一种将多个基因同时导入微生物基因组的方法

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN201210196996.9 （22）申请日 2012.06.14

（71）申请人 中国科学院微生物研究所

地址 100101 北京市朝阳区北辰西路1号院3号

（10）申请公布号 CN102719481A

（43）申请公布日 2012.10.10

（72）发明人 张延平;张博;孙红兵;朱泰承;李寅;马延和 （74）专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人 关畅

（51）Int.CI

C12N15/90; C12N1/19; C12R1/865;

权利要求说明书 说明书 幅图

（54）发明名称

一种将多个基因同时导入微生物基因组的方法

（57）摘要

本发明公开了一种将多个基因同时导入微

生物基因组的方法。本发明提供了制备表达多个外源基因的重组微生物的方法，包括如下步骤：将各个基因的表达盒一起导入宿主微生物，得到将多个外源基因整合入基因组并表达所述多个外源基因的重组微生物；第一个基因的表达盒的

5’端具有同源臂甲，最后一个基因的表达盒的3’端具有同源臂乙，每个基因的表达盒的3’末端和下一个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；所述同源臂甲和所述同源臂乙可与所述宿主微生物的基因组发生同源重组。通过该方法，可以将目标代谢途径所含多个基因一步导入宿主菌株中，并按所设定的顺序排列，直接获得所需要的工程菌株，避免多次转化及载体构建所带来的麻烦。

法律状态

法律状态公告日

法律状态信息

2012-10-10 公开 2012-10-10 公开

2012-12-05 实质审查的生效 2012-12-05 实质审查的生效 2014-11-05 授权 2014-11-05 授权 2019-05-31

专利权的终止

法律状态

公开 公开

实质审查的生效 实质审查的生效 授权 授权 专利权的终止

权利要求说明书

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说明书

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