量口１：新西兰兔 １．１．３主要试剂：反转录试剂盒、ＴＲＩＺＯＬ；ＰＣＲ￣Ｉ物；ＣｙｃｌｅＴＥＳＴＴＭ （２．０ ｋｇ）：成人（６０ ）每日药量Ｘ Ｏ．０７×２／３ Ｘ２．０＝１．１２ ｇ。试验组 ＰｌｕｓＤＮＡＲｅａｇｅｎｔＫｉｔ￣ＦＩＴＣ－ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄＯｙｃｌｉｎＤ１ ＡｎｔｉｂｏｄｙＲｅａｇｅｎｔ ｓｅｔ。 给予消痹方水溶液１０ ｍＬ／ｄ（含消痹方１．１２ｇ）灌胃，每日１次；对照组 １．１．４主要仪器：全自动石蜡切片机，万能研究显微镜，紫外分光光度 给予生理盐水１０ ｍＬ／ｄ灌胃，每日１次。④取材：两组动物均于术后１、 计，超纯水装置，ＣＲ系统，基因扩增仪，蛋白核酸分析仪，离心机，低 ６、９、１２周分批处死取材，每批每组各随机抽取８只动物。 温冰箱，摊片烤片机，生物组织自动脱水机，，生物组织包埋机，电热 １．２．２观察指标及检测方法 恒温鼓风干燥箱，紫外透射分析仪，凝胶成像系统，三恒多用电泳仪。 １．２．２．１ Ｘ线片：摄兔双膝正侧位ＣＲ片，观察两侧膝关节骨结构，包括 １．２方法 周围软组织、关节间隙、关节面的变化及有无骨赘形成。 １．２．２．２光镜制样与观察步骤：①取材：胫骨内侧髁的软骨连同软 基金项目：福建省自然科学基金资助项目（编号２０１２Ｊ０１４５５）； 骨下骨，修成１ ｃｍ×１ ｃｍ ｘ １ ｃｍ大小组织块。②固定：１０％ 国家临床重点专科建设项目资助；国家中医药管理局“十二五” 溶液固定７ ｄ。③冲洗：流水冲洗２４ ｈ。④脱钙：１０％ＥＤＴＡＺ．钠盐， 重点专科建设项目资助 溶于０．１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液，以氢氧化钠调至ｐＨ ７．０，脱钙１４ ｄ。⑤冲 ｝通讯作者 洗：流水冲洗２４ ｈ。⑥脱水：７０％酒精２ ｈ一８５％酒精２ ｈ￣９０％酒精２ ｈ 母乳喂养，此时的婴儿会出现乳头错觉，甚至拒绝吸食母亲乳头。在 代替的。但就目前而言，全世界接受纯母乳喂养４个月的婴儿比例还 加上术后腹部伤口疼痛或不适，会使母亲感觉喂养困难，影响哺乳体 不到３５％，其中发展中国家最为严重。因此，开展母乳喂养护理工作 位和婴儿正确含接，导致母乳喂养失败。因此，若条件允许，临床方 显得尤为重要。在实际的护理工作中，不仅要加强健康宣传和教育， 面应倡导自然分娩，避免分娩方式影响母乳喂养工作的顺利进展 】。 还要将护理服务的本质理念渗透到产妇的内心深处，向产妇提供优质 ２ ＷＨＯ提出的促进母乳喂养的建议和措施 护理服务的同时，要深入分析影响母乳喂养的因素，并作出正确的处 ①以书面的形式倡导母乳喂养的重要性，并将此类以常规的 理措施，只有这样，才能真正的普及新生儿的母乳喂养工作，才能促 方式及时的向所有保健人员传达；建立促进母乳喂养支持组织，可适 进婴儿的健康成长发育，提高国民综合素质，建立新型护患关系，促 当的将出院的母亲转向此类组织。②针对保健人员，给予正确的技术 进社会和谐建设。 培训和指导，从而使其真正的理解母乳喂养的必要性。③积极的 参考文献 向孕妇宣传母乳喂养的优点和处理方法，减少产妇的顾虑。④护理人 ［１］苏敏促进母乳喂养的护理研究新进展四当代医 ２００９，１５（２５）：１２－１３． 员应及时的帮助产妇进行产后半小时内的母乳喂养工作。⑤正确指导 ［２］高海霞，陈京立，高洪莲，等．早产儿母乳喂养的研究进展［Ｊ］护理研 产妇如何喂奶和与婴儿暂时分离时如何保障泌乳工作不受影响。尽可 究，２００７，２１（１５）：１３１７—１３１９． 能的保证母婴同室，明确婴儿和母亲２４ ｈ一直待在一起。⑥告知产妇 ［３３］ 聂含竹ｊ李文 田利平，等．早期母乳喂养护理研究进展［Ｊ］护士进 除非有医学证明，否则除母乳外，不允许给婴儿提供任何饮料或食 修杂志，２０１１，２６（２４）：２２５１－２２５４． 物，并鼓励按需哺乳，嘱产妇不要给母乳喂养的婴儿使用吸橡胶乳头 ［４］张胜敏．护理干预在母乳喂养中的作用［Ｊ】．临床合理用药杂志， 或其他奶头安慰物阁。 ２０１４，（１７）：１４３—１４４． ３讨论 ［５】黄秀美．影响母乳喂养的因素及相关干预措施研究进展［Ｊ］．右江 母乳是婴儿最好的天然食品，其重要作用是其他任何食品都无法 医学，２０１１，３９（１）：８６—８８．
