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中国兽医学报２００２年３月第２２卷第２期Ｃｈｉｎ ＆ Ｍａｒ．２００２ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２ 实验性感染Ｈ９亚型禽流感病毒对鸡的免疫机能及免疫器官的影响 陈义平，是力力，万洪全，许益民，王宝安，朱坤熹 （扬州太学畜牧兽医学院，江苏扬州２２５００９） 捕要；以Ｈ９亚型禽流感稿毒（Ａ１Ｖ）Ｃｋ／ＹＺ株人工感染罗曼蛋鸡，在其免疲器官中仅引起涪氏囊部分淋巴滤泡髓质区 内的蚌巴细胞轻度减少，而胸臃、脾脏 哈氏腺 盲肪扁桃体均束出现璃变 与对照组相比，感染组鸡的外用血淋巴细胞 在白细胞中的分类计薮束出现明显变化。赛验性感染ＡＩＶ Ｃｋ／ＹＺ株后，再进行新城疫Ⅳ系苗免疫，可５ｌ起罗至蛋鸡 血清中抗ＮＤｖ的ＨＩ抗体滴度轻度下降，但免疲后ｌ８ ｄ用ＮＤＶ强毒攻击时，仍能完空保护。 美毽词 禽流感病毒；淋巴组规｛稿理变化｛鸡 中图分类号：￥８５２．６５ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ００５・４５４５（２ＯＯ２）０２—０１５３－Ｏ２ Ｗｒｉｇｈｔ ｓ染色，计数外局血淋巴细胞在白细胞中的分类计数 （ ）．计算平均值。 １．７实验性感染Ａｆｖ后鸡免疫器官的蛔织痛理学变化 １ 日龄鸡用上述硝样的方法接种ＡＩＶ，于感染后第４天扑杀 取 法氏囊 胸腺、脾脏、哈氏腺、盲肠扁挑体．１Ｏ 甲醛溶液固定． 常规石蜡切片．ＨＥ染色，观察免疫器官的组织病理学变化。 同时设未感染ＡＩＶ的正常鸡为阴性对照 禽流感病毒（ＡＩＶ）的毒力差异较大．有高致病性以及中 低致病性之分。中 低致病性禽漉感病毒（ＭＩ’Ａ１Ｖ Ｉ ＰＡＩＶ）的 主要危害在于同新城疫病毒 太肠杆苗等传染性因素协同作 用，以及与一些非传染性因素共同作用引起鸡的多因素呼吸 道病（ｍｕｉｒ［ｃａｕｓａｌ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ），导致发病鸡群的日，Ｅ 海宰上升，还引起产蛋率、受精章 孵ｆｔ率呈不同程度舶下降 而高致病性禽流感病毒（ＨＰＡＩＶ）由于引起突然死亡以及较 高的死亡率，往往对养禽业造戚极为严重的经济损失。 许多学者已证实ＡＩＶ可引起禽舶免疫抑制Ｚ Ｌ，Ｉ］，进而导 ２ 结果 ２．Ｉ ＡＩＶ感染对鸡血清中抗ＮＤＶ ＨＩ抗体水平的影响 由 图ｌ可见，感染ＡＩＶ的Ａ．组，经ＩＶ系苗免疫后．在被控测的 各个日龄阶段，其血清中抗ＮＤＶ的Ｈ１抗体水平均低于来感 染ＡＩＶ的Ａ 组，但差异不显著。同时也可见Ａ Ａ 组血清中 抗ＮＤＶ Ｈ１抗体的消长规律一致。 致鸡群的免疫失败以及机体对各种病原微生物的易感性增 高。鉴于中、低致病性禽流感已在我国部分省市的鸡群中普遍 存在和流行口 ］，本试验主要就／－／９亚型禽流感病毒实验性感 染对鸡群新城疫疫苗免疫水平的影响以及机体免疫器官的组 织病理学变化 外周血液中淋巴细胞在白细胞中分类计数的 变化进行探讨 １材料与方法 Ｉ．１痛毒Ｈ９亚型禽流感病毒Ｃｋ／ｙＺ株，经ＳＰＦ鸡胚复 壮．收集尿囊渣，血凝价为２ ；新城疫病毒Ｌａ Ｓｏｔａ株 ＣＹ株 ＜１ＣＰ１—１．６４） １．２动物罗曼蛋鸡种蛋１５０枚，经严格消毒，本室孵化．大 ５０只５１日龄的鸡随机均分为２ 江公司全价料饲喂。 Ｉ．３ ＡＩＶ攻毒殛ＮＤ免疫组（Ａ…Ａ）．隔离饲养。Ａ 组经气管内接种１ １８＇稀释的 ＾Ｉｖ 种毒，接种剂量为每只０．２ ｍＩ ７ ｄ后，Ａ．．Ａ：组均进行ＮＤ 系苗点跟．清彝免疫。 ｊ．４ ＮＤＶ ＨＪ抗雄效价测定Ａ 、 纽分别于免疫后４、７、 图１ Ａ１Ｖ感染对鸡血清中抗ＮＤＶ ＨＩ抗体水半的影响 Ａ Ｌ ＡＩＶ感染后７ ｄ进行 Ｄ～系苗免痉；Ａ 未感染 Ａ１Ｖ，仅进行ＮＤⅣ系苗免症 １５ ｌ９ ２４ ２７、３ｌ ３４ ｄ采血，分离血清，按ＯＩＥ标准方法测定 抗ＮＤＶ的ＨＩ抗体效价，计算每组ＨＩ抗体滴度的平均值，绘 制抗体消长曲线。 Ｉ．５ ＮＤＶ强毒攻击试验Ａ 、Ａ２纽于ＮＤⅣ系苗免疫后ｌ８ ２．２ Ａ［Ｖ感染对实验鸡ＮＤⅣ系苗免疫僳护率的影响 ８． ｄ，各取ｌＯ只鸡，分别设为Ｂ Ｂ组，并同时对Ｂ． 组经气 组于５１日龄时接种ＡＩＶ．７ ｄ后进行ＮＤ 系苗免疫，免疫后 １８ ｄ用ＩＣＰＩ＝Ｉ．６４的ＮＤＶ ＣＹ株攻击．结果同Ｂ 组一样． 管内接种】ｔ】０稀释舶ＮＤＶＣＹ株尿囊渣．每只０．２ｍｌ １．６ ＡＩＶ藉染对鸡外周血淋巴细胞在白细胞中分类计数的 影响将２０只５１】ｊ龄鸡随机均分为２组（ｃ Ｃ），隔离饲 养 （： 组经气管内接种ＡＩＶ，方法及剂量同Ａ 蛆。Ｃ 组为鹏 性对照。分别于２、３、４、５．６ ７、１４ ２１ ｄ采血．铷作血涂片． 收稿日期 ２００１—０４—１４ 均能完全保护。观察】０ ｄ，束见任何异常表现 ２．３实验性感染Ａ［Ｖ对鸡外周血淋巴细胞在白细胞中分类 计数的影响实验性感染ＡＩＶ后，外周血淋巴细胞在白细胞 中的分类计数未出现明显变化，Ｃ．、Ｃ 纽在ＡＩＶ感染看２、３、 ４．５ ６ ７ ｌ４、２１ ｄ所计数的各组数值均无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）．各组分类计数的平均值见表Ｉ 作者简介：昧史平ｔ１９６６￣）．男．博士 维普资讯 http://www.cqvip.com
１５４ 中国兽医学报２００２年３月第２２卷第２期Ｃｈｉｎ ＶｅｔＳｃｉ Ｍａｒ．２００２ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２ Ｄｕｅ等 的研究报告指出，禽流感病毒可导致Ｂ细胞在外源 性抗原刺激后所产生的免疫球蛋白的结构以及抗原反应性发 生改变 Ｈｏｌｔ等￣ｓ．９３则发现除ＨＩ３型以外，ＨＩ～ＨＩ２型ＡＩＶ 均能增强鸡的淋巴细胞活性，以１株鸡探性的Ｈ４Ｎ８型ＡＩＶ 袁１实验性感染ＡＩＶ鸡不同时间外周血淋巴细胞 在白细胞中的分类计数结果 组别 ２ ｄ ３ ｄ ４ ｄ ５ ｄ ８ ｄ ７ ｄ １４ ｄ ２１ ｄ ５６ ５９ ６５ ６５ ４ ６７ ＡⅣ感染组Ｃｉ ５５ ５ ３．３ ５６ 对厢组ｃ： ５８ ５７ ５７ ７ ５７ ６０．３ ８６ ６７．６ ６８．７ 进行试验，发现ＡＩＶ可促使外周血淋巴细胞合成和释放ＩＬ一２ 增多 由此可见，无论是高致病性禽流感病毒（ＨＰＡＩＶ），还是 中、低致病性禽流感病毒，不同毒株（即使是同一血清型）对机 体免疫器官以及免疫机能的影响可能不一致，甚至差异较大。 参考文献； ［１］Ｖａｎ Ｃａｍｐｅｎ Ｈ，Ｅａｓｔｅｒｄａｙ Ｂ Ｃ，Ｈｉｎｓｈａｗ Ｖ Ｓ．Ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｅｙｔｅｓ ｂｙ ａ ｖｉｒｕｌｅｎｔ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｖｉｒｅｓ［Ｊ］ 】Ｇｅｎ Ｖｉｒａｌ， ２．４ 实验性照染ＡＩＶ后鸡免疫器窖的组骞！病理学变化 ＡＩＶ感染后第４无，感染鸡的胸腺、脾脏、哈氏腺、盲肠扁桃 体均未见府变。但感染组每只鸡的法氏囊均出现较轻微的病 变，主要表现为法氏囊部分淋巴滤泡髓质区的淋巴细胞减少， 髓质区轻度水肿，但淋巴滤泡大小基率正常。 ３讨论 本试验结果表明．Ｈ９亚型禽流感病毒Ｃｋ／ＹＺ株人工感 １９８９ ｒ７０：４６７～４７２ ［２］Ｌａｕｄｅｒｔ Ｅ，Ｓｉｖａａｎａｎｄａｎ Ｖ，Ｈａｌｖｏｒｓｏｎ Ｄ．Ｅｌｆｅｃｔ ｏｆ ａｎ Ｈ５Ｎ９ ａ— ｖｉａｎ￣ｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｍａｌｔａｒｄ 染罗曼蛋鸡，在免疫器官中仅弓Ｉ起法氏囊部分淋巴滤泡髓质 区内的淋巴细胞轻度减少，而胸腺，脾脏、哈氏腺、盲肠扁桃体 均未出现府变，与对ｊ！｝ｉ组相比，ＡＩＶ感染组鸡的外周血淋巴 ｄｕｃｋｓ［１］ Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ ３７：８蚯～８５３． ［３］陈伯伦，张泽纪，陈伟斌 禽藏感的研究［Ｊ］中国兽医杂志， ｉ９９４．２０（１０）：３～５ 细胞在白细胞中的分类计数未出现明显变化，实验性感染 ＡＩＶＣｋ／ＹＺ株后，再进行新城疫１７系苗免疫，可引起罗曼蛋 鸡血清中抗ＮＤＶ的ＨＩ抗体滴度轻度下降，但免疫后１８ ｄ用 ＮＤＶ强毒攻击时，仍脂完全保护 在实验室条件下，人工感染中、低致病性禽流感腐毒仅引 ［４］唐秀英，付朝阳，冯蒲艳Ｈ９亚型禽藏感的流行与防治｜Ｊ］＿预防 兽医学进展，２０００，２（４）：１～３． ［５］于靡蕞，付朝阳，崔尚金，等．我国禽流感舫翩研究进展Ｌｊ］．中 国兽医学报，２００１，２１（１）：１０３～１０６ ［６３ ＶａａＣａｍｐｅｎＨ， ｓｔｅｒｄａｙＢＣ．ＨｉｎｓｈａｗＶ Ｓ．Ｖｉｒｕｌｅｎｔ ａｖｉａｎｉｎ ｆｌｌｕｅｎｚａ Ａ ｖｉｒｕｓｅｓ：ｔｈｅｉｒ ｅＨｅｅｔ ｏｎ ａｖｉａｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔ￣ａｎｄ 起ＳＰＦ鸡发府，而其他各品种的鸡接种后往往无临床表现， 但这并不影响我们对ＡＩＶ感染所弓Ｉ起的鸡的免疫机能以及 免疫器官组织学变化的现察，也正是由于ＳＰＦ鸡与其他品种 的鸡对中、低致病性鸯流感病毒的反应性不同，为了反映实际 生产状态，本试验选用清洁的罗曼蛋鸡而不是ＳＰＦ鸡作为实 验动物 有关禽流感病毒对淋巴细胞 及免疫系统的影响，Ｖａｎ 等 发现某些高致病性的Ｈ５型ＡＩＶ感染，能引起鸡的免疫 器官严重损伤，淋巴细胞大量减步，而其他一些高致病性的 Ｈ５型ＡＩＶ毒株对感染鸡的淋巴组织很少甚至不产生影响 Ｌａｕｄｅｒｔ等 对１株野鸭源性的Ｈ５Ｎｌ型ＡＩＶ的研究表明， ＡＩＶ可抑制Ｔ细胞的功能，但可增强巨噬细胞的吞噬活性。 ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ２ ８８７～２ ８９５ 瑚ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ［】］Ｊ Ｇｅｎ Ｖｉｒａｌ，１９８９，７０： ［７］Ｄｕｅ Ｄｏｄ。ｎ Ｍ，Ｇａｚｚｏｌｏ Ｌ，Ｑｕａｓｈ Ｇ Ａ， ａｔ．Ｓｅｃｔｅｆｌｏｎ ｏｆ ｉｍ— ｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌ ＬⅡｓ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ａｌｔｅｒ ｉｎｌｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｉｎ— ｆｌｕｅｎｚａ￣ｒｕｓ［Ｊ］．】Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ，１９８２，６３：４４１￣４５０． ［８３ Ｈｏｌｔ Ｐ Ｓ．Ｌａｔｉｍｅｒ Ｊ Ｍ．Ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｌ ａｖｉａｎ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ ｏｎ ｃｈｉｃｋｅｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｆ］．Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ，１ ９８９．３３：７４３～ ７４９． ［９３ Ｈｏｌｔ Ｐ Ｓ．Ｅｎｈａｎ㈣ｅｎ｝ｏｉ ｔｈｉｃｋｅｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ ｒｅ Ｊｅａｓｅ ｂｙ ａｖｉａｎ ｉｔｔｆｌ…ｚａ ｍｕｎｏｌ，１９９０．ｊ４：４４７～４５５． ｓ｜Ｊ］＿Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ ｌｍ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｈ９ Ａｖｉａｎ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｖｉｒｕｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｃｈｉｃｋｅｎ ＣＨＥＮ Ｙｉ—ｐｉｎｇ，ＷＵ Ｌｉ—ｌｉ，ＷＡＮ Ｈａｎｇ—ｑｕａｎ，ＸＵ Ｙｉ—ｍｉｎ，ＷＡＮＧ Ｂａｏ—ａｎ ＺＨＵ Ｋｕｎ—ｘｉ（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ＶｅｔｅｒｉＮａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２５００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｎ ａｖｉａｎ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｖｉｒｕｓ Ｃｋ／ＹＺ ５ｔｒａｉｎｔＨ９）ｏｎ ａｖｉａｎ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｂｙ ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｌｉｇｈｔ ｌｙｍｐｈｏｐｅｎｉａ ａｐｐｅａｒｅｄ ｉｎ ｓｏｍｅ ｂｕｒｓａ［ｍｅｄｕ１ １ａ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｃｋ／ＹＺ，ｂｕｔ ｎｏｔ ａｐｐｅａｒｅｄ ｉｎ ｔｈｙｍｕｓ，ｓｐｌｅｅｎ，Ｈａｒｄｅｒ ｓ ｇｌａｎｄ，ｃｅｃａｌ ｔｏｎｓｉｌＣｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃａｎｔｒｏｔ ．ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｗｈｉｔｅ ｃｅｌｌｓ ｈａｄ ｎｅａｒｌｙ ｎｏ ｃｈａｎｇｅ Ｖａｃｃｉｎａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｉ ａ Ｓｏｔａ ｓｔｒａｉｎ ｏｆ Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ｏｎ ｄａｙ ７ ｐｏｓｔ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｃｋ／ＹＺ，ｔｈｅ ｔｉｔｒｅｓ ｏｆ ＨＩ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｇａｉｎｓｔ ＮＤＶ ｓｌｉｇｈｔ］ ｒｅｄｕｃｅｄ，ｈａｗｅｖ ｅｒ，ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ｓｔｉ］Ｉ １００ ｗｈｅｎ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ ｗｉｔｈ ｖｅｌｏｇｅｎｉｃ ＮＤＶ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｖｉａｎ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ）ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅＩｈ ｓｔｏｐａｌｈｏ１ｏｇｉｃａＩ ｅｘａｍｉ￣ｔａｔｉｏｎ；ｃｈ ｋｅｎ
